Generation of a stable, soluble mimic of the HIV-1 envelope glycoprotein (Env) trimer on the virion surface has been considered an important first step for developing a successful HIV-1 vaccine. Recently, a soluble native-like Env trimer (BG505 SOSIP.664) has been described. This protein has facilitated major advances in the HIV-1 vaccine field, since it was the first Env immunogen that induced consistent neutralizing antibodies against a neutralization-resistant (tier 2) virus. Moreover, BG505 SOSIP.664 enabled elucidation of the atomic resolution structure of the Env trimer and facilitated the isolation and characterization of new broadly neutralizing antibodies against HIV-1. Here, we designed and characterized the BG505 SOSIP.664 trimer fused to fluorescent superfolder GFP (sfGFP), a GFP variant that allows efficient folding (BG505 SOSIP.664-sfGFP). Despite the presence of the sfGFP, the Env protein largely retained its morphology, antigenicity, glycan composition, and thermostability. In addition, we show that BG505 SOSIP.664-sfGFP can be used for fluorescence-based assays, such as flow cytometry.</p

Crispin, M

Crispin, MD

Ozorowski, G

Pritchard, LK

Sanders, RW

Sliepen, K

van Montfort, T

Ward, AB

PubMed

Generation of a stable, soluble mimic of the HIV-1 envelope glycoprotein (Env) trimer on the virion surface has been considered an important first step for developing a successful HIV-1 vaccine. Recently, a soluble native-like Env trimer (BG505 SOSIP.664) has been described. This protein has facilitated major advances in the HIV-1 vaccine field, since it was the first Env immunogen that induced consistent neutralizing antibodies against a neutralization-resistant (tier 2) virus. Moreover, BG505 SOSIP.664 enabled elucidation of the atomic resolution structure of the Env trimer and facilitated the isolation and characterization of new broadly neutralizing antibodies against HIV-1. Here, we designed and characterized the BG505 SOSIP.664 trimer fused to fluorescent superfolder GFP (sfGFP), a GFP variant that allows efficient folding (BG505 SOSIP.664-sfGFP). Despite the presence of the sfGFP, the Env protein largely retained its morphology, antigenicity, glycan composition, and thermostability. In addition, we show that BG505 SOSIP.664-sfGFP can be used for fluorescence-based assays, such as flow cytometry

Pritchard, Laura K.

Crispin, Matthew

Sliepen, Kwinten

van Montfort, Thijs

Ozorowski, Gabriel

Ward, Andrew B.

Sanders, Rogier W.

Oxford University Research Archive

Engineering and characterization of a fluorescent native-like HIV-1 envelope glycoprotein trimer

Kwinten Sliepen

Thijs van Montfort

Gabriel Ozorowski

Laura K. Pritchard

Max Crispin

Andrew B. Ward

Rogier W. Sanders

Directory of Open Access Journals

Biomolecules

Engineering and Characterization of a Fluorescent Native-Like HIV-1 Envelope Glycoprotein Trimer

Multidisciplinary Digital Publishing Institute

Oxford University Research Archive (ORA)

Laura Pritchard

Andrew Ward

Rogier Sanders

Crossref

Generation of a stable, soluble mimic of the HIV-1 envelope glycoprotein (Env) trimer on the virion surface has been considered an important first step for developing a successful HIV-1 vaccine. Recently, a soluble native-like Env trimer (BG505 SOSIP.664) has been described. This protein has facilitated major advances in the HIV-1 vaccine field, since it was the first Env immunogen that induced consistent neutralizing antibodies against a neutralization-resistant (tier 2) virus. Moreover, BG505 SOSIP.664 enabled elucidation of the atomic resolution structure of the Env trimer and facilitated the isolation and characterization of new broadly neutralizing antibodies against HIV-1. Here, we designed and characterized the BG505 SOSIP.664 trimer fused to fluorescent superfolder GFP (sfGFP), a GFP variant that allows efficient folding (BG505 SOSIP.664-sfGFP). Despite the presence of the sfGFP, the Env protein largely retained its morphology, antigenicity, glycan composition, and thermostability. In addition, we show that BG505 SOSIP.664-sfGFP can be used for fluorescence-based assays, such as flow cytometr

Crispin, Max

NARCIS 

Bernier, Yvon

Érudit

Érudit est un consortium interuniversitaire sans but lucratif composé de l'Université de Montréal, l'Université Laval et l'Université du Québec àMontréal. Il a pour mission la promotion et la valorisation de la recherche. Érudit offre des services d'édition numérique de documentsscientifiques depuis 1998.Pour communiquer avec les responsables d'Érudit : info@erudit.org Article « Itinéraire d’une œuvre » Yvon BernierÉtudes littéraires, vol. 12, n° 1, 1979, p. 7-10.   Pour citer cet article, utiliser l'information suivante : URI: http://id.erudit.org/iderudit/500475arDOI: 10.7202/500475arNote : les règles d'écriture des références bibliographiques peuvent varier selon les différents domaines du savoir.Ce document est protégé par la loi sur le droit d'auteur. L'utilisation des services d'Érudit (y compris la reproduction) est assujettie à sa politiqued'utilisation que vous pouvez consulter à l'URI https://apropos.erudit.org/fr/usagers/politique-dutilisation/Document téléchargé le 10 février 2017 11:55ITINÉRAIRE D'UNE ŒUVRE yvon bernier Entrée en littérature par la porte étroite de la poésie, Mar-guerite Yourcenar devait bientôt délaisser1 ce mode d'ex-pression au profit d'une prose qui gardera toujours le sou-venir de ce chemin royal. À l'automne de 1929, elle publie son premier récit, Alexis ou le Traité du Vain Combat, court ouvrage en forme de lettre écrit dans une prose classique, limpide, où abondent les phrases admirablement frappées. Un homme y confie à sa femme ces penchants dont, sauf dans les œuvres de Gide, Proust et quelques autres, la litté-rature ne faisait pas encore tellement état à l'époque, et lui communique sa décision de la quitter afin de se réaliser soi-même. Sur un thème qui a fait depuis fortune, souvent d'une façon par trop scandaleuse, Marguerite Yourcenar offrait au public un premier chef-d'œuvre et son premier « portrait d'une voix», technique narrative qui trouvera son achèvement ultime dans Mémoires d'Hadrien (1951). Deux ans plus tard paraît un second récit, La Nouvelle Eurydice (1931), œuvre au dessin indécis, en dépit de l'élégance de l'écriture, parce qu'au cours de la rédaction, de l'aveu même de l'écrivain, «la fusion entre le réel et le fictif ne s'est pas bien faite dans ce récit consacré à une femme disparue jeune et évoquée di-versement par les survivants»2. Puis c'est Pindare, publié en 1932, «mais écrit vers 1924, hâtif essai sur la vie et l'œuvre de ce difficile poète grec, entrepris trop tôt avec un enthou-siasme naïf»3, qui n'a pas été republié depuis, Marguerite Yourcenar jugeant sévèrement cette œuvre de jeunesse. En 1934, paraît Denier du Rêve, roman qui se passe à Rome au début des années 30, et qui, dans sa dénonciation du fas-cisme, traduit déjà un sens aigu du drame politique de notre temps. (L'écrivain donnera une version définitive de ce livre en 1959, après en avoir réécrit de larges pans, et en tirera une pièce intitulée Rendre à César en 1961.) En 1934, c'est La Mort conduit l'attelage4, recueil de trois nouvelles com-posées aux environs de la vingtième année, et dont la pre-ÉTUDES LITTÉRAIRES - AVRIL 1979 8 mière, D'après Durer, allait plus tard servir de noyau à L'Œu-vre au Noir. Ces nouvelles situées au XVIe et au XVIIIe siècle furent suivies par les proses lyriques de Feux (1936), ce somptueux chef-d'œuvre, d'une résonance unique dans la production de Marguerite Yourcenar. Dans Feux, des mythes antiques modernisés de façon à faire voler en éclats toute notion de temps et de durée illustrent d'incandescentes pen-sées sur l'amour et la souffrance, son corollaire. «Produit d'une crise passionnelle»5, âpre, suppliant et révolté, cet ou-vrage glorifie finalement «les valeurs de la passion, qu'elles soient de l'intelligence, de l'âme ou de la chair»6. En 1938, Marguerite Yourcenar donne Les Songes et les Sorts, où elle raconte quelques-uns de ses rêves, et «s'essaie à l'étude d'une architecture du songe, indépendante des concepts freudiens de l'époque»7; Nouvelles Orientales, où elle ré-interprète librement des légendes slaves, grecques modernes, extrême-orientales ou hindoues; et, en 1939, Le Coup de Grâce, tragique histoire d'amour sur fond de guerre, que Volker Schlondorff vient de porter à l'écran. C'est aussi entre 1936 et 1939 qu'elle traduit Vagues de Virginia Woolf, publié en 1937, et Ce que savait Maisie d'Henry James qui ne devait paraître cependant qu'en 1947. Pendant la Seconde Guerre mondiale et dans les années qui suivent immédiatement ces événements, Marguerite Yourcenar ne publie que quelques articles dans Les Lettres Françaises de Buenos-Aires dirigées par Roger Caillois, ou à Alger dans Fontaine. Mais c'est alors qu'elle compose ses trois pièces à sujet grec, Le Mystère d'Alceste (1942), Electre ou la Chute des Masques (1943), Qui n'a pas son Minotaure ?(1947), et qu'elle donne son adaptation scénique de La Petite Sirène d'Andersen, jouée par A. Everett Austin à l'Avery Mémorial Théâtre de Hartford (Connecticut) en 1942. À cette même époque, elle rassemble et traduit d'innombrables Negro Spiri-tuals qui formeront plus tard Fleuve Profond, Sombre Rivière. À partir de 1948, Marguerite Yourcenar se remet avec ardeur à Mémoires d'Hadrien, œuvre qu'elle portait en elle depuis la fin de l'adolescence, fiévreusement entreprise, abandonnée, re-prise pour être abandonnée à nouveau, parce qu'elle consti-tuait un de ces projets trop ambitieux qu'«on ne doit pas | oser avant d'avoir dépassé quarante ans»8. Cette fois, elle veui i c.r^ever «coûte que coûte»9. Lorsque le livre paraît, en ITINÉRAIRE D'UNE OEUVRE 9 1951, l'écrivain, apprécié jusqu'ici par un certain nombre de critiques attentifs et d'admirateurs fidèles, obtient du jour au lendemain un très vaste public. Plus près de l'essai quedu roman historique auquel ils ont été abusivement rattachés, ces mémoires imaginaires d'un empereur romain du IIe siècle restent l'une des plus prodigieuses réussites de notre temps. «Sortant moi-même des années de guerre, déclare leur auteur, j 'ai voulu présenter l'image d'un chef d'État intel-ligent, pacificateur et reconstructeur.»10 Entre 1954 et 1963, Marguerite Yourcenar publie les trois pièces à sujet antique énumérées plus haut, dont l'une, Electre ou la Chute des Masques, est portée à la scène en 1954 ; puis, en 1958, sa Présentation critique de Constantin Cavafy, com-posée dix-neuf ans plus tôt. En 1962, elle rassemble les essais de Sous bénéfice d'inventaire. Deux ans plus tard, paraît Fleuve Profond, Sombre Rivière, précédé d'une préface « ins-pirée par le mouvement d'intégration aux États-Unis et consa-crée au Negro Spiritual et à l'historique de la condit ion du Noir américain»11 . En 1968, année faste à l'image de 1951, paraît l'autre chef-d'œuvre qui se préparait en elle depuis sa jeu-nesse, L'Œuvre au Noir, pour lequel on lui décerne le Prix Fémina à l'unanimité, fresque puissante et touffue de la Re-naissance brossée avec un «réalisme halluciné»12 . Le héros du roman, Zenon, alchimiste, médecin, philosophe, est la plus belle figure que l'art de Marguerite Yourcenar ait créée, avec celle de l'empereur Hadrien. L'année suivante, elle révèle au public français un poète américain inconnu, Hortense Flexner, publié par elle en édition bilingue. Enfin, depuis 1970, l'écrivain se consacre à une autobiographie1 3 qui tient infiniment plus de la chronique familiale que de laconfession. Dans le premier volet de cette suite intitulée Le Labyrinthe du Monde, Souve-nirs Pieux (1974), il explorelecôté maternel desafami l le ; dans Archives du Nord (1977), le côté paternel. Mais qu'on se garde bien de croire que Marguerite Yourcenar, dans cette entre-prise, se complaît au spectacle tribal du cercle de famille. Au contraire, elle en réussit en quelque sorte la quadrature, y logeant l'espèce tout entière, remontant jusqu'à « la nuit des temps», bien avant que ne se mette en marche la caravane humaine. Sa famille lui sert de prétexte à une réflexion plus haute, car on ne s'en tient pas à ce moi multiplié qu'est toute famille quand on a peu d'intérêt pour son propre moi. ÉTUDES LITTÉRAIRES - AVRIL 1979 10 Notes et références 1 Pas tout à fait, à vrai dire, puisqu'elle publiera en 1956 une plaquette de vers, Les Charités d'Alcippe, aujourd'hui épuisée, mais destinée à reparaître bientôt augmentée de pièces nouvelles. En outre, «la poésie sous de strictes formes prosodiques n'a pas cessé d'accompagner, comme en retrait, le développement de son oeuvre en prose», affirme-t-elle dans une lettre datée du 4 janvier 1978, ajoutant que «dans ses traduct ions de poètes grecs anciens et de Negro Spirituals, elle s'est d'autre part livrée à un grand nombre d'expérimentat ions avec divers types d'expression prosodique». 2 Lettre du 4 janvier 1978. 3 Ibid. 4 L'écrivain met au point, en ce moment, la version définit ive de ce livre, é l imi-nant toutefois la nouvelle qui a servi de point de départ à L'Œuvre au Noir, retouchant les deux autres. 5 Préface de Feux, datée du 2 novembre 1967, Paris, Pion, [1968], p. 9. 6 Lettre du 4 janvier 1978. 7 Ibid. 8 «Carnets de notes des Mémoires d'Hadrien», Paris, Pion, 1958, p. 315. 9 Ibid., p. 320. 10 Lettre du 4 janvier 1978. 11 Ibid. 12 ibid. 13 Jean Roudaut vient d'en donner une analyse tout à fait remarquable dans «Une autobiographie impersonnel le», La Nouvelle Revue Française, 1 e r novembre 1978, n° 310, pp. 71-81 . 