Перепечай, Я. И.

Siberian Federal University Digital Repository

УДК 577.1:615.03  КОРРЕКЦИЯ ПРОАНТИОКСИДАНТНОГО СТАТУСА БОЛЬНЫХ МЕХАНИЧЕСКОЙ ЖЕЛТУХОЙ ПРЕПАРАТОМ ЦИТОФЛАВИН Перепечай Я.И., научные руководители  канд. биол. наук, проф. Титова Н.М., д-р мед. наук, проф. Черданцев Д.В. Сибирский федеральный университет Красноярский государственный медицинский университет им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого  В организме человека  в норме постоянно образуются свободные радикалы кислорода, однако чрезмерная активация свободнорадикальных процессов может привести к модификации органических молекул, деградации клеточных структур и нарушению функциональной активности клеток. Негативное влияние свободных радикалов уравновешивается работой антиоксидантной системы, которая представлена ферментативным и неферментативным звеном  (глутатион, токоферолы, аскорбиновая кислота, убихинон и др.). К антиоксидантным ферментам относят супероксиддисмутазу (СОД) (КФ 1.15.1.1), катализирующую дисмутацию супероксида в кислород и пероксид водорода, каталазу (КФ 1.11.1.6), разлагающею перекиси на воду и молекулярный кислород, глутатионпероксидазу (GPO) (КФ 1.11.1.9), катализирующую восстановление пероксида водорода до воды, глутатионредуктазу (КФ 1.8.1.7),  восстанавливающую глутатион путем окисления НАДФН,  глутатион-S-трансферазу (GST), участвующую в детоксикации различных ксенобиотиков. В результате происходит непрерывная регенерация антиоксидантов, необходимая для постоянного поддержания гомеостаза. В случае нарушения гомеостаза организм начинает страдать от окислительного стресса. Одним  из основных субстратов свободнорадикальных реакций являются липиды. В результате окисления жирных кислот образуются гидроперекиси, которые затем метаболизируются во вторичные – малоновый диальдегид (МДА) и третичные продукты перекисного окисления липидов (ПОЛ) – шиффовы основания. Малоновый диальдегид служит маркером перекисного окисления липидов и оксидативного стресса.  Повышение уровня ПОЛ является, с одной стороны, отражением степени метаболических расстройств, а с другой, накопление липоперекисей вызывает ряд серьезных вторичных патологических процессов. Увеличение концентрации активных форм кислорода (АФК) в организме человека характерно для многих заболеваний, в том числе для механической желтухи. Механическая желтуха – это патологическое состояние, синдромокомплекс, характеризующийся затруднением или полным прекращением поступления желчи из печени по магистральным желчным протокам в двенадцатиперстную кишку. Механическая желтуха относится к наиболее серьезным осложнениям заболеваний билиарной системы. Токсическое действие высоких концентраций билирубина в крови при механической желтухе проявляется поражением центральной нервной системы, возникновением очагов некроза в паренхиматозных органах, подавлением клеточного иммунного ответа.  Конечными этапами патологического процесса в печеночной паренхиме является запуск гипоксического или свободнорадикального некробиоза последующей клеточной гибелью. Тканевая гипоксия приводит к нарушению функций митохондрий, истощению запасов АТФ, активации свободнорадикальных процессов. Актуальной проблемой современной медицины является поиск лекарственных средств для борьбы с патологиями, вызванными окислительными повреждениями клеток и тканей. В настоящее время широко изучаются и используются многокомпонентные препараты с антигипоксическим  и антиоксидантным действием, к которым относится и Цитофлавин. Он стимулирует дыхание и энергообразование в клетках, улучшает процессы утилизации кислорода тканями, восстанавливает активность ферментов антиоксидантной защиты, активирует внутриклеточный синтез белка.  Материалы и методы.   Объектом исследования служила плазма крови  относительно здоровых  (контрольная группа) и больных механической желтухой людей. Для определения содержания МДА,  и активности антиоксидантных ферментов, были отобраны следующие группы людей: условно здоровые (15 человек), больные, получавшие традиционное лечение (16 человек), больные, получавшие традиционное лечение совместно с препаратом  Цитофлавин (16 человек).  Пациентам, больным механической желтухой, проводилась операция по удалению желчного пузыря (открытая холецистэктомия, лапароскопическая холецистэктомия). По типу операции больные равномерно распределены в группы с традиционным лечением и традиционным лечением с применением Цитофлавина. Группы были сравнимы по возрастному, половому признакам, тяжести состояния пациентов и форме заболевания. Цитофлавин назначался с первого дня после разрешения холестаза по схеме: 10мл на 200 мл физиологического раствора внутривенно капельно 2 раза в сутки. Содержание продукта перекисного окисления липидов – малонового диальдегида определяли по взаимодействию МДА с 2-тиобарбитуровой кислотой, (Ko, Godin, 1990). Активность глутатион-S-трансферазы определяли по скорости образования глутатион-S-конъюгатов между GSH и 1-хлор-2,4-динитробензолом (ХДНБ) согласно Habig (1974). Активность супероксиддисмутазы оценивали по степени ингибирования реакции аутоокисления адреналина в щелочной среде (Сирота,1999). Каталазную  активность определяли  по количеству образовавшегося комплекса неразрушенного в ходе каталазной реакции пероксида водорода с молибдатом аммония (Королюк и др., 1988). Обработку результатов проводили с помощью подсчета медианы и интерквартильного разброса (С25 и С75 процентели). Проверку гипотезы о статистической достоверности двух выборок проводили с помощью непараметрического критерия Манна-Уитни для независимых выборок с достоверностью p<0,05.  Результаты исследования и их обсуждение.  Было проведено сравнительное исследование показателей процесса ПОЛ и активности антиоксидантных ферментов у больных механической желтухой при стандартном лечении и лечении с Цитофлавином. Определение содержания МДА, активности СОД, каталазы, GST было проведено в плазме до начала лечения, через 3 дня и через 7 дней приема препаратов. Результаты представлены в таблицах 1 и 2.   Таблица 1- Содержание МДА и активность антиоксидантных ферментов при традиционном лечении без Цитофлавина.  Примечание: р – достоверность отличий по сравнению с контролем  Таблица 2- Содержание МДА и активность антиоксидантных ферментов при традиционном лечении с применением Цитофлавина. Примечание: р – достоверность отличий по сравнению с контролем  Уровень малонового диальдегида в плазме крови больных повышен на 46% по сравнению с контрольной группой. Содержание МДА через 7 дней после лечения с Цитофлавином достоверно понижается в 1,45 раза, приближаясь к уровню практически здоровых людей. Снижение содержания МДА без Цитофлавина менее значительное, всего лишь на 6,3%. Активность СОД в динамике лечения достоверных отличий от контрольной группы не имела. У больных механической желтухой каталазная активность снижена в 1,6 раз по сравнению с контрольной группой. В динамике лечения активность каталазы достоверно увеличивалась при каждом из методов лечения, стремясь к величинам Показатели Контроль 1 сутки 3 сутки 7 сутки МДА (нмоль/л) 2,44 1,79-2,72 3,59 2,44-4,62 р<0,005 3,27 2,37-5,19 р<0,01 3,36 1,6-4,9 р=0,15 СОД (ед/мин*л) 1375,52 1325,37-1482,98 1275,22 1225,07-1475,82 р=0,67 1260,9 1214,33-1328,96 р=0,21 1177,61 1196,42-1497,31 р=0,36 КАТ (мкмоль*мин/л) 306,15 264,12-340,05 223,45 172,83-312,93 р<0,05 244,91 127,97-407,5 р =0,40 234,74 110,91-448,06 р =0,56 GSТ (моль*мин/л) 25 21,87-29,67 34,37 23,43-57,81 р<0,001 40,63 28,13-56,25 р<0,001 46,87 28,13-53,13 р<0,001 Показатели Контроль 1 сутки 3 сутки 7 сутки МДА (нмоль/л) 2,44 1,79-2,72 3,52 2,82-4,6 р<0,005 3,33 3,06-4,05 р<0,001 2,44 1,99-3,78 р=0,27 СОД (ед/мин*л) 1375,52 1325,37-1482,98 1361,19 1174,93-1447,16 р=0,184 1411,34 1174,51-1465,07 р=0,23 1289,55 1250,15-1572,54 р=0,82 КАТ (мкмоль*мин/л) 306,15 264,12-340,05 150,23 127,18-217,8 р<0,001 265,03 234,74-335,42 р=0,41 287,170 142,99-333,72 р=0,73 GSТ (моль*мин/л) 25 2187-29,67  34,37 28,12-43,75 р<0,01 34,37 31,25-42,19 р<0,001 31,25 28,12-37,5 р=0,16 контрольной группы. При лечении с Цитофлавином активность каталазы составила 93,8% от контрольных показателей, а при лечении без Цитофлавина76,7%. Активность GST в плазме больных механической желтухой до операции  достоверно увеличена на 40%. При традиционном лечении активность GST  продолжала увеличиваться и к 7 суткам  превышала контрольные показатели в 1,87 раз, а при лечении с Цитофлавином снижалась на 12% от первоначальных показателей активности, тем самым приближаясь к активности здоровых людей .  Выводы. У больных механической желтухой усиливаются процессы перекисного окисления липидов. Это подтверждается повышенным уровнем малонового диальдегида в плазме крови больных на 46% по сравнению с контрольной группой.  Содержание МДА и активность антиоксидантных ферментов в плазме крови больных при лечении с применением Цитофлавина  не имела достоверных отличий от контрольных значений, то есть наблюдалась тенденция к нормализации показателей. У больных получавших традиционное лечение без Цитофлавина также наблюдалось улучшение некоторых показателей (МДА, СОД, каталаза), но менее значительное, чем в группе с  применением Цитофлавина.   Применение препарата Цитофлавин с  целью коррекции установленных нарушений способствует подавлению процессов липопероксидации, и активизирует систему анитиоксидантной защиты, что нормализует проантиоксидантный статус больных механической желтухой. Эффективность Цитофлавина обусловлена взаимодополняющим действием янтарной кислоты, рибоксина, рибофлавина и никотинамида.    

КОРРЕКЦИЯ ПРОАНТИОКСИДАНТНОГО СТАТУСА БОЛЬНЫХ МЕХАНИЧЕСКОЙ ЖЕЛТУХОЙ ПРЕПАРАТОМ ЦИТОФЛАВИН

Abstract

Similar works

Full text

Available Versions

Siberian Federal University Digital Repository