Aldrufer, Anna

Arroyo, Marta

Cañameras, Núria

Fàbregas, F.X.

Revistes Catalanes amb Accés Obert

ARXIUS de I'Esc Sup. d'Agricumira de Barcelona Any 10QOrOl. Núm 1 5 1 4 .  Pag. 41 - p8g. 50 
MICROPROPAGACI~ DE FICUS ELASTICA CV. ROBUSTA: 
EFECTE DE LES CONCENTRACIONS HORMONALS 
EN ELS MEDIS DE MULTIPLICACI~ 
NÚria Cañameras, Marta Arroyo, F.X. Fabregas 
Escola Superior d'Agnwttura de Barcelona 
Anna Aldrufeu 
Aldrufeu & Associats - Casa de C m p  59 - Vilassar de Mar 
Data de recepció: desernbre de 1991 
RESUM 
Un primer assaig de multiplicacib ens 
mostra que la concentració mínima de 
citoquinines per induir la proliferació de 
nous brots 6s de 10 mg/l de KIN, 10 mg/l 
de 2ip o 1.5 mg/l de BAP amb presencia 
d'AIB. Posteriorment se subcultivaren mi- 
crobrots en 28 medis que contenien KIN 
(20 mg/l), 2ip (20 mg/l) o BAP (1.5, 2.5, 5, 
10 i 20 mg/l) + AIB (O, 0.5, 1 i 1.5 mg/l) 
durant 2 mesos (1 subcultiu). Se seleccio- 
naren 5 medis per estudiar la durada opti- 
ma de subcultiu (5, 6, 7 o 8 setmanes). 
Altes taxes de multiplicació i pocaformació 
de cal.lus s'obtenen utilitzant de 1.5 a 5 
mg/l de BAP addicionat d'un baix nivel1 
d'AIB durant 6 setmanes. 
Mots clau: Auxina, citoquinina, cultiu de 
teixits, durada subcultiu. 
SUMMARY 
Micropropagation of ficus elastica cv. 
robusta: effect of hormonal concentra- 
tions on multiplication media 
A first trial showed that the minimum 
concentration of citokinins to induce shoot 
proliferation was 10 mg/l of KIN, 10 mg/l of 
2ip or 1.5 mg/l of BAP, al1 of them comple- 
mented with IBA. Shoots were cultivated in 
28 media of KIN (20 mg/l), 2ip (20 mal) or 
BAP (1.5, 2.5, 5, 10 and 20 mg/l) comple- 
mented with IBA (0, 0.5, 1 and 1.5 mg/l) for 
2 months (1 subculture). Five media were 
selected to study the optimal duration of 
subculture (5, 6, 7 or 8 weeks). Good proli- 
feration rates and low callus formation were 
obtained with use of between 1.5 and 5 
mg/l of BAP and a low level of IBA just 6 
weeks. 
Key words: auxin, citokinin, time of 
subculture, tissue culture. 
ARXIUS d e  I E x  Sup d Agricultura de Ba~celona 
La micropropagació representa actual- 
rnent la millor tecnica per multiplicar comer- 
cialrnent Ficus (FARTHING, 1988). En el cas 
de Ficus elastica cal provocar la brotació 
de les gemes axil.lars (HUSSEY, 1980), a 
diferencia d'altres iicus com per exemple 
el Ficus lyrata, en el qual s'indueix la brota- 
ció de gemes adventícies (JONA & GRIBAU- 
DO, 1987). La micropropagació de Ficus 
elastica, tot i que les plantes no assoleixen 
una grandaria comercial fins als 6 mesos 
de sortir de ccin vitro~,, dóna plantes arnb 
entrenusos curts, arnb rarnificació basítona 
i color de fulles verd intens, a més arnb la 
possibilitat d'obtenir plantes uniformes 
durant tot I'any. En la bibliografia existent 
(BATLLE & MELE, 1984) les taxes de multi- 
plicació no són gaire altes i a més es pro- 
dueix una quantitat important de cal-lus a 
la base de tofes. El Ficus elastica (cultivar 
(<Robusta,,) és sensible a les condicions 
ambientals de la cambra de cultiu, espe- 
cialment a la temperatura, que pot arribar a 
ser determinant (POUPET et al., 1983). 
S'utilitzaren microbrots de Ficus elastica Assaig 1 
(cultivar ccRobusta,,) en fase de proliferació Es formularen 44 tractaments hormo- 
en els 3 assaigs de multiplicació progra- nals, combinant les següents concentra- 
mats. L'estoc inicial ernprat havia estat cions citoquiníniques i auxíniques, arnb una 
previament subcultivat cornercialment du- durada de subcultiu de 8 setmanes: 
rant un període de 3 anys en el medi des- KIN (1 -5-1 mg/l) 
crit per BATLLE MELE amb una 2ip (1 -5-1 0 mg/l)+ IBA (0-0.5-1 -1.5 rng/l) 
freqüencia de subcultius de w i t  setrnanes. 
El medi nutritiu emprat en tots els assaigs BAP (0.5-1.5-2.5-5-1 0 mgll) 
que descriurem a continuació fou el propo- Assaig 2 
sat per & SKooG (1962)1 amb Atenent els resultats obtinguts en I'as- 
addició de 0.4 mg/l de tiamina, 100 mg/l 
saig es testaren les següents combina- d'inositoi, 30 g/' de sacarosa. gil d'agar ¡ 
cions, resultant un total de 28 tractament~: 
ajustant el pH a 5.7-5.8. 
Per als assaigs 1 i 2 s'utilitzaren pots de KI N (20 mgll) 
vidre que contenien 100 rnl de medilpot. En 2ip (20 mg/l)+ IBA (0-0.5-1 -1.5 mg/l) 
I'assaig 3 s'empraren tubs d'assaig amb 16 BAP (1 52.5-5-1 0-20 mg/l) 
rnl de rnediltub. 
La temperatura de la cambra de cultiu Assaig 3 
fou de 25% c 1% i el fotoperíode de 16 h. Els rnillors medis de I'assaig 2 se selec- 
de llurn arnb una intensitat lumínica de 50.5 cionaren per estudiar la durada optima de 
!iEPARrn 's.'. subcultiu (5, 6, 7 o 8 setmanes). 
ARXlUS de I'Esc Sup. dSAgñcuttura de Barcelona N. Cañameras. M Arroyo. F.X FBbregas. A Aldrufeu 43 
RESULTATS I DISCUSSIÓ 
Assaig 1 
La taxa viable de multiplicació és molt 
baixa, arnb valors propers a 1 en aquells 
tractaments formulats arnb KIN, 2ip o arnb 
0.5 mg/l de BAP (amb o sense auxina) i 
significativament inferiors als que contenien 
dosis iguals o superiors a 1.5 mg/l de BAP. 
Els millors resultats s'aconsegueixen arnb 
els tractaments que contenen 5 mg/l de 
BAP rnés 0.5 mg/l AIB (4.82 microbrots 
viablesltofa) (Taula 1). Aquests resultats 
concorden arnb els de JONA i GRIBAUDO 
(1 987) per a Ficus lyrata, que indiquen que 
la presencia de BAP és absolutament ne- 
cesaria per a la formació de brots. A bai- 
xes dosis de AIB (0.5 i 1 mg/l) s'observa 
que quan incrementa la concentració de 
BAP augmenta significativament la taxa 
viable, la qual torna a davallar arnb concen- 
tracions iguals o superiors a 10 mg/l. 
Les majorsformacions de cal.lus s'obte- 
nen en les combinacions arnb BAP o arnb 
2ip. En general la presencia de cal.lus 
augmenta arnb la concentració d'auxina 
(Taula 2). BATLLE i MELE (1984) també 
observaren que la presencia de BAP en el 
medi de cultiu provoca la formació de 
cal.lus, efecte que es veu potenciat per la 
presencia d'AIB. 
El nombre de fulles obtingut per micro- 
brot indica que les combinacions hormo- 
n a l ~  impliquen uns resultats estadís- 
ticament diferents, en funció principalment 
de la citoquinina. El menor nombre de 
fulles per microbrot correspon a aquells 
tractaments que donen major taxa de multi- 
plicació, conseqüencia Idgica del poder 
organogenic d'aquest material, lligat o bé a 
un desenvolupament de fulles o bé a un 
increment de la taxa de multiplicació. 
Els microbrots obtinguts arnb els tracta- 
ments que donen majors taxes de multi- 
plicació presenten sempre fulles de color 
verd i tendres, mentre que en aquells que 
s'han desenvolupat en medis que presen- 
ten baixes taxes de multiplicació s'aprecien 
fulles arnb coloracions vermelloses i coria- 
cies. 
Assaig 2 
Les taxes viables rnés baixes s'obtenen 
en els tractaments formulats arnb KIN (pro- 
peres a 1). D'aquests resultats se'n des- 
pren que la KIN no és una citoquinina 
aconsellable per reproduir Ficus elastica. 
Els tractaments arnb 2ip mostren un aug- 
ment de la taxa de multiplicació, respecte al 
primer assaig, i donen unes taxes significa- 
tivament superiors a 1 (Taula 3). Aquests 
resultats concorden arnb els de JOINER 
(1981) qui va obtenir bons resultats arnb 
aquesta hormona per a multiplicar en el 
seu cas Ficus benjamina, així com també 
arnb els assaigs de POUPET et al. (1 983), 
que recomanen altes concentracions de la 
2ip. Les taxes de multiplicació rnés eleva- 
des es donen en general en aquells medis 
arnb nul o baix contingut auxínic (O o 0.5 
mg/l d'AIB) i arnb baixes concentracions de 
BAP (e5 mg/l). D'aquest assaig se'n des- 
pren que la resposta de multiplicació de la 
BAP se satura entorn als 10 mgll. 
Els tractaments que contenen 20 mg/l 
de KIN donen poca formació de cal.lus, 
mentre que els formulats arnb BAP o 2ip 
presenten major formació de cal.lus (Taula 
4). D'acord arnb els estudis de LANE (1 979) 
els majors pesos de cal.lus s'obtenen en 
tractaments am b altes concentracions auxí- 
niques. 
44 Microprooagacid de Ficrn Elastica cv ARXlUS de I'Esc. Sup d'Agricuitura de Bercelona 
TAULA 1 
EFECTE DE LES CONCENTWCIONS AUX~NIQUES 1 C~TOQU~N~N~QUES EN LA TAXA VIABLE 
(ASSBlg 1) 
EFFECT OFAUXIN ANO CrrOKlNlN CONCEKTRAllONS ON USENLO RATE 
f E w  1) 
Nivell de significació 5%. 
Lletres iguals significa que no hi ha diferencies entre tractaments. 
S g n f i n t  leve/: 5%. 
Same letters means no difference between treatments. 
HORMONA 
O 
1 .O0 
a 
1.1 o 
a 
1 .O0 
a 
1 .o0 
a 
1.20 
a 
1.37 
a 
1.15 
a 
4.19 
def 
3.85 
bcd 
4.32 
def 
4.24 
def 
KI N 
2i P 
BAP 
(mg/i) 
1 
5 
1 o 
1 
5 
1 o 
O. 5 
1,5 
2,5 
5 
10 
Al 
O, 5 
1.00 
a 
1.00 
a 
1.02 
a 
1.02 
a 
1.10 
a 
1.38 
a 
1 .O0 
a 
3.23 
b 
3.74 
bcd 
4.82 
f 
3.90 
cde 
B 
1 
1 .O0 
a 
1 .o0 
a 
1 .O0 
a 
1 .o2 
a 
1 .O6 
a 
1.16 
a 
1 .O2 
a 
3.25 
b 
3.49 
bc 
4.60 
ef 
3.26 
b 
1,s 
1 .O0 
a 
1 .o2 
a 
1 .O3 
a 
1.02 
a 
1 .O2 
a 
1.00 
a 
1.02 
a 
4.24 
def 
3.77 
bcd 
4.28 
def 
4.05 
def 
AFXIUS de I'Esc. Sup. d'Agricuttura de Barcelona N Cariameras, M. Arroyo, FX. Fabreges. A Aldnrtw 45 
TAULA 2 
EFECTE DE LES CONCENTRACIONS AUX~NIQUES I CITOQUIN~NIQUES 
EN EL PES SEC DEL CAL-LUS (mg) (Asseig 1) 
EFFECT OFAUXlN ANO CiTOKlNlN CONCENTRATIONS 
ON CALLUS DRY WElGKT (Esay 1) 
Nivell de significació 5%. 
Lletres iguals significa que no hi ha diferencies entre tractaments. 
Signifttant level: 5%. 
Same letters means no difference between treatments. 
HORMONA 
KIN 
2i P 
BAP 
1,5 
35.48 
b-e 
60.1 9 
f-k 
62.06 
f-k 
71.96 
Q-n 
82.1 5 
j-n 
86.1 2 
1-n 
70.00 
Q-m 
87.87 
1-n 
94.00 
n 
81.31 
j-n 
73.37 
h-n 
(msll) 
1 
5 
1 o 
1 
5 
1 o 
O. 5 
1,5 
2,5 
5 
1 o 
B 
1 
28.1 8 
bc 
58.83 
f-j 
41.16 
c-f 
70.90 
Q-n 
86.68 
1-n 
87.28 
1-n 
54.31 
e-h 
83.68 
k-m 
91.68 
mn 
81.43 
i-n 
69.3 1 
g-m 
o 
8.96 
a 
16.56 
ab 
31.34 
b-d 
23.32 
a-c 
62.37 
f-k 
55.31 
e-i 
23.84 
a- c 
49.00 
d-9 
56.00 
e-i 
55.37 
e-¡ 
48.93 
d-g 
Al 
o, 5 
27.1 9 
a- c 
53.15 
e-h 
53.68 
e-h 
60.62 
f-k 
78.59 
i-n 
66.62 
g-1 
23.87 
a- c 
74.25 
h-n 
71.25 
Q-n 
71.33 
Q-n 
56.37 
e-i 
46 Micropropagaci6 de Ficus Elastica cv ARXIUS de I'Esc Sup d'Agricuttura de Barcelona 
TAULA 3 
EFECTE DE LES CONCENTRACIONS AUX~NIQUES I CITOQUIN~NIQUES EN LA TAXA VIABLE 
(Assaig 2) 
EFFECT OF AUXlN AND ClTOKlNlN CONCENTRAllONS ON USEFLJL RATE (Essay 2) 
Nivell de significació 5%. 
Lletres iguals significa que no hi ha diferencies entre tractarnents. 
Sgnificant leve/: 5%. 
Same letters means no difference between treatments. 
HORMONA 
(rngli) O 
1.00 
ab 
3.03 
e-Q 
6.21 
j-k 
5.85 
j-k 
5.89 
jk 
4.08 
g-i 
2.69 
d-f 
KIN 
2i P 
BAP 
20 
20 
1.5 
2.5 
5 
10 
20 
Al B 
O, 5 
0.86 
a 
2.43 
c-e 
5.15 
i-j 
7.06 
k 
6.15 
fi 
4.68 
h-j 
2.12 
c-e 
1 
1 .O7 
ab 
2.28 
c-e 
4.74 
h-j 
3.90 
g-i 
5.17 
i j 
4.09 
g-i 
1.87 
cd 
1,5 
1 .O0 
ab 
1.65 
bc 
3.59 
f-h 
3.87 
g-i 
5.42 
i-k 
4.73 
h-j 
1.59 
bc 
ARXIUS de I'Esc. Sup. d'Agncultura de Bercelona N Cariamera, M Arroyo. F X  Fabregas. A Aldrufeu 47 
TAULA 4 
EFECTE DE LES CONCENTRACIONS AUX~NIQUES ICITOQUIN~NIQUES 
EN EL PES SEC DEL CAL*LUS (mg) W g  2) 
EFFECT OFAUXIN ANO ClTOKlNlN CONCENTRATIONS ON CALLUS DRY WEIGHT (Essay 2) 
Nivel1 de significació 5%. 
Lletres iguals significa que no hi ha diferencies entre tractarnents. 
Significant kvel: 5%. 
Same letters means no difference between treatments. 
HORMONA 
(mgli) 
Al B 
KI N 
2i P 
BAP 
20 
20 
1.5 
2.5 
5 
1 o 
20 
1,5 
51.44 
a 
81.83 
bc 
92.00 
bc 
91 .O0 
bc 
92.69 
bc 
93.09 
bc 
70.37 
b 
O 
41.86 
a 
89.26 
bc 
81.46 
bc 
83.81 
bc 
85.25 
bc 
90.68 
bc 
86.40 
bc 
O, 5 
38.00 
a 
79.12 
bc 
85.81 
bc 
97.31 
C 
91.62 
bc 
81.53 
bc 
84.46 
bc 
1 
52.83 
a 
87.72 
bc 
94.81 
bc 
88.43 
bc 
80.84 
bc 
90.37 
bc 
72.34 
bc 
48 Micropropagació de Ficus Elastica cv ARXIUC de I'Esc. Sup. d'Agncuitura de Barcelona 
En conjunt el nombre de fulles per mi- 
crobrot esta compres entre 4 i 6 fulles per 
a tots els tractaments, tot i que cal destacar 
que el major nombre de fulles es dóna en 
els tractaments amb baixa taxa de multipli- 
cació. En general en aquest assaig totes 
les fulles presentaren un color verd o verd- 
paklid. 
Assaig 3 
Les taxes viables de multiplicació aug- 
menten significativament fins a la sisena 
setmana en tots els tractaments, a excep- 
ció feta del formulat amb 5 mg/l de BAP + 
0.5 mg/l d'AIB, que es continuen incremen- 
tant fins a la setena setmana. En valors 
absoluts s'observa que en els tractaments 
que contenien 2.5 mgll de BAP amb o sen- 
se auxina, I'augment de la taxa viable es 
produeix fins a la witena setmana. Cal 
destacar que el medi de cultiu que genera 
majors taxes en el termini més curt de 
temps (6 setmanes) 6s el formulat amb 1.5 
mg/l de BAP sense auxina (Taula 5). 
El pes sec de la fracció caklus obtin- 
guda és similar entre els tractaments estu- 
diats (Taula 6). En general en valors abso- 
luts s'observa que el pes sec del cal.lus 
augmenta al llarg del subcultiu. 
TAULA 5 
EFECTE DE LES CONCENTRACIONS AUX~NIQUES I CITOQUIN~NIQUES 
EN LA TAXA VlABLE SEGONS LA DURADA DEL SUBCULTIU (Assaig 3) 
EFFECT OFAUXIN AND CITOKININ CONCENTRATlONS ON USEFUL RATEACCORDING TO THE 
WRATiON OF SUBCULTURE (Essay 3) 
Nivell de significació 5%. 
Lletres iguals significa que no hi ha diferencies entre tractarnents. 
Signfcant leve/: 5%. 
Same leiters means no difference behveen treatments. 
BAP mg/l 
AIB rngtl 
setmana 
5 
setmana 
6 
setmana 
7 
setrnana 
8 
2.5 
O. 5 
3.28 
a- c 
6.34 
d-f 
6.76 
d-f 
8.45 
f 
1.5 
O 
3.64 
a-c 
8.08 
f 
8.55 
f 
8.16 
f 
5 
O 
2.68 
ab 
5.75 
d-f 
4.84 
c-e 
6.04 
d-f 
2.5 
O 
4.35 
a-d 
5.95 
d-f 
6.99 
e-f 
8.22 
f 
5 
O. 5 
2.54 
a 
3.45 
a- c 
5.94 
d-f 
4.51 
b-e 
ARXIUS de I'Esc Sup d'Agricuiiura de Barcelona. N Canamera%. M Arroyo. F.X Fabrega%. A Aldrufeu 49 
TAULA 6 
EFECTE DE LES CONCENTRACIONS AUX~NIQUES I CITOQUIN~NIQUES 
EN EL PES DEL CAL-LUS SEGONS LA DURADA DEL SUBCULTIU ( W ' g  3) 
EFFECT OFAUXIN AND ClTOKlNlN CONCENTRATIONS ON CALLUS DRY WElGM 
ACCORDING TO SUBCULTURE DURATION (Essay 3) 
Nivell de significació 5%. 
Lletres iguals significa que no hi ha diferencies entre tractarnents. 
Significant kvel: 5%. 
Same letters means no difference between treatments. 
CONCLUSIONS 
5 
O. 5 
40.15 
a- c 
43.45 
a-c 
92.1 5 
d 
99.40 
d 
Els millors tractaments per a multiplicar sense auxina i 2.5 o 5 mg/l de BAP AMB 
Ficus elastica cv. Robusta (alta taxa de 0.5 mg/l de AIB o sense auxina i la durada 
multiplicació + poca formació de cal.lus) del subcultiu ha de ser de 6 setmanes. 
són aquells que contenen 1.5 mg/l de BAP 
5 
O 
29.89 
ab 
38.00 
a- c 
53.65 
a- c 
64.60 
bc 
BAP rngll 
AIB mgll 
setmana 
5 
setmana 
6 
setmana 
7 
setrnana 
8 
BATLLE, A.; MELE, E. (1 984). Micropropaga- FARTHING, J.G. (1 988). Propagation techni- 
ción ccin vitro,, de Ficus elastica. Comu- ques for Ficus robusta. Acta Horticul- 
nicaciones de la III reunión de ornamen- turae. Propagation of ornamentals, 226: 
tales. Jornadas Técnicas. S.E.C.H.: 489-498. 
140-1 46. 
1.5 
O 
21.42 
a 
35.1 O 
ab 
46.30 
a-b 
61.83 
bc 
2.5 
O 
20.30 
a 
34.80 
ab 
51.15 
a- c 
58.00 
a- c 
2.5 
O. 5 
32.1 5 
ab 
55.1 O 
a-c 
46.40 
a- c 
74.63 
cd 
50 hrcropropagació de Ficus Elastica cv 
HUSSEY, G. (1 980). Reviewed general prin- 
ciples and cunent progress of tissue 
culture to plant propagation. Micropro- 
pagation. Part 1. The garden. Vol. 106, 
parts 7 & 8: 286-325. 
JOINER, J.N. (1 981). Foliage plant produc- 
tion. Ed. Prentice-Hall. 
JONA, R.; GRIBAUDO, 1. (1 987). Adventitious 
bud formation from leaf explants of 
Ficus lyrata ~Gin v i t r o~~  culture. Hort- 
Science, 22 (4): 651 -653. 
ARXIUS de I'Esc Sup d'Agncuttura de Barcelona 
LANE, W.D. (1 979). The influence of growth 
regulators on root and shoot initiation 
from flax meristem tips and hypocotyls 
g~in vi t ro~~. Physiol. Plant., 45: 250-264. 
POUPET, A; JACQUEMONT, R.; BECK, D.; 
BETTACHINI, B.; ONESTO, J.P.; POUPET, 
R. (1 983). Reflexions sur les problemes 
posés pour la multiplication g q i n  v i t r o~~  de 
quelques végétaux d'ornement. P.H.M. 
Revue Horticole, 229: 35-43. 


Micropropagació de Ficus Elàstica cv. Robusta: efecte de les concentracions hormonals en els medis de multiplicació

Abstract

Similar works

Full text

Available Versions

Revistes Catalanes amb Accés Obert