Bonet i Marull, Sergi

Revistes Catalanes amb Accés Obert

S. Bonet 
Departament de Biologia i de Fisiologia cel.lular. Col.legi Universitari de Girona (UAB). 
Hospital, 6. 17071-Girona. 
ARTICLE SCIENTIA gerundensu, 13 35-40 (1987) 
ESTUDIO DEL EYACULADO DE UN VERRACO ESTRESADO 
POR LA FRECUENCIA DE RECOGIDAS EN INSEMINACION 
ARTIFICIAL 
RESUM 
~ 
L'estudi s'ha fet amb un verro sotmts a un ritme de serveis en I.A. inferior a les 12-24 ho- 
res. L'observació de I'esperma s'ha practicat amb el microscopi de contrast de fases i amb 
el microscopi electronic d'escandallatne. 
En les ejaculacions estudiades s'han trobat formes immadures (60%) com a conse- 
qiitncia del transit rapid dels espermatozoides per I'epididim, i morfologies gamttiques 
aberrants atribuibles a disfuncions en el procés d'espermiogtnesi. 
I 
RESUMEN 
El estudio ha sido realizado con un verraco sometido a un ritmo de servicios inferior a las 
12-24 horas. La observación del esperma fue llevada a cabo mediante el microscopio de 
contraste de fases y el microscopio electrónico de barrido. 
En dichas eyaculaciones hallamos formas gaméticas inmaduras (60%) como conse- 
cuencia de su transito rápido por el epididimo. y morfologias gaméticas aberrantes atri- 
buibles a disfunciones en el proceso de espermiogénesis. 
A BSTRA CT 
This study has been carried out with a pig submitted to a services rhythm inferior to 12-24 
hours. Ejaculations observations have been done using a scanning electron microscopy. 
In all these ejaculated specimens, immature gametic forms were discovered because of 
their fast passage along the epididymys. In this way, more than 60% spermatozoa with 
the cytoplasmatic droplet on different levels of the middle piece, from de neck to the Jen- 
sen ring, were found. 
In all the ejaculated specimens it was also possible to observe aberrant gametic mor- 
phologies, which may be attributed to spermiogenesis process dysfunction: two-headed 
and single-flagelated spermatozoa, and one or two headed spermatozoa but without 
flagellum. 
Key words: sperm, spermatozoa, ejaculated, artificial insemination, pig, Sus, Sus domesficus. 
36 S. BONET 
E n  el campo de la biologia de la reproducción, la infertilidad y las causas que 
la provocan han recibido en 10s últimos decenios una atención muy especial, 
no s610 en el hombre sino también en aquellos animales domésticos en 10s que 
la prolificidad desempefia un papel muy importante desde el punto de vista 
comercial. 
En las explotaciones de selección porcina, el número de lechones por cama- 
da es uno de 10s parametros de presión genética que van a tenerse en cuenta 
en la selección del verraco y de la cerda. El estudio de las causas de infertilidad 
o subfertilidad del verraco tendra un gran interés para el ganadero moderno, 
puesto que solo al conocerlas en profundidad podra adoptar las medidas reso- 
lutivas más eficaces tanto en el terreno terapéutico como en el financiero. Son 
muchas las causas que pueden afectar cuantitativa y cualitativamente a la pro- 
ducción espermatica de un verraco. Buxadé (1984) da una relación exhaustiva 
de todos aquellos factores que, a su juicio, afectan al rendimiento prolifico. 
Asi están: el tamaño de 10s testiculos -a su vez relacionado con la edad, la raza 
y la linea del verraco-, el ritmo de servicios, y distintos factores ambientales 
(luz y temperatura), estacionales, nutricionales y de manejo. 
En este trabajo nos ocupamos, concretamente, de la relación negativa 
existente entre una elevada frecuencia de recogida en inseminación artificial y 
la calidad del semen. 
La raza del verraco escogido para este estudio ha sido la Landrace Alemán 
(AL), por ser esta una de las mas utilizadas en el cruce con la hibrida resul- 
tante del cruzamiento entre Large White (LW) y Landrace Inglés o están- 
dar (LR). 
El verraco fue sometido a una frecuencia de extracciones para insemina- 
ción artificial de unas doce a veinticuatro horas. Las eyaculaciones obtenidas 
fueron observadas previamente al microscopio óptico de contraste de fases y, 
posteriormente, fueron procesadas para su examen al microscopio electrónico 
de barrido, siguiendo el protocolo siguiente: 
- Fijación en liquido de Karnowsky durante una hora a 4 "C. 
- Lavado exhaustivo con tampón fosfato de Sorensen 0,16M pH 7,2. 
- Posfijación con tetraóxido de osmio al 1% durante una hora. 
- Lavado exhaustivo con tampón fosfato. 
- Obtención del pellet por centrifugación a 1.800 rpm a 4 O C  durante diez 
minutos. 
- Deshidratación progresiva en serie alcohólica hasta etanol absoluto: 
A-30/A-50/A-70/A-90/A-96/AA/AA/AA. 
- Resuspension del pellet en acetat0 de iso-amilo. Centrifugación y reno- 
vación del liquido de transición, tres veces. 
ESTUDIO DEL EYACULADO 37 
- Deposición de unas cinco gotas de la muestra en un filtro Nuclepore-0,2 
y secado en punto critico'. 
- Metalización hasta un recubrimiento de unos 50 nm de grosor. 
Las observaciones fueron realizadas con un microscopio electrónico de ba- 
rrido Super 111-A-IS1 del Servicio de Microscopia Electrónica de la Universi- 
dad Autónoma de Barcelona. 
OBSERVACIONES 
El espermatozoide epididimario del verraco Landrace Aleman es un gameto 
modificado de una longitud de unos 47 pm. Su examen al microscopio electró- 
nico de barrido permite distinguir tres regiones: la cabeza, la pieza intermedia 
y el flagelo. La cabeza es ovo-plana y mide unos 8,5 pm de longitud por 
unos 4,5 de diametro máximo y 0,35 de grosor. La pieza intermedia presenta 
una longitud de unos 10 pm por 0,7 pm de diametro. El flagelo, de unos 24 pm 
de longitud por unos 0,6 pm de diametro, presenta una pieza terminal ahusa- 
da de unos 2,5 pm de longitud. 
Frente a esta morfologia madura, típica del espermatozoide epididimario, 
hallamos algunas formas aberrantes y mas de un 60% de gametos que, en su 
transito rapido por el epididimo, no han completado el proceso de madu- 
ración. 
Las formas gaméticas inmaduras se ponen de manifiesto por la presencia 
de la gota citoplasmatica a distintos niveles de la pieza intermedia, desde el 
cuello hasta el anil10 de Jensen. Si bien no es rar0 hallar espermatozoides en 
el eyaculado de un cerdo estresado, encontrarlos en tal cantidad obedece, sin 
lugar a dudas, a un proceso incompleto de maduración debido al muy rápido 
transito epididimario a que se ven sometidos cuando el ritmo de extracciones 
es muy elevado. Dicho ritmo, si bien no influye sustancialmente en la cantidad 
de espermatozoides, si afecta considerablemente a su cualidad. Espaciar las 
extracciones en inseminación artificial o 10s saltos (sin contar las repeticiones) 
en un minimo de dos a tres dias y en un máximo de cinco a siete dias ofrece una 
relación calidadlcantidad que nos asegura un rendimiento prolifico optimo del 
verraco. 
Las aberraciones morfológicas mas manifiestas en las eyaculaciones estu- 
d i a d a ~  pueden clasificarse en tres modalidades: 
- Espermatozoides con una única cabeza pero sin flagelo. 
- Espermatozoides con dos cabezas y sin flagelo. 
- Espermatozoides con dos cabezas y un unico flagelo. 
Las causas fundamentales de tales malformaciones hay que buscarlas en la 
espermiogénesis, un proceso morfogenético muy complejo de diferenciación 
celular en el que pueden darse disfunciones ocasionales de origen genético 
o ambiental, o de ambos. 
38 S. BONET 
Figura 1. t<spcrmatoi!oirlc\ ;ihcrr;lntcs con dos c a h c ~ a \  y \ in   col;^. VCase el flagel0 
doblado sobre la pieza intcrrncd~a. 5000 X.  
Figura 2. l<';pcr~~l;ltozoicic\ allerr;tntc\ con do\ c ; I ~ ? c ~ ; I \  y sln COI; I .  A \ P C C ~ O  I;iteral quc 
mucstra I;I dclgadcz dc  la regitin ccf6lica. 5500 X.  
ESTUDIO DEL EYACULADO 39 
La capacidad fecundante del esperma depende fundamentalmente de la con- 
centración espermática, de la motilidad gamética y, en ultimo término, de la 
proporción de gametos defectuosos o aberrantes. 
El examen rutinario, cuantitativo y cualitativo, del esperma de 10s suidos 
ha sido llevado a cabo con el microscopio óptico ordinari0 y con el microsco- 
pio de contraste de fases. La progresiva aplicación del microscopio electróni- 
co de barrido en el campo de la espermatologia humana (Fujita et al., 1970; 
Lacy et al., 1974), y mas concretamente en el diagnostico de 10s casos de infer- 
tilidad o subfertilidad, ha abierto nuevos horizontes en el estudio de la esper- 
matologia comparada y ,  mas aún, en aquellos animales domésticos en 10s que 
la prolificidad desempeña un papel muy importante desde el punto de vista 
comercial. 
Son muchos 10s esfuerzos realizados en nuestros dias para aumentar, en la 
medida de 10 posible, el número de lechones por camada de una cerda y para 
asegurar, al mismo tiempo, un minimo porcentaje de mortalidad en lactancia 
y en el destete. Cualquier investigación dirigida a mejorar la prolificidad de 
una raza contribuirá, sin lugar a dudas, a un mejor conocimiento de la biologia 
de la reproducción de dicha especie y, en consecuencia, a un logro del que se 
derivan muchisimas consideraciones prácticas, útiles para el ganadero. 
Existen muchos factores de origen genético o ambiental, o de ambos, que 
influyen, directa o indirectamente, sobre la prolificidad del verraco (Came- 
rón, 1980; Hurtgen et al., 1980). En este trabajo se ha constatado uno de ellos, 
el ritmo de extracciones en inseminación artificial (I.A.). Los verracos estre- 
sados por una elevada frecuencia de servicios preselntan una pérdida de la ca- 
pacidad fecundante del esperma debida no a la cantidad de espermatozoides, 
sino a la cualidad de 10s mismos: ligero aumento de las formas aberrantes e 
incremento muy considerable de las morfologias inmaduras como consecuen- 
cia del rápido paso que se les exige por el epididimo. So10 espaciando 10s sal- 
tos o las recogidas en I.A. a un minimo de dos dias puede garantizarse una ca- 
pacidad fecundante del esperma que conlleve unos niveles de prolificidad, 
siempre relacionados con la raza, aceptables desde el punto de vista co- 
mercial. 
Bibliografia 
BUXADE, C.C. (1984). Ganado Porcino. Mundi Prensa, Madrid. 
CAMERON R.D.A. (1980). Factores que influyen en la calidad y producción de semen 
en verracos jóvenes. Proc. Int. Pig. Veter. Soc.,  57-58. 
FUJITA, T., MIYOSHI, M. & TOKUNAGA, J. (1970). Scanning and transmission elec- 
tron microscopy of human ejaculate espermatozoa with special reference to their 
abnormal forms. Z. Zellforsch. Mikrosk. Anat., 105: 483-497. 
40 S. BONET 
HURTGEN, J.P., LARSEN, R. & CRABO, B. (1980). Factores que afectan a la calidad 
del semen de 10s verracos. Proc. Int. Pig. Veter. Soc.. 59. 
LACY, D., PET~IT, A.J. P E ~ I T ,  J.M. & MARTIN, B.S. (1974). Application of scanning 
electron microscopy to semen analysis of the sub-fertile man utilising data obtained 
by transmission electron microscopy as an aid to interpretation. Micron, 5: 
135-173. 


Estudio del eyaculado de un verraco estresado por la frecuencia de recogidas en inseminación artificial

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