Parallel artificial liquid membrane extraction (PALME) ble publisert i 2013 og er en ny form for væskefase-mikroekstraksjon (liquid-phase microextraction, LPME). Teknikken utføres i et 96-brønnsformat bestående av en bunnplate, organisk væskemembran, mottakerplate og et topplokk. Ekstraksjonen utgjør et trefasesystem tilsvarende tradisjonell væske-væske-ekstraksjon (liquid-liquid-extraction, LLE) med tilbakeekstraksjon. Høy grad av selektivitet og lavt forbruk av organisk løsemiddel er gunstige fordeler som gjør teknikken attraktiv å anvende for nye stoffgrupper. I denne oppgaven har PALME blitt anvendt til prøveopparbeidelse av et utvalg nye psykoaktive stoffer (NPS) fra blod. Forekomst og bruk av NPS har tiltatt de siste årene, og helserisikoen stoffene medfører gjør det viktig å utvikle nye og effektive analyseteknikker til sikker påvisning og kvantifisering. Totalt 14 substanser ble testet og de fleste tilhørte én av følgende undergrupper av NPS: fenetylaminer, tryptaminer, piperaziner og syntetiske katinoner. Inkluderte substanser var MDAI, metylon, 5-IT, PFA, alfa-metyltryptamin, mCPP, 6-APB, pentedron, metoksetamin, MDPV, etylfenidat, 2C-E, Bromo DragonFLY og AH-7921. Substansene var basiske aminer med pKa-verdier mellom 7,3 og 10, og log P mellom 1,1 og 4,0. Dette ga gode forutsetninger for ekstraksjon med PALME. Dette var første gang teknikken ble utført med fullblod som analysemedium, og en optimalisering av ekstraksjonen ble utført. Fokus var rettet mot effektivisering og mulighet for rutinemessig og kvantitativ anvendelse av metoden. Det ble testet tilsetning av ulike sluttkonsentrasjoner av NaOH i prøveløsningen (3,0-30 µM), fire ulike membranvolum (2,0-3,5 µl), seks ulike organiske løsemidler som organisk væskemembran (diheksyleter, dodecylacetat, nitrofenyloktyleter, isopentylbenzen, heksadekan og nonanon), ulike ekstraksjonstider (15-45 minutter) og ulike volum for mottakerløsningen (50 og 250 µl). Resultatet bidro til følgende ekstraksjonsprosedyre: Stoffene ble ekstrahert fra en 250 µl prøveløsning som bestod av 100 µl blodprøve, 75 µl 80 mM NaOH, 50 µl vann og 25 µl internstandard. Organisk væskemembran bestod av 3 µl dodecylacetat, og 20 mM HCOOH ga pH-drevet overgang til 250 µl mottakerløsning. Ekstraksjonen ble fremmet med risting ved 900 rpm og pågikk i 40 minutter. Analyse ble utført med ultra high pressure liquid chromatography tandem mass spectrometry (UHPLC-MS/MS). Metodevalideringen innebar evaluering av linearitet, presisjon og nøyaktighet, deteksjons- og kvantifiseringsgrenser, ekstraksjonsutbytte, matrikseffekter, spesifisitet, overdrag og holdbarhet. UHPLC-MS/MS-metoden separerte stoffene tilfredsstillende på i underkant av ni minutter. Vektede lineære standardkurver (1/x) ble satt opp i området fra stoffenes kvantifiseringsgrense til øvre konsentrasjon. Standardkurvene hadde r2-verdier mellom 0,92 og 0,99. Det ble beregnet et ekstraksjonsutbytte på mellom 11-87 % for samtlige stoffer, unntatt 5-IT, Bromo DragonFLY og 2C-E, hvor ekstraksjonsutbyttet lå på mellom 3-19 %. Det var forholdsvis stor variasjon i ekstraksjonsutbyttet mellom de ulike stoffene, og en viss konsentrasjonsavhengighet ble observert for enkelte. Deteksjonsgrenser ble satt mellom 0,0025-0,50 µM og kvantifiseringsgrenser mellom 0,13-5,0 µM. Valideringen forøvrig viste tilfredsstillende resultat for presisjon, nøyaktighet, matrikseffekter, overdrag og spesifisitet. Holdbarhetstesting viste at ekstraktene var holdbare i opp til syv dager ved -20C og 10C. 10 autentiske blodprøver ble analysert ved hjelp av metoden. Målte konsentrasjoner avviket noe fra tidligere målte konsentrasjoner, men alle konsentrasjonene var i samme størrelsesorden, unntatt AH-7921 og Bromo DragonFLY som så ut til å ha forsvunnet fra prøvene. Resultatet for de reelle prøvene viste at PALME kunne benyttes til prøveopparbeidelse av NPS fra fullblod, og til en rask prøveopparbeidelse for påvisning (screening) av de 14 validerte stoffene. Ved videre optimalisering av betingelser og konsentrasjoner vil det også kunne være mulig å bruke metoden til kvantifisering
