O enrolamento da folha da videira ("grapevine leafroll") é uma doença atribuída a pelo menos nove vírus sorologicamente distintos, Grapevine leafroll-associated viruses 1 a 9 e designados GLRaV-1 a GLRaV-9. No Brasil, já é conhecida a existência do GLRaV-1, GLRaV-2, GLRaV-3 e GLRaV-6. Neste trabalho, foi demonstrada a ocorrência do GLRaV-5 em amostras de videiras cultivadas no Estado de São Paulo, mediante teste de Biotina-ELISA. O vírus foi detectado com baixa incidência nas cultivares avaliadas, exceto na 'Cardinal', que apresentou 100% de infecção. Este é o primeiro relato da ocorrência do GLRaV-5 no Brasil.Grapevine leafroll is a complex disease that can be caused by any one of the nine serologically distinct closteroviruses, referred to as Grapevine leafroll-associated viruses 1 to 9 (GLRaV-1 to GLRaV-9). So far, it has been known the occurrence of GLRaV-1, GLRaV-2, GLRaV-3 and GLRaV-6 in Brazil. This work reports the identification of GLRaV-5 in leafroll-infected grape material from the State of São Paulo, by Biotine-ELISA. The virus was detected with low incidence in tested grape cultivars, except in 'Cardinal', which showed 100% infected. This is the first report of GLRaV-5 in Brazil

GASPAR, José Osmar

KUNIYUKI, Hugo

REZENDE, Jorge Albeto Marques

YUKI, Valdir Atsushi

O enrolamento da folha da videira (grapevine leafroll) é uma doença atribuída a pelo menos nove vírus sorologicamente distintos, Grapevine leafroll-associated viruses 1 a 9 e designados GLRaV-1 a GLRaV-9. No Brasil, já é conhecida a existência do GLRaV-1, GLRaV-2, GLRaV-3 e GLRaV-6. Neste trabalho, foi demonstrada a ocorrência do GLRaV-5 em amostras de videiras cultivadas no Estado de São Paulo, mediante teste de Biotina-ELISA. O vírus foi detectado com baixa incidência nas cultivares avaliadas, exceto na 'Cardinal', que apresentou 100% de infecção. Este é o primeiro relato da ocorrência do GLRaV-5 no Brasil.Grapevine leafroll is a complex disease that can be caused by any one of the nine serologically distinct closteroviruses, referred to as Grapevine leafroll-associated viruses 1 to 9 (GLRaV-1 to GLRaV-9). So far, it has been known the occurrence of GLRaV-1, GLRaV-2, GLRaV-3 and GLRaV-6 in Brazil. This work reports the identification of GLRaV-5 in leafroll-infected grape material from the State of São Paulo, by Biotine-ELISA. The virus was detected with low incidence in tested grape cultivars, except in 'Cardinal', which showed 100% infected. This is the first report of GLRaV-5 in Brazil

Kuniyuki, Hugo

Rezende, Jorge Albeto Marques

Gaspar, José Osmar

Yuki, Valdir Atsushi

LAReferencia - Red Federada de Repositorios Institucionales de Publicaciones Científicas Latinoamericanas

Summa Phytopathologica

Detecção do Grapevine leafroll-associated virus 5 no Estado de São Paulo

Universidade de São Paulo

Detection of Grapevine leafroll-associated virus 5 in the State of Sao Paulo, Brazil

Biblioteca Digital da Produção Intelectual da Universidade de São Paulo (BDPI/USP)

366 Summa Phytopathol., Botucatu, v. 34, n. 4, p. 366-367, 2008
Detecção do Grapevine leafroll-associated virus 5 no Estado de São Paulo
Hugo Kuniyuki1**, Jorge Albeto Marques Rezende2**, José Osmar Gaspar3**, Valdir AtsushiYuki1
1Centro de Pesquisa e Desenvolvimento de Fitossanidade, Instituto Agronômico / APTA, CP 28, CEP 13012-970 - Campinas, SP. 2Departamento
de Entomologia, Fitopatologia e Zoologia Agrícola, ESALQ, USP, CP 9, CEP 13418-900 - Piracicaba, SP.  3 Departamento de Botânica,
IBILCE, UNESP, CEP 15054-000 - São José do Rio Preto, SP. **Bolsistas do CNPq.
Autor para correspondência: Hugo Kuniyuki
Data de chegada: 02/10/2006. Aceito para publicação em: 31/03/2008
        1404
ABSTRACT
  Grapevine leafroll is a complex disease that can be caused by
any one  of  the nine serologically distinct closteroviruses, referred
to as Grapevine leafroll-associated viruses 1  to 9  (GLRaV-1 to
GLRaV-9). So far, it has been known the occurrence of GLRaV-1,
GLRaV-2, GLRaV-3 and GLRaV-6 in Brazil. This work reports the
Kuniyuki, H.; Rezende, J.A.M.; Gaspar, J.O.; Yuki, V.A.  Detection of Grapevine leafroll-associated virus 5 in the State of Sao Paulo, Brazil.
Summa Phytopathologica, v.34, n.4, p.366-367, 2008
Keywords:  Vitis, Closteroviridae, GLRaV-5
O enrolamento da folha da videira (“Grapevine leafroll disease” –
GLR) é considerado uma das mais importantes viroses da videira (Vitis
spp.) nos principais países produtores de uva, devido à elevada
incidência e devido às significativas reduções na produção e qualidade
dos frutos. Os sintomas característicos dessa doença, mais evidentes
em cultivares sensíveis de V. vinifera, incluem enrolamento dos bordos
foliares para baixo e coloração avermelhada ou amarelada das áreas
internervais, com as nervuras principais e secundárias e áreas adjacentes
do parênquima permanecendo verdes (5).
O GLR é atribuído a nove vírus sorologicamente distintos, de
1.400 a 2.200 nm de comprimento, denominados de Grapevine leafroll-
associated viruses 1 a 9 (GLRaV-1 a GLRaV-9). Todos esses vírus
pertencem à família Closteroviridae. Com exceção do GLRaV-2 (gênero
Closterovirus) e do GLRaV-7 (espécie ainda não estabelecida), os
demais estão incluídos, como espécies ou possíveis espécies, no gênero
Ampelovirus (7, 10). Esses vírus, separadamente ou em mistura, estão
associados com a manifestação dos sintomas da doença (6).
A diagnose do enrolamento da folha é baseada em testes biológicos,
empregando videiras indicadoras (5). Os GLRaVs mais comuns podem
ser identificados por métodos imuno-enzimáticos, como ELISA e a
maioria deles, por métodos moleculares, como RT-PCR (3, 6, 11).
No Brasil, o enrolamento da folha ocorre de maneira generalizada
em quase todas as regiões onde a videira é cultivada (1). Dos vírus
associados à doença, é conhecida a ocorrência do GLRaV-1, GLRaV-2,
GLRaV-3 e  GLRaV-6, sendo o GLRaV-3 o vírus de maior incidência
nos vinhedos brasileiros (4, 8, 9).
O objetivo deste trabalho foi verificar a possível ocorrência do
GLRaV-5, mediante testes imuno-enzimáticos em amostras de videiras
cultivadas nos vinhedos paulistas.
As plantas infectadas, pertencentes a cultivares de importância
econômica, eram procedentes de diferentes regiões do Estado de São
Paulo, como Indaiatuba, Jales, Jundiaí, Junqueirópolis, Louveira, Pilar
do Sul, São Miguel Arcanjo, Tupi Paulista e Urânia. Essas videiras
haviam sido previamente testadas em videiras indicadoras do
enrolamento da folha, como Cabernet Franc, LN-33, Mission e Pinot
Noir e estavam mantidas em casa de vegetação no Centro de Pesquisa
e Desenvolvimento de Fitossanidade, setor de Virologia, do Instituto
Agronômico de Campinas (IAC).
A detecção do GLRaV-5 foi feita pelo teste de Biotina-ELISA,
usando anti-soro comercial (Plantest ELISA / BIO-RAD) e empregando
Palavras-chave adicionais: Vitis, Closteroviridae, GLRaV-5
RESUMO
O enrolamento da folha da videira (“grapevine leafroll”)  é uma
doença atribuída a pelo menos nove vírus sorologicamente distintos,
Grapevine leafroll-associated viruses 1 a 9 e designados GLRaV-1 a
GLRaV-9. No Brasil, já é conhecida a existência do GLRaV-1, GLRaV-
2, GLRaV-3 e GLRaV-6. Neste trabalho, foi demonstrada a ocorrência
Kuniyuki, H.; Rezende, J.A.M.; Gaspar, J.O.; Yuki, V.A. Detecção do Grapevine leafroll-associated virus 5  no Estado de São Paulo.   Summa
Phytopathologica, v.34, n.4, p.366-367, 2008
do GLRaV-5 em amostras de videiras cultivadas  no Estado de São
Paulo, mediante teste de Biotina-ELISA. O vírus foi detectado com
baixa incidência nas cultivares avaliadas, exceto na ‘Cardinal’, que
apresentou 100% de infecção. Este é o primeiro relato da ocorrência
do GLRaV-5 no Brasil.
identification of GLRaV-5 in leafroll-infected grape material from
the State of São Paulo, by Biotine-ELISA. The virus was detected
with low incidence in tested grape cultivars, except in ‘Cardinal’,
which showed 100% infected. This is the first report of  GLRaV-
5 in Brazil.
Summa Phytopathol., Botucatu, v. 34, n. 4, p. 366-367, 2008 367
a metodologia recomendada por essa empresa. Uma amostra foi
considerada positiva, quando o valor da absorbância a 405 nm foi pelo
menos três vezes superior ao valor da absorbância da amostra de
planta livre da doença.
As fontes de antígeno foram constituídas por pecíolos e nervuras
de folhas adultas e basais de plantas sabidamente infectadas pelo
GLR de 21 cultivares produtoras de uva.
Amostras de cinco cultivares, consideradas livres da doença
mediante indexação biológica, foram também incluídas nos testes
sorológicos como controle negativo.
A relação entre o número de plantas avaliadas e infectadas foi a
seguinte, para as 21 cultivares procedentes de 9 regiões do Estado de
São Paulo: Benitaka (7/0), Brasil (5/0), Cardinal (6/6), Centennial
Seedless (5/1), Christmas Rose (2/0), Concord (2/0), Flame Seedless
(2/0), IAC 138-22 (3/0), IAC 157-29 (3/0), Isabel (4/0), Itália (12/1),
Maria (3/0), Moscatel de Hamburgo (2/0), Niagara Branca (7/0), Niagara
Rosada (13/0), Piratininga (2/0), Red Globe (5/1), Rubi (5/0), Redimeire
(2/0), Seibel 2 (4/1) e Thompson Seedless (2/0).
O GLRaV-5 foi detectado apenas nas cultivares Cardinal,
Centennial Seedless, Itália, Red Globe e Seibel 2. A ‘Cardinal’
encontrava-se 100% infectada pelo vírus. A incidência média da doença
foi de 10,4%.
Os valores médios das absorbâncias para extratos foliares de videiras
infectadas variaram de 0.309 a 1,532 em comparação com os valores
médios obtidos para o controle negativo (0.059) e para o controle
positivo do “kit” (1,177).
Os resultados demonstraram a ocorrência do GLRaV-5 nos
vinhedos paulistas, porém com baixa incidência, exceto na ‘Cardinal’
(100%). Como as principais cultivares plantadas no Estado de São
Paulo, como Benitaka, Brasil, Isabel, Itália, Niagara Rosada e Rubi,
não estão infectadas ou apresentam incidência muito baixa, é possível
considerar que a presença do GLRaV-5 se deveu à propagação de
cultivares de introdução mais recente, como ‘Cardinal’, ‘Red Globe’
ou ‘Centennial Seedless’. As informações sobre a incidência do GLRaV-
5 em outros países ainda são escassas, mas, com base nos poucos
resultados disponíveis, a freqüência média com que o vírus ocorre nas
plantações de uva parece ser baixa, em torno de  1-2% (7).  Mas, em
algumas cultivares, a incidência pode ser elevada, de 20 a 42% (2).
 Plantas consideradas livres do enrolamento da folha, pertencentes
às cultivares Cabernet Franc, LN-33, Itália, Niagara Rosada e Rubi,
apresentaram resultados negativos para o GLRaV-5. Os valores médios
de absorbância das amostras dessas cinco cultivares variaram de 0,035
a 0,057.
Não foi verificado caso de infecção isolada pelo GLRaV-5, pois
este invariavelmente encontrava-se em infecção simultânea com um
ou mais dos GLRaVs registrados em São Paulo (8, 9). Assim sendo, os
sintomas induzidos isoladamente pelo GLRaV-5 nas plantas infectadas
não puderam ser observados. Conseqüentemente, o GLRaV-5 só pode
ser identificado mediante teste imuno-enzimático, como ELISA,  ou
então por métodos moleculares, como RT-PCR (3, 4, 7, 11).  Este é o
primeiro relato da ocorrência do GLRaV-5 infectando videiras no Brasil.
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Candresse, T.; Coutts, R.H.A.; Dolja, V.V.; Falk, B.W.; Gonsalves,
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O enrolamento da folha da videira (grapevine leafroll) é uma doença atribuída a pelo menos nove vírus sorologicamente distintos, Grapevine leafroll-associated viruses 1 a 9 e designados GLRaV-1 a GLRaV-9. No Brasil, já é conhecida a existência do GLRaV-1, GLRaV-2, GLRaV-3 e GLRaV-6. Neste trabalho, foi demonstrada a ocorrência do GLRaV-5 em amostras de videiras cultivadas no Estado de São Paulo, mediante teste de Biotina-ELISA. O vírus foi detectado com baixa incidência nas cultivares avaliadas, exceto na 'Cardinal', que apresentou 100% de infecção. Este é o primeiro relato da ocorrência do GLRaV-5 no Brasil.Grapevine leafroll is a complex disease that can be caused by any one of the nine serologically distinct closteroviruses, referred to as Grapevine leafroll-associated viruses 1 to 9 (GLRaV-1 to GLRaV-9). So far, it has been known the occurrence of GLRaV-1, GLRaV-2, GLRaV-3 and GLRaV-6 in Brazil. This work reports the identification of GLRaV-5 in leafroll-infected grape material from the State of São Paulo, by Biotine-ELISA. The virus was detected with low incidence in tested grape cultivars, except in 'Cardinal', which showed 100% infected. This is the first report of GLRaV-5 in Brazil.APTA Instituto Agronômico Centro de Pesquisa e Desenvolvimento de FitossanidadeUSP ESALQ Departamento de Entomologia, Fitopatologia e Zoologia AgrícolaUNESP IBILCE Departamento de BotânicaUNESP IBILCE Departamento de Botânic

Gaspar, José Osmar [UNESP]

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Detection of Grapevine leafroll-associated virus 5 in the State of Sao Paulo, Brazil

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