Durfort i Coll, Mercè

Revistes Catalanes amb Accés Obert

MICROANALISIS DE LAS CONCRECIONES INTESTINALES DE CYCLOPS 
STRENUUS FISCH. (CRUSTACEA, COPEPODA). ESTUDIO PRELIMINAR 
M. DURFORT 
Durfort, M., 1980 (1982). Microanilisis de las concreciones intestinales de Cyclops stre- 
nuus Fisch. (Crustacea, Copepoda). Estudio preliminar. Misc. 2001. 6:  27-32. Barcelona. 
The Qualitative and Quantitative Electron Probe Microanalysis on spherulites found in 
type B celis of the intestinal epithelium Cyclops strenuus revealed the presence of mag- 
nesium, potasium and calcium phosphates in the concentricaiiy laminated concretions. 
M. Durfort, Dpto. de Morfologia Microscbpica, Facultad de Biologia, Universidad de 
Barcelona, Barcelona. 
INTRODUCCION Ocasionalrnente se han descrit0 esferocris- 
tales en dlulas del cuerpo graso de insectos 
Los esferocristales o concrecionesl halla- (LHONORÉ, 1977), asi como en oocitos de 
das en determinadas células del tubo digesti- Miriápodos (PETIT, 1970), de insectos 
vo, en las células bioacumuladoras de calcio (CANTACUZENE &MARTOJA, 1968) y de 
del hepatopáncreas de Moluscos y Crustá- Crusticeos (ZERBIB, 1980). En este Últirno 
ceos y en las células de 10s tubos de Malpighi tip0 celular su significación es altamente du- 
de numerosas especies de artrópodos, pue- dosa si bien no se excluye un papel en la 
den tener un significado que a grandes rasgos regulación de las síntesis de vitelogenina y su 
se resumen en dos: posterior participación en la vitelogénesis 
a. Significado de reserva, para la consolida- (DURFORT, 1981). 
ción de la concha o del tegument0 en las El aspecto ultraestructural de dichas con- 
fases preexuviales y durante el crecirniento, creciones es en todos 10s casos muy pareci- 
DRACH (1937), RENAUD (1949), HUS- do, una zonación concéntrica de capas de 
SO N (1 9 5 2), CHAISEMARTIN (1967), distinta densidad a 10s electrones, dispuestas 
NATH (1972), DURFORT (1981). alrededor de una masa central o núcleo de 
b. Significado osmoregulador (excretor). material granuloso-fibroso, de extensión y 
Tienen este carácter, entre otras, las forma- densidad variable. 
ciones descritas por MEYER (1957), RA- El origen de 10s litosomas, es decir de las 
ZET (1960), GOURANTON (1968), GRAF vesiculas en cuyo interior se ubicarán las 
(1966, 1969), LHONORE (1971), HUM- concreciones es muy variable, incluso en una 
BERTp(1971), WAKU & col. (1971), en misma especie pueden darse distintos orige- 
células de 10s tubos de Malpighi de insectos y nes (DURFORT, 1982). Se han descrito es- 
en células de 10s ciegos intestinales de ferocristales de origen golgiano, como 10s ha- 
crustáceos, principalmente Amfipodos. llados por ABOLINS-KROGIS (1970) enMo- 
1.  Diversos son 10s nombres hallados en la biblio- 1967), globoides (MELLO & BOZZO, 1969), esfé- 
grafia para denominar formaciones intracitoplas- rulas ( L A V  A L  LA R D, 1 9  6 7), esferocristales 
miticas laminares concéntricas, morfologicamente (BALLAN-DUFRANCAIS, 1972), calcosferitos 
similares a las que describimos en la presente nota. (WAKU & SUMIMOTO, 1972), esferitos (GOU- 
Entre eiios caben destacar: esferitos (COURAN- RANTON, 1 9  6 8  ; ABOLINS-KROGIS, 1970; 
TON, 1968; ABOLINS-KROGIS, 1970; JEANTET, JEANTET, 1971), concreciones laminares (TUR- 
1 9 7  11, esferas laminares (WIGG~ESWORTH, BECK, 1974). 
19651, litosomas (ANDRÉ & FAURE-FREMIET, 
27 
luscos y por SOHAL (1977) en Dipteros. 
BARGMANN & col. (1960), WIGGLES- 
WORTH & col. (1962), HUMBERT (1978) 
encuentran en diversos grupos de la escala 
zoológica, el origen de estas formaciones en 
10s condriosomas. 
En otras ocasiones provienen de grandes 
dilataciones adoptadas por el reticulo endo; 
' plasmático en sus dos modalidades (AND RE 
& col., 1967; FAURÉ-FRÉMIET & col., 
1968;  BALLAN-DUFRANCAIS,  1972); 
HUMBERT, 1973; LAUGA-REYREL, 1979; 
DU RFO RT, 198 1) o bien se forman a partir 
de 10s lisosomas (GOURANTON, 1968; 
JEANTET & col., 1980; DURFORT, 1982). 
Concreciones o esferocristales se originari 
en ocasiones a expensas de vesiculas de ori- 
gen altamente dudoso (LHONORÉ, 1977; 
WOODINC & col., 1978). 
En la presente nota se describe la metodo- 
logia empleada para efectuar el microanálisis 
de las concreciones halladas en las células de 
tip0 B del tracto digestivo medio y posterior 
de Cyclops strenuus y se presentan 10s resul- 
tados obtenidos. 
Ejemplares adultos de Cyclops strenuus reco- 
lectados en el lago de Banyoles (Girona), 
durante 10s meses de julio y octubre, fueron 
fijados preferentemente con glutaraldehido- 
paraformaldehido al 3,5 %, convenientemen- 
te tamponado con cacodilato sódico o con 
Sorensen a pH 7,2-7,3, durante 2 horas a 
4°C. Después de un lavado con tampón se 
procedió a la postfijación con tetraóxido de 
osmio al 170 igualrnente tamponado, durante 
1 h. 30 min. a 4 " ~ .  Tras un lavado con la 
solución tampón y cuidadosa deshidratación 
con una serie ascendente de etanol o acetona 
se procedió a la inclusión de 10s ejemplares 
con Spurr (plástico de escasa viscosidad), 
con Araldita o con Araldita-Epon. 
Los cortes ultrafinos obtenidos con un ul- 
tramicrótomo Reichert OMU fueron conve- 
nientemente contrastados con acetat0 de 
urani10 en solución acuosa al 2% y con citra- 
to de plomo, preparado s egh  la técnica de 
Reynolds, previa observación con un micros- 
copio electrónico de transmisión Philips 200 
del Servicio de Microscopia Electrónica de la 
Universidad de Barcelona. 
Cortes de unos 3 a 5 pm de grosor, mon- 
tados sobre rejilla de cobre, con o sin pelicu- 
la de formvar, fuerón metalizados durante 3 
minutos con oro. Siendo estos cortes obser- 
vados con un microscopio electrónico de ba- 
rrido Phiüps 500, portador de un equipo de 
microanálisis por difracción de rayos X, 
EDAX, modelo 7 11, perteneciente al Depar- 
tamento de Metalurgia de la Escuela Técnica 
Superior de Ingenieros Industriales de Barce- 
lona. 
Cabe subrayar que la propia naturaleza de 
las concreciones, su dureza y por consiguien- 
te su fragilidad, determina que éste sea un 
material difícil de cortar, por 10 que en múl- 
tiples ocasiones, al pasar el bloque por el filo 
de la cuchilla de vidrio, esta arranca 10s esfe- 
rocristales, quedando un agujero en el sitio 
previamente ocupado por la concreción. 
Para evitar justamente la pérdida de con- 
creciones se procedió a metalizar "in toto" 
el bloque, convenientemente piramidado y 
desvastado hasta llegar a una zona, que pre- 
vio estudio de cortes semifinos, se tuviera la 
certeza de tener células B cargadas de con- 
creciones. Los resultados obtenidos con este 
procedirniento no fueron excesivamente sa- 
t isfactor i~~ por lo que se ha seleccionado 
como mis adecuada la observación de 10s 
cortes semifinos para efectuar el microanáli- 
sis en cuestión. 
La concreciones presentes en las células de 
tip0 del tramo medio y posterior del intes- 
tino de Cyclops strenuus (figs. 1, 2 y 3) tie- 
nen de 2 a 4 pm de diámetro y su origen se 
halla en la mielinización adoptada por el re. 
ticulo endoplasmático liso, el cua1 proviene 
del ergastoplasma, por pérdida de ribosomas 
(DURFO RT, 1981). El microanálisis ofrece 
10s resultados que aparecen en la tabla 1. 
Figs. 1-3. 1. Imagen ultraes- ¡ 
tructural del intestino medio 
de Cyclops strenuus, en la 
que se aprecian 10s dos tipos 
de células: A y B. Las flechas 
señalan esferocristales (e) en 
formación. NÓtese la proxi- 
midad de un oocito (O). 
2.280 x; 2. DetaUe de un es- 
ferocristal intestinal en for- 
mación 5.600 x; 3. Concre- 
ción o esferocristal ya bien 
consolidado. NÓtese la zo- 
nación conckntrica, alrede- 
dor de un núcleo (n) de gran 
densidad a 10s electrones 
22.000 x. 
Para una interpretación correcta de 10s re- 
sultados deberiamos disponer del análisis de 
mayor número de concreciones, pertenecien- 
tes a una muestra mis amplia de ejemplares 
de una misma población, a la vez que estos 
ejemplares deberian proceder de recoleccio- 
nes llevadas a cabo en distintas épocas, dado 
que existe en el agua una considerable fluc- 
tuación de iones estacional, mis o menos im- 
portante según las caracteristicas del lago. 
Al respecto cabe recordar que el lago de 
Banyoles es alcalino, rico en sulfatos, princi- 
palmente magnésicos, con un pH de 7,2 a 
7,6 (PLANAS, 1973). 
Por todo ello, 10s datos aportados deben 
considerarse como un avance previo de un 
estudio mis exhaustivo, que se tiene pensado 
llevar a cabo no solamente en distintas espe- 
cies de Copépodos libres y parásitos, sino 
también en Dedpodos recolectados en hábi- 
tats de distinta salinidad. 
Tras el estudio de estos datos preliminares 
podemos considerar que las sales predomi- 
nantes de las concreciones analizadas son 
Tabla 1. Cada columna corresponde al análisis de una irea de 15 Mm tras una exposición de 100 segundos 
trabajando a 25 KV. Cabe señalar que el cobre que se registra procede de la rejilia sobre la que estin 
depositados 10s cortes. 
CALCI0 4.751 % 5.629 % 5.302 % 
COBRE 34.935 % 28.290 % 29.482 % 
FOSFORO 45.417 % 47.880 % 46.820 % 
HIERRO 1.068 % 1.458 % 1.316 % 
MAGNESI0 8.466 % 9.795 % 9.208 % 
POTASIO 5.417 % 6.215 % 6.124 % 
SODI0 0.555 % 0.631 % 0.598 % 
fosfatos, principalmente magnésicos, potási- 
cos y dlcicos. Lo cua1 no concuerda con 
nuestra inicial interpretación, en la que pre- 
suponiarnos una naturaleza eminentemente 
caldrea. 
Cabe señalar que el análisis o diagnóstico 
citoquimico es altamente difícil dado que 
10s mucopolisadridos que constituyen la 
matriz orgánica de la concreción enmascaran 
considerablemente la parte inorgánica de la 
misma, por 10 que el presentar negativa una 
u otra reacción no permite desechar ninguna 
de las restantes posibilidades. Es por elio que 
consideramos interesante insistir en el análi- 
sis por difracción de rayos X para estudiar 
las variaciones cuaiitativas y cuantitativas de 
10s iones presentes en las concreciones de 
Oclops strenuus, comparándolos con 10s 
que se halian a nivel del tegumento. 
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3 2 


Microanálisis de las concreciones intestinales de Cyclops strenuus Fisch. (Crustacea, Copepoda). Estudio preliminar

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