Boquet Jiménez, Ernesto

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LA CAPACIDAD DE LAS BACTERIAS PARA PRODUCIR CRISTALES 
SU POSIBLE REPERCUSlON EN CLINICA * 
Prof. E. BOQUET JIMENEZ 
(de Barcelona) 
Si llego a abusar, queridos consocios, de lo grato que resulta pre- 
sentar a invitados, excúsenme sinceramente. Porque, fortuitamente, el 
celo o la diligencia ligados a una función secretaria1 nada adjetiva, 
decide u obliga a mostrarse u n  tanto ubicuo. 
Y como la resolución de brindar el uso de nuestra tribuna de siglos 
a los jóvenes y a las jóvenes universitarios constituye u n  deseo y una 
necesidad táctica, suelo excederme en el cumplimiento de un  deber. 
Los senectos nos hallamos a gusto aquí -más de una vez lo he afir- 
mado- pero sin restringir el usufructo científico de los tradicionales 
sillones y del atril a los Miembros de la Corporación, en espeeial 20s 
jubilados de la Administración. 
Hoy nos visita -requerido por mí- u n  profesor, catedrático inte- 
rino, de la Facultad de Farmacia, agregado al Departamento de Micro- 
biología, muy  unido de tiempo éste a nosotros. El doctor Boquet lo 
regenta actualmente con pleno acierto. 
Se dedica, por sus investigaciones, cuestiones bromatológicas y 
sanitarias relacionadas con la Medicina. En el lenguaje estatuario aue 
empleamos ocasionalmente es un  «afín» de los sañitaYios médicos. - 
Ha viajado para ampliar conocimientos y a efectos culturales lo 
que le kan permitido sus 31 años de vida. Y en los Centros de Znglate- 
rra, justamente, se le distingue. 
Ha publicado trabajos de investigación, en su especialidad docente 
y de actividades, muy bien calificados. 
En  Manresa ha realizado una labor, de trascendencia sanitaria, en su 
buen Hospital, que domina una extensa zona, la del epicentro catalán 
en uno de sus aspectos. 
V a  a disertar sobre una posible etiopatogenia de la litiasis urinaria 
y sobre el agobiante hospitalismo infeccioso. A m i  juicio, con rigor y 
eventual significación clínica. 
Y nada más por ahora. Esperemos la discusión. Por lo que de Üutori- 
zarlo el Presidente, use ya el profesor Boquet Jiménez de la palabra. 
B. RODRZGUEZ ARIAS 
* Sesión del 8-111-77 
146 ANALES DE MEDICINA Y CIRUGIA Vol. LVII - N." 248 
Se conoce el hecho de que ciertas 
bacterias son capaces de producir 
cristales cuando los factores ambien- 
tales les son propicios para ello. 
Bergey et al. (1930) l en la descrip- 
ción que hacen de varias especies 
de Pseudomonas, ya les atribuyen 
dicha cualidad. 
En los sedimentos bancarios de la 
Gran Bahama, en las costas de Flo- 
rida, hay grandes deposiciones cal- 
cáreas, que para algunos investiga- 
dores son debidas a procesos fisico- 
químicos que se han originado en 
el seno del mar, y para otros son 
productos del metabolismo de cier- 
tos microorganismos. 
Partidarios de la teoría química 
son Lipman (1929))O Lucas (1949),11 
y Tait (1968) 18 entre otros, los cua- 
les, atribuyen la formación de car- 
bonatos, al pH, a la salinidad y a 
cambios de temperatura. 
Seguidores de la segunda teoría 
son Drew (1913); Kellerman y Smith 
(\914),9 Greenfield (1963); Buck y 
Greenfield (1964); Oppenheimer (año 
1961),14 McCallum y Guhathakurta 
(1970),13 Malone y Towe (1970),12 To- 
we y Malone (1970),19 y Shinano 
(1972) l7 entre otros. 
El tema nos interesó y empezamos 
la investigación utilizaqdo rqed i~s  de 
cultivo sólidos en los que sedbrá- 
bamos bacterias aisladas del suelo. 
Se hizo sobre esta base, porque has- 
ta el momento la mayoría de los tra- 
bajos se habían efectuado en medios 
de cultivo líquidos y con gérmenes 
aislados del ambiente marino. 
La principal dificultad de la in- 
vestigación consistía en encontrar 
los medios de cultivo, de composi- 
ción relativamente sencilla, en los 
cuales, una vez sembradas las bac- 
terias se formarán cristales o preci- 
pitados. 
Preparamos unos 30 medios de 
cultivo distintos, de los cuales sólo 
7 erad aptos para la f o r p a ~ i ó n  de 
cristales; su compdsición. se detalla 
en el cuadro 1. 
- 
Acetato sódico 
Acetato magnésico 
Acetato sódico 2 5  
Extracto levadura 4 
Nitrato potásico 0,5 
Glucosa 
Cloruro cálcico 
Cloruro bárico 
Cloruro estroncio 
Agar 16 
Agua destilada 1000 
gs. 
1,3 gs. 
1,45 gs. 
4 gs. 
0,5 gs. 
gs. 
€3. 
gs. 
gs. 
16 gs. 
1000 .mis. 
Castrosorb
Ando-gastrop
actúa de
tiácï
forma d irecta y rápida
rotector
 para
desarrollar su poder de protección.
Composición
Por comprimido masticable:
Beta-glicirretato de aluminio . . . 	 50 mg,
Hidróxido de aluminio, gel seco . . 175 mg.
Trisilicato magnesico 	  350 mg.
Indicaciones
Hiperclorhidria, gastralgias y pirosis.
Gastritis; úlceras gástricas, úlceras duodenales;
gastritis y úlceras de etiologia yatrogénica.
Dosis
1 a 2 comprimidos, a tornar masticados en el
intervalo entre las principales comidas (hora y
media después de cada comida), según la
gravedad de le dolencia o la magnitud de los
síntomas,
Contraindicaciones
No se conocen.
Incompatibilidades
No se conocen.
Presentación
Envases de 40 comprimidos y envases de
15 comprimidos masticables.
P.V.P.
Envase de 40 comprimidos: 26980 Ptas.
Envase de 15 comprimidos: 121'-- Ptas.
•
INFAR 	 NATTERMANN
ApanaUO 400-Zarugoza	 Infanta Gallota, 84-880atcelona15
Abril - Junio 1977
	
ANALES DE MEDICINA Y CIRUGIA	 147
Las siembras se realizaron median-
te espátula,' de Digralsky a partir de
diluciones del 
_ suelo. El medio que
mejores resultados nos dio fue el
B - 4, en el cual .pudimos aislar 215
cepas de microorganismos produc-
tores de cristales. En el «screening»
clasificatorio de dichas cepas, se
comprobó que pertenecían a un am-
plio grupo, compuesto por 22 espe-
cies distintas.
AZOTOBACTER CHROOCOCCUM
ARTHROBACTER GLOBIFORMIS
BACILLUS CEREUS
BACILLUS FIRMUS
BÀCILLUS GLOBIGII
BACILLUS LENTUS
BACILLUS PUMILLUS
BACILLUS MEGATERIUM
BÀCILLUS SUBTILIS
LACTOBACILLUS BULGARICUS
CITROBACTER sp.
ENTEROBACTER AEROGENES
ENTEROBACTER CLOACAE
ESCHERICHIA COLI
Al observar esta capacidad co-
mún, que poseía un grupo tan hete-
rogéneo de bacterias, empezamos a
preguntarnos si el fenómeno no se-
ría más general de lo que creíamos;
entonces inocujamos por. el método
de siembra masiva los siguientes mi-
croorganismos de la colección de
nuestro laboratorio de, la Facultad
de Farmacia:
KLEBSIELLA PNEUMONIAE
PROTEUS MIRABILIS
PROTEUS MORGANII
PROTEUS RETTGERI
PROTEUS VULGARIS
PSEUDOMONAS AERUGINOSA
SERRATIA MARCESCENS
SHIGELIA FLEXNERI
SHIGELLA SONNEI
SARCINA LUTEA
STAPHYLOCOCCUS AUREUS
STAPHYLOCOCCUS EPIDERMIDIS
STREPTOCOCCUS FAECALIS
En el medio B - 4 todos los gérme-
nes citados poseían la capacidad de
producir cristales, los cuales, fueron
identificados en un principio me-
diante procedimientos físico - quími-
cos: solubilidad, desprendimiento de
dióxido de carbono con ácido clor-
hídrico diluido, espectrofotometría
de I.R., y por procedimientos geoló-
gicos (reacción de Meingen) y mi-
croscopio petrográfico, resultando
ser de carbonato de calcio. Se co-
rroboró esta opinión por difracción
de rayos X, en un aparato Philips
PW 1010 con contador de centelleo,
equipado con sistema de discrimi-
nación de altura deimpulsos, con
anticátodo de cobre y filtro de ní-
quel, operando a 28 mA y 34 Kv. El
diagrama usado fue el de polvo cris-
talino. Como se ha citado, los cris-
tales resultaron ser de carbonato de
calcio de tipo calcita .2, 3, 4,
Ahora bien, ¿cuál es el proceso
por el cual se producen estas formas
cristalinas? En un principio sospe-
148
	
ANALES DE MEDICINA Y CIR.UGIA	 Vol. LVII - N.° 248
chamos que los cristales procedían
de la transformación de un sustrato,
el cual, si continuamos ciñéndonos
al medio B - 4, sería el acetato cálci-
co, hipótesis que pronto vimos que
no era cierta, pues usando otras sa-
les cálcicas también se producían.
Actualmente creemos que se ori-
ginan por el siguiente mecanismo:
el dióxido de carbono procedente
del metabolismo bacteriano, junto
con las moléculas de agua del me-
dio de cultivo a pH algo alcalino,
formará carbonato, el cual, con io-
nes calcio dará carbonato de calcio.
De igual modo, si sustituimos el
ión calcio por cualquier otro ión al-
calinotérreo, podemos llegar a ob-
tener sus correspondientes carbo-
natos, siempre que éstos sean inso-
lubles. Así hemos obtenido cristales
de Estroncianita 2.3 en el medio
B - 19. Lo que no se ha podido obte-
ner es Carbonato de Bario, pues pro-
bablemente debido a pequeñas im-
purezas en azufre que contiene al-
guno de los componentes del medio,
siempre se produce Sulfato de Ba-
rio.
Esta experiencia que podemos de-
nominar geológica, nos encaminó a
considerar que algo análogo podía
suceder en algunos lugares del cuer-
po humano, siempre que existieran
las condiciones oportunas para ello.
Prepararnos un nuevo medio de
cultivo,' el B - O usando orina esteri-
lizada por filtración, adicionada de
una pequeña cantidad de acetato
de calcio, hidróxido sódico para es-
tablecer un pH superior a la neutra-
lidad y agar purificado Dif co. Sobre
él se inocularon de forma masiva,
enterobacteriáceas aisladas de ori-
nas de diversas procedencias.
A los pocos días de incubación, en
la mayoría de los cultivos podía ob-
servarse microscópicamente unos
pequeños cristales intra y extracolo-
niales que aumentaban de tamaño
con el tiempo.
Según el Dr. Puigvert, 15
 la litogé-
nesis se produce en aquellos lugares
donde el líquido que va filtrando
queda remansado y no fluye con la
rapidez normal. Allí se va forman-
do el microlito que después se trans-
formará en placa de Randall y pos-
teriormente en cálculo o «piedra».
Si en el lugar donde se produce
la disminución del flujo del líquido
orgánico, se acantona un determina-
do grupo de bacterias —en caso de
que haya iones calcio y una reacción
algo alcalina—, se puede producir un
fenómeno análogo al que se produ-
ce «in vitro», formándose lo que cón
el tiempo se convertirá en piedra
de riñón o de vejiga.
Es compatible con estas ideas, el
hecho de que la litiasis no se cura
después de desprenderse el objeto
causante del dolor, sino que puede
repetirse, y asi ocurre en muchas
ocasiones, hasta que se eliminan las
fuentes etiológicas., entre las cuales,
en esta exposición, pretendemos des-
tacar a las microbianas.
En nuestras experiencias «in vi-
tro» con modificaciones del medio
B - O, hemos obtenido además de los
Abril - Junio 1977	 ANALES DE MEDICINA Y CIRUGIA
	 149
cristales de COSCA, los pertenecien-
tes a otros tipos, que concuerdan es-
tructuralmente con ácido úrico, con
oxalato cálcico, y con fosfato amo-
nicomagnésico.
En el medio de CLED, medio só-
lido con cistina y lactosa y deficien-
te en electrolitos, hemos obtenido a
partir de un E. coli aislado de orina
cristales macroscópicos de oxalato
cálcico. Este mismo fenómeno ha
sido también observado por el Dr.
Roca de Viflals 16 en el laboratorio
del Dr. Arcalis, en la Residencia
Francisco Franco de la Seguridad
Social.
Actualmente hemos introducido la
serie de medios B - B, integrados
esencialmente por bilis esterilizada
por filtración, adicionada de alguna
sustancia nutritiva o energética. Aun-
que los primeros resultados son al-
tamente positivos, sobre todo en el
medio B - B 10, todavía es pronto
para que expongamos públicamente
su composición y el tipo de microor-
ganismos utilizados, los cuales, pro-
ceden de aislamientos realizados en
bilis. En todo caso lo que podemos
adelantar es que a partir de Salmo-
nella typhi hemos obtenido crista-
les que morfológicamente pueden
ser de Colesterol.
Con lo desarrollado, sólo hemos
pretendido , exponer unas experien-
cias efectuadas «in vitro», que de
tener correlación «in vivo», explica-
rían en parte los fenómenos de lito-
génesis. Me gustaría aclarar que no
queremos excluir ni negar que estos
procesos puedan también ser debi-
dos a otras causas.
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150	 ANALES DE MEDICINA Y CIRUGIA
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La capacidad de las bacterias para producir cristales. Su posible repercusión clínica

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