Itälä, Liisa

Helsingin yliopiston digitaalinen arkisto

HELSING IN YLI OP!STo _ HELSINGFoRS UNIVEBSITETAlkoholin suurkulutus on merkittävä rerveyshaitta . Alkoholinsuurkulutuksen toteamisessa j a hoidon seurannassa käytettävät perinteisetsuurkulutusta mittaavat laboratoriokokeet eivät ole riimavän spesifisiä jaherkkiä. Siksi tarvitaan uusi,spesifinen ja herkk¿i menetelmä suurkuluttajiendiagnostoimiseksi.Alkoholin hapetuksessa syntyvän asetaldehydin tiedetään reagoivan helpostimonien proteiinien, kuten hemoglobiinin kanssa muodostaen asetaldehydi-proteüni addukteja. Tällaiset adduktit olisivat, ainakin reoriassa, erinomaisiaalkoholin suurkulutuksen mittareita.Koska hemoglobiini esiinfyy suurina määrinä punasoluiss4 on helpostieristettävissä ja se on aikaisempien tutkimusten perusteella osoittautunutlupaavaksi suurkulutuksen markkeriksi, se on vaiitnr tämän työntutkimuskohteeksi. Työssä on ollut tarkoituksena kehinää HPLC-kationinvaihtonestek¡omato grafinen menetelmd, jolla i n v i rro tuotettuj ahemo globiini-asetaldehydi adduktej a voirai s iin todeta, tutkia adduktienmuodostumista sekä selvittää glukoosin (diabetes) ja asetyylisalisyylihapon(aspirüni) häirits evä vaikutus.Tutkimuksen tuloksena synfyi HPlC-nestekarioninvaihtoon perustuvamenetelmd, j olla pys tyniin erottam aan L9 eri hemo globiin i- fraktio ta.Menetelmän toistettavuus oli alle I6Vo ja määrirysraj a alle O.l%okokonais hemoglobiinis ta.Asetaldehydin reaktio hemoglobünin kanssa aiheutti muutoksia yhdeksäännåüstä fraktioista. Yksi fraktio, jonka nimesimme HbAlach3:ksi, osoittautuispesifi seksi asetaldhydin aiheuttamaksi muutokseksi. HbA I o.¡3 muodostuiasetaldehydin ja HbAg:n reaktiotuotteena. Se osoinautui stabiiliksiadduktiksi, koska dialysointi ja pelkistäminen (NaBH3CN:llä) eivätvaikuttaneet HbA I u"¡3 :n. Jo pienet (5-50 uM) asetaidehydi-konsenrraarioraiheuttivat mianavia muutoksia HbAlu.¡3:ssa. HbAluch3 ei muurtunutglukoosin ja asetyylisalisyylihapon vaikutuksesta Menerelmä näyttiüsisopivan erinomaisesti hemoglobiini-asetaldehydi adduktien muodostumisentutkimiseen in vitro. Lisäksi HbAlach3:n spesifisyys ja herþysasetaldhydille i n v i t r o kannus tavat sel vittämåüin sen käyttökelpo is u uttaalkoholin suurkuluruksen osoittimena in vivo.'t-lar - Arbaraft ttMat . Luonnonti eteel 'l i nenTio¡6uO!6to - F.tu¡t.VS.¡ù6aJOog¡¡¡nl - [lrøm.ts i okem'i aDeterm'ination of hemogìobin-acetaìdehyde adducts in vitroby cation-exchange ìiquid chromatographylyon nrmr - ^.6alatt trtalLìisa Itälä'iokemian laìtosUsta ntlqr -uo99rlltrorv6nñgSlaIcAvarn{ú¡ - NyCtatOrO

Determination of hemoglobin-acetaldehyde adducts in vitro by cation exchange liquid chromatography

Abstract

Similar works

Full text

Available Versions

Helsingin yliopiston digitaalinen arkisto