Samples from the ocular conjunctiva of 23 patients with AIDS, 24 patients infected with human immunodeficiency virus (HIV) and 48 immunocompetent individuals were taken during the months of February, April, July and October. During the year an increase in fungi of the conjunctiva of the AIDS patients, followed by patients infected with HIV and a smaller percentage in healtly people was observed. The most frequently isolated fungus was Penicillium sp followed by Aspergillus sp, Candida sp and Rhodotorula sp.Foi pesquisada a presença de fungos na conjuntiva ocular de 23 pacientes com AIDS, 24 pacientes infectados pelo HIV, ambos de controle ambulatorial e 48 indivíduos HIV negativos, durante um ano, nos meses de fevereiro, abril, julho e outubro. O fungo mais isolado foi Penicillium sp, seguido de Aspergillus sp, Candida sp e Rhodotorula sp. Embora sem diferença significante, em todas as coletas foi verificado um crescimento maior de fungos na conjuntiva dos portadores de AIDS, seguido pelo grupo infectado pelo HIV e em menor número nos indivíduos HIV-negativos.FHDFUNIFESP Depto. de Oftalmologia Setor de ÚveaUNIFESP OftalmologiaUNIFESP Depto. de Microbiologia, Imunologia e Parasitologia Setor de MicologiaUNIFESP Depto. de OftalmologiaUNIFESP, Depto. de Oftalmologia Setor de ÚveaUNIFESP, OftalmologiaUNIFESP, Depto. de Microbiologia, Imunologia e Parasitologia Setor de MicologiaUNIFESP, Depto. de OftalmologiaSciEL

Belfort, Rubens Junior

Fischman, Olga

Martins, Suy Anne Rebouças

Muccioli, Cristina

Santos, Procópio Miguel dos

Santos, Regina Cândido Ribeiro dos

Arquivos Brasileiros de Oftalmologia

Muccioli, Cristina [UNIFESP]

Martins, Suy Anne Rebouças [UNIFESP]

Fischman, Olga [UNIFESP]

Belfort, Rubens Junior [UNIFESP]

Repositório Institucional UNIFESP

ARQ. BRAS. OFTAL. 62(6), DEZEMBRO/1999 - 731Microbiota fúngica conjuntival: estudo comparativo en-tre pacientes com AIDS, pacientes infectados pelo HIV epacientes HIV-negativos antes da era do HAARTFoi pesquisada a presença de fungos na conjuntiva ocular de 23pacientes com AIDS, 24 pacientes infectados pelo HIV, ambos decontrole ambulatorial e 48 indivíduos HIV negativos, durante um ano,nos meses de fevereiro, abril, julho e outubro. O fungo mais isolado foiPenicillium sp, seguido de Aspergillus sp, Candida sp e Rhodotorula sp.Embora sem diferença significante, em todas as coletas foi verificadoum crescimento maior de fungos na conjuntiva dos portadores de AIDS,seguido pelo grupo infectado pelo HIV e em menor número nos indiví-duos HIV-negativos.Fungal microbiota: comparative study between patients with acquired immuno-deficiency syndrome, patients infected with human immunodeficiency virus andimmunocompetent individuals before the HAART eraTrabalho realizado no Setor de Micologia, Disciplinade Biologia Celular, Depto. de Microbiologia,Imunologia e Parasitologia e Setor de Patologia Ex-terna e Úvea do Depto. de Oftalmologia, Universida-de Federal de São Paulo (UNIFESP).(1) Mestre e Doutor pela UNIFESP e Assistente Superiorda FHDF.(2) Mestre e Doutora pela UNIFESP e Chefe do Setor deÚvea do Depto. de Oftalmologia da UNIFESP.(3) Residente de Oftalmologia da UNIFESP e ex-resi-dente do Hospital de Base de Brasília.(4) Profª. Adjunta do Setor de Micologia, Disciplina deBiologia Celular, Depto. de Microbiologia, Imunologiae Parasitologia, UNIFESP.(5) Prof. Titular do Depto. de Oftalmologia, UNIFESP.Endereço para correspondência: Dr. ProcópioMiguel dos Santos - HIGS Qd. 704 Bl. “B” C-28 -Brasília (DF) CEP 70331-753.Procópio Miguel dos Santos (1)Cristina Muccioli (2)Regina Cândido Ribeiro dos Santos (1)Suy Anne Rebouças Martins (3)Olga Fischman (4)Rubens Belfort Jr.  (5)RESUMOPalavras-chave: Flora fúngica; Conjuntiva; AIDS; HIV.INTRODUÇÃOA presença de fungos na conjuntiva, mesmo os saprófitas, representaconstante ameaça para os olhos, porque esses microrganismos, definidoscomo oportunistas, podem provocar infecções oculares severas, em situa-ções como: baixa de resistência orgânica, uso prolongado de medicaçõesimunossupressoras ou antibióticos e trauma ocular entre outros 1.É estimado que três em quatro pacientes portadores da Síndrome da Imu-nodeficiência Adquirida (AIDS) desenvolverá uma ou mais anormalidadesoculares no curso da doença. Teoricamente todo fungo, especialmente os deregiões geográficas endêmicas, podem causar infecções oportunistas em pacien-tes com AIDS 2.Infecções fúngicas e por microbactérias estão entre as mais comunsinfecções oportunistas que ocorrem nos pacientes adultos infectados com ovírus da imunodeficiência humana 3, principalmente antes do uso de trata-mentos com combinações de drogas que podem proporcionar uma melhoraconsiderável da função imune dos referidos pacientes 4Em virtude do pequeno número de trabalhos sobre a flora fúngica con-juntival, em pacientes com AIDS e infectados pelo HIV de controle ambulatorial,foi projetada a presente pesquisa com propósito de comparar a flora micóticadestes pacientes com a de indivíduos HIV negativos ao longo de um ano.PACIENTES, MATERIAL E MÉTODOSAmostras de material do fórnice conjuntival inferior de 47 pacientes HIV732 - ARQ. BRAS. OFTAL. 62(6), DEZEMBRO/1999Microbiota fúngica conjuntival: estudo comparativo entre pacientes com AIDS, pacientes infectados peloHIV e pacientes HIV-negativos antes da era do HAARTpositivos com e sem AIDS e 48 indivíduos HIV negativos, foramcoletadas durante um ano, nos meses de fevereiro, abril, julho eoutubro, no Laboratório de Microbiologia Ocular do Departa-mento de Oftalmologia da UNIFESP e processadas no Setor deMicologia da UNIFESP. O grupo I (GI) era constituído por 23pacientes portadores de AIDS de controle ambulatorial, 20 dosexo masculino e 3 do sexo feminino, entre 20 a 55 anos (médiade 37 anos e 5 meses). O grupo II (G II) foi formado por 24pacientes infectados pelo HIV, também de controle ambulatorial,14 do sexo masculino e 10 do sexo feminino, entre 26 e 47 anos(média de 36 anos e 5 meses). O grupo controle (G III) foicomposto por 48 indivíduos HIV negativos, sendo 25 doadoresvoluntários do Banco de Sangue do Hospital São Paulo e 23funcionários da UNIFESP, confirmados HIV negativos. Suasidades variaram entre 17 e 54 anos (média de 35 anos e 5 meses).Foi coletado material da conjuntiva ocular de todos os en-volvidos no estudo utilizando zaragatoas estéreis e o material foisemeado, de acordo com técnicas rotineiras para obtenção decolônias, em placas de Petri contendo ágar-Sabouraud-dextrosecom gentamicina. As placas foram mantidas em temperaturaambiente, com observação diária quanto à presença ou não decrescimento de colônias, durante 30 dias, a partir da semeadura.A identificação dos fungos foi feita através de suas caracterís-ticas macro e microscópicas e quando necessário, foram utilizadasprovas fisiológicas. Para análise dos resultados foram aplicados ostestes de análise de variância por postos de Friedman 4 e análise devariância por postos de Kruskal-Wallis5.RESULTADOSA tabela 1 mostra a freqüência dos fungos isolados, nosdiferentes meses do estudo, nos três grupos. A média dosfungos isolados da conjuntiva, nos diferentes meses do ano éapresentada na tabela 2. Embora sem  diferença estatística, amédia de fungos isolados foi maior nos pacientes com AIDS,seguidos pelos infectados pelo HIV e menor nos indivíduosHIV negativos, em todos os meses estudados.Penicillium sp foi o gênero mais isolado, em todos osgrupos. Candida sp foi isolada em todos os meses pesquisa-dos, nos portadores de AIDS; também foi o fungo levedurifor-me mais isolado, nos diferentes meses do ano.DISCUSSÃOEmbora sem diferença significante, a média de fungosisolados na conjuntiva dos pacientes portadores de AIDS foimaior, seguido pelo grupo HIV soro-positivos. Estes achadossugerem que, em pacientes acometidos pela imunodepressão,existe maior predisposição para o crescimento de fungos naconjuntiva ocular. Segundo Warnock 6 as profundas altera-ções da função imunológica dos indivíduos portadores deAIDS e infectados pelo HIV favorecem a infecção fúngica.No presente estudo, a média de fungos isolados nos porta-dores de AIDS e HIV soro-positivos assintomáticos de con-trole ambulatorial não foi significantemente maior do que nosindivíduos imunocompetentes, tais achados concordam com oestudo realizado por CHA e col. (1990)7 em pacientes comAIDS, internados para tratamento de infecção sistêmica e/ouneoplásicas. Assim pode-se concluir que, não existe diferençana microbiota fúngica do paciente imunodeprimido internadoe o de controle ambulatorial .O gênero Penicillium sp foi o fungo mais isolado duranteas quatros coletas do ano, nos três grupos de indivíduosTabela 1 - Freqüência de fungos Leveduriformes e filamentosos isolados na conjuntiva de pacientes com a Síndrome da ImunodeficiênciaAdquirida (GI), pacientes infectados pelo HIV (GII) e indivíduos HIV negativos antes da era do HAART, de acordo com o mês da coleta domaterial, na cidade de São Paulo.Fevereiro Abril Julho OutubroGI GII GIII GI GII GIII GI GII GIII GI GII GIII TotalMicrorganismo N% N% N% N% N% N% N% N% N% N% N% N%C. albicans 1(4,3) 1(4,2) 0(0,0) 0(0,0) 1(4,1) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 1(4,3) 1(4,2) 1(2,8) 6C. guilliermondii 1(4,3) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 1(4,1) 1(2,8) 0(0,0) 0(0,0) 1(2,8) 1(4,3) 0(0,0) 0(0,0) 4C. parapsilosis 0(0,0) 1(4,2) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 1(2,8) 0(0,0) 0(0,0) 1(2,8) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 3C. tropicalis 2(8,7) 0(0,0) 1(2,8) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 1Geotrichum sp 1(4,3) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 1Rhodotorula sp 0(0,0) 0(0,0) 1(2,8) 0(0,0) 1(4,1) 1(2,8) 1(4,3) 0(0,0) 1(2,8) 0(0,0) 0(0,0) 2(4,2) 7Fungos FilamentososAcremomium sp 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 1(4,1) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 1(4,3) 0(0,0) 0(0,0) 2Alternaria sp 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 1(4,3) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 1Aspergillus sp 2(8,7) 1(4,2) 3(6,2) 4(17,4) 1(4,1) 1(2,8) 3(13,0) 1(4,2) 1(2,8) 1(4,3) 2(8,7) 1(2,8) 18Cladosporium sp 0(0,0) 0(0,0) 1(2,8) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 1(4,2) 1(2,8) 1(4,3) 0(0,0) 1(2,8) 5Fusarium spp 0(0,0) 1(4,2) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 1(2,8) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 1(4,2) 0(0,0) 3Paecilomyces sp 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 2(8,7) 1(4,1) 0(0,0) 0(0,0) 1(4,2) 0(0,0) 1(4,3) 0(0,0) 0(0,0) 5Penicillium sp 2(8,7) 3(12,5) 5(10,4) 5(21,7) 1(4,1) 5(10,4) 3(13,0) 2(8,3) 3(6,2) 3(13,0) 2(8,3) 2(4,2) 36Phialophora sp 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 1(4,3) 0(0,0) 1(2,8) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 2Fungos Filamentosos 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 1(4,3) 0(0,0) 1(2,8) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 0(0,0) 1(4,2) 0(0,0) 4não esporulado* O percentual foi tomado em relação ao número total dos pacientes em cada grupoARQ. BRAS. OFTAL. 62(6), DEZEMBRO/1999 - 733Microbiota fúngica conjuntival: estudo comparativo entre pacientes com AIDS, pacientes infectados peloHIV e pacientes HIV-negativos antes da era do HAARTestudados, na presente investigação. Estes resultados concor-dam com SCARPI e col.(1985) 8 que encontraram maior pre-valência de Penicillium sp na conjuntiva de indivíduos sadiosda região canavieira do estado de São Paulo. CHA e col.(1990) 7 também isolaram Penicillium sp mais freqüentemen-te, na conjuntiva de portadores de AIDS hospitalizados nacidade de São Paulo.Santos e col. (1997) 9 fazendo um estudo da variaçãosazonal da microbiota fúngica da conjuntiva de pacientesinfectados pelo HIV e com AIDS, isolaram mais Penicilliumsp durante o outono. Na presente pesquisa, o mesmo pacientecom AIDS e o infectado pelo HIV e indivíduo HIV negativofoi submetido a quatro diferentes coletas para pesquisa defungos, o que não ocorreu com os trabalhos dos autorescitados anteriormente. Mesmo assim, pode-se sugerir que ofungo Penicillium sp tem certa predileção para desenvolversaproficamente na conjuntiva ocular tanto de imunodeprimi-do como de imonocompetente.No meio ambiente, Penicillium sp foi o segundo fungomais isolado por SCARPI e col. (1985) 8, indicando que omeio ambiente pode contaminar a conjuntiva transitoriamen-te. Assim, a grande freqüência de isolamento do referidofungo, na presente investigação, pode ter ocorrido devido àcontaminação ambiental 10.Não houve isolamento de um mesmo fungo por mais de duasvezes seguidas no mesmo paciente, supondo flora fúngica tran-sitória, já observada por outros pesquisadores em estudos ante-riores 11. A presença destes fungos na conjuntiva, mesmo sa-prófitas, representa uma ameaça constante para os olhos dessesindivíduos imunodeprimidos, porque a baixa de imunidadepropicia a agressão por esses fungos oportunistas 12. Também,certas espécies de Candida, são os agentes de infecção oportu-nista mais comuns em portadores de AIDS, podendo ocorrer emtorno de 80 a 90% 13.Neste estudo, o segundo fungo mais freqüentemente isoladofoi Aspergillus sp, em terceiro lugar, Candida sp, e em quartolugar Rhodotorula sp. Em uma pesquisa realizada por COSTAe col.(1975) 14, Rhodotorula sp, foi o gênero de fungo maisisolado pelos referidos pesquisadores, em conjuntiva de indiví-duos normais. De acordo com Williamson e col. (1968) 15espécies destes fungos parecem ser habitantes comuns da parteexterna de olhos sadios. Por outro lado, outros autores 16 rela-tam que, Candida sp, Aspergillus sp e Fusarium sp são osprincipais agentes etiológicos de úlcera corneana.Nesta investigação, Cephalosporium sp e Paecilomyces sp,apareceram em quinto lugar. Segundo Azevedo (1962) 17, Cepha-losporium sp é um fungo anemófilo importante na cidade de SãoPaulo em ambientes hospitalares. Jones (1981) 18 admitiu que oPaecilomyces sp é um fungo que pode causar endoftalmites.Para os pacientes imunodeprimidos, uma colonizaçãomaior de fungos na conjuntiva associada a outros fatoreslocais como olho seco, representa uma ameaça constante aoaparecimento de infecção fúngica conjuntival e corneana.Estudos futuros poderão elucidar melhor a relação entre oaumento da população fúngica conjuntival e o aparecimentode infecção fúngica ocular externa.SUMMARYSamples from the ocular conjunctiva of 23 patients withAIDS, 24  patients infected  with human immunodeficiencyvirus (HIV) and 48 immunocompetent individuals were takenduring the months of February, April, July and October.During the year an increase in fungi of the conjunctiva of theAIDS patients, followed by patients infected with HIV and aTabela 2- Média de fungos isolados da conjuntiva de pacientes com Síndrome da Imunodeficiência Adquirida (AIDS) (G I), pacientesinfectados com HIV (HIV+) (G II) Indivíduos HIV- (G III) nas quatro coletas realizadas, na cidade de São Paulo.Fevereiro Abril Julho OutubroMédiaAIDS 0,39 0,52 0,39 0,39HIV + 0,29 0,29 0,21 0,29HIV 0,23 0,23 0,19 0,15Análise de Variância por postos de Friedman(T1 X T2  X T3 X T4 )G I G II G IIIX2calc.=0,46(p>0,05) X2calc.=0,16(p>0,05) X2calc.=0,50(p>0,05)Análise de Variância por postos de Kruskal-WallisG I x G II x G III             T1 T2 T3 T4Hcalc.=0,92(p>0,05) Hcalc.=2,40(p>0,05) Hcalc.=1,01(p>0,05) Hcalc.=2,09(p>0,05734 - ARQ. BRAS. OFTAL. 62(6), DEZEMBRO/1999Microbiota fúngica conjuntival: estudo comparativo entre pacientes com AIDS, pacientes infectados peloHIV e pacientes HIV-negativos antes da era do HAARTsmaller percentage in healtly people was observed. The mostfrequently isolated fungus was Penicillium sp followed byAspergillus sp, Candida sp and Rhodotorula sp.Keywords: Fungical flora; Conjunctiva; AIDS; HIV.REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS1. O’Day DM, Burd EM, Fungal keratitis and conjunctivitis. In: Smolin G, ThoftRA. The cornea.3.ed. Boston; New York: Little, Brown, 1994.p.229-52.2. Mines JA, Kaplan HJ. AIDS: The disease and its ocular manifestations. Int.Ophthalmol Cli 1986;26(2):73-115.3. Spencer PM, Jackson GG. Fungal and mycobacterial infections in patientsinfected with the human immunodeficiency virus. J Antimicrob Chemo 1989;23(A):107-125.4. Horn GVD, Meenken C, Danner AS, Reiss P, Smet MD. Effects of proteaseinhibitors on the course of CMV retinitis to CD4+ lymphocyte responses inHIV+ patients. 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