Faculty of Veterinary Medicine University of Zagreb
Abstract
Acellularization of xenogenic biomaterials has been highly desired for implantation without considerable adverse inflammatory and immune responses. Therefore, the present study was undertaken to acellularize the diaphragm of buffalo origin and to evaluate the effi cacy of this prepared acellular diaphragm matrix (ADM) scaffolds for the repair of umbilical hernia in pigs. Buffalo diaphragms were acellularized with different concentrations of sodium deoxycholate over a range of periods. Produced ADM scaffolds were used during umbilical hernioplasty in 12 crossbred Landrace pigs. Harvested serum samples on post-implantation days (0, 15 and 30) were subjected to sodium dodecyl sulfate (SDS) polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) to observe serum protein distribution pattern. Treatment with 2 % sodium deoxycholate lead to complete acellularization of the bubaline diaphragm at 48 h. Microscopic examination of the detergent treated matrix confirmed complete extraction of stromal cells and orderly arranged collagen fibres. All the hernias repaired with ADM remained sound over a period of 3 months. The serum protein distribution on post-implantation day 15 was found different from day zero and becomes normal on day 30. All the hernias implanted with ADM healed completely without graft rejections. The present study suggested that 2 % sodium deoxycholate can be used for complete acellularization of bubaline diaphragm, and produced ADM may be used safely for umbilical hernioplasty in pigs.Bezstanična struktura ksenogenih biomaterijala smatra se povoljnom jer pri implantaciji ne uzrokuje upalne i imunološke reakcije. U ovom je istraživanju proveden postupak dobivanja bezstanične matrice iz ošita (BMO) bivola koji je zatim bio rabljen kao podloga za obnavljanje tkiva pri operaciji pupčane hernije svinja. Gubitak stanične strukture bivoljih ošita proveden je uz pomoć različitih koncentracija natrijeva deoksikolata, primijenjenih u određenim vremenskim razmacima. Proizvedene bezstanične matrice ošita upotrijebljene su pri pupčanoj hernioplastici kod 12 svinja križanaca landras pasmine. Uzorci seruma, prikupljeni 0., 15. i 30. dana nakon implantacije, bili su podvrgnuti natrijev dodecil sulfat-poliakrilamid gel elektroforezi (SDS-PAGE) s ciljem promatranja razdiobe serumskih proteina. Obrada 2 %-tnim natrijevim deoksikolatom dovela je do potpunog gubitka stanične strukture bivoljeg ošita za 48 sati. Mikroskopskim pregledom matrice obrađene detergentom potvrđeno je potpuno uklanjanje stanica strome te uredno raspoređena kolagena vlakna. Mjesta operacije svih hernija kod kojih je upotrijebljena bezstanična matrica ošita ostala su zdrava tijekom 3 mjeseca. Razdioba serumskih proteina 15 dana nakon implantacije bila je različita u odnosu na početni (0.) dan, a 30. dan nakon implantacije vratila se na normalu. Sve hernije operirane uz upotrebu BMO u potpunosti su zacijelile bez odbacivanja presatka. Pomoću 2 % natrijeva deoksikolata postiže se potpuni gubitak stanične strukture bivoljeg ošita koji se može sigurno primijeniti pri pupčanoj hernioplastici svinja
