Trabalho de Conclusão de Curso - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Departamento de Pediatria, Curso de Medicina, Florianópolis, 199

Boing Júnior, Hailton

Portuguese

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Teste de aglutinação em látex para a pesquisa de streptococcus pneumoniae e haemophilus influenzae na urina de crianças com pneumonia: um estudo para avaliar a sua eficácia.

Repositório Institucional da UFSC

PE 345 5” 5 if E UNIVERSIDADE FEDERAL DE SANTA CATARINA CENTRO DE CIENCIAS DA SAUDE DEPARTAMENTO DE PEDIATRIA TESTE DE AGLUTINACAO EM LATEX PARA A PESQUISA DE STREPTOCOCCUS PNEUHONIAE E HAEMOPHILUS INFLUENZAE NA URINA DE CRIANÇAS PNEUMONIA: UM ESTUDO PARA AVALIAR A SUA EFICÁCIA. Hailton Boing Jr. _ Mário Cesar Kormann - Doútorandos da llê fase do Cunsockafiraduacão em Medicina - D3 UFSC C ' Florianóvolis. Junho de 1990.› COMr AGRADECIMENTO Agradecemos ao Dr. Sérgio W. Duwe, orientador deste traba- lho, pela sua valorosa contribuição.1 SUMÁRIO INTRoDUçÃo......... . . . . ........ . . . . . . . . . . ... . . . . . . . . . . . . . . .. MATERIAL E MÉTODOS.......................................... REsULfADos................. . . . . . ............................ DISCUSSÃO................................................... CONCLUSÃO................................................... REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS..................................1 RESUMO: Foram testadas, através do teste de aglutinação em látex para a detecção dos Antígenos do Streptococcus Pneumoniae e Haemophilus Influenzae, amostras de urina de 31 pacientes -in- ternadosrxnno diagnóstico de pneumonia e 38 pacientes assinto- máticos atendidos no ambulatório de pediatria do Hospital Uni- versitário da Universidade Federal de Santa Catarina, no perío- do de setembro de 1989 a abril de l990. Entre os pacientes internados, 05 (l6,l%) tiveram amos- tras positivas para o Streptococcus Pneumonidae, 03 (9,7%) para o Haemophilus Influenzae e 23 (74,2%) pacientes tiveram amos- tras negativas.4 No grupo controle, 15 (38,5%) pacientes tiveram amostras positivas para o Streptococcus Pneumonidae, l (2,5%) para o Haemophilus Influenzae e 23 (59%) dos pacientes tiveram › amos- tras negativas. Concluímos que este método não ê confiável para a detecção do Streptococcus Pneumonidae devido a grande positividade no grupo controle.r1 INTRODUÇÃO A pneumonia ê um processo inflamatório agudo que comprome- te alvêolos, bronquíolos e espaço interstical. No Brasil ë a terceira causa de mortalidade infantil. Estudos realizados no 'k Brasil por diversos autores, demonstraram que o Streptococcus~ Pneumoniae e o Haemophilus Influenzae sao responsaveis por mais de 80% da etiologia das pneumonias, independente da faixa etá- ria, com exceção dos recêm-natos. As dificuldades em isolar o agente etiológico para o diag- nóstico preciso das pneumonias são conhecidas. A maioria dos mê- todos carece de sensibilidade e/ou especificidade. A hemocultura apresenta uma baixa sensibilidade pöis apenas 15-20% serão posi- tivas.l ã cultura do escarro falta especificidade pois muitos in- divíduos saudáveis terão o Streptococcus Pneumoniae e o Haemo- philus Influenzae presentes na nasofaringe sem qualquer signi- ficância patogênica.2 A cultura do material do aspirado brõn- quico, além de exigir equipe médica especializada, pode ocorrer ' ¡ É Í 1 contaminaçao com a flora orofaringea. A cultura do derrame plu- eral (quando presente) apresenta uma razoável sensibilidade e * ROTOV, Wehba e Cols. MURAHOVSKI e Cols, FERREIRA, Balduci e Cols.:- ¡ . 06 especificidade. A cultura do material do foco pulmonar colhido por aspiração transcutánea apresenta uma positividade‹ka50-60%, mas por tratar-se de um método invasivo sujeito á complicações e contra-indicações; não é usado rotineiramente na prática clí- . l - . - . . _ .' nica. Alem disso, o uso previo de agentes antimicrobianos an-~ tes de se obter as amostras clínicas sao responsáveis pela me- nor sensibilidade dos métodos de cultura. ~Como alternativa â cultura, os testes imunolõgicos (eli- sa, radioimunoensaio, contraimunoeletroforese e o teste de aglutinação em látex) para a detecção dos antígenos bacterianos produzidos no sítio de infecção e distribuídos nos líquidos corporais é um enfoque não envasivo promissor para um diagnósti- co sensível e específico com a vantagem de que seu resultado Ff' |.ú. não se altera em pacientes tratados parcialmente com antibiõ - 234 cos.. ~ Os métodos Elisa, Radiomunoensaio e Contraimunoeletrofo- rese por exigirem equipamentos sofisticados e pessoal especia- lizado tem limitado seu uso rotineiro na prática diária. Atualmente o teste de aglutinação em látex tem-se mostra- do o método mais' prático na detecção dos antígenos bacteria- nos. Os testes de aglutinação em látex usam partículas de lá- tex cobertas com anticorpos específicos para o antígeno polis- sacarídeo, quando essas partículas de látex cobertas com_ anti- corpos são misturadas com amostras da urina do paciente e se o antígeno estiver presente ocorrerá uma visível reação de aglu- tinação.2r1 07 O objetivo do presente estudo ê o de avaliar a eficácia do teste de aglutinação em látex para a detecçao de antígenos do Streptococcus Pneumoniae e Haemophilus Influenzae na urina, como método auxiliar no isolamento do agente etiológico das pneumo- nias.rr MATERIAL E MÉTODOS Este trabalho ë um estudo prospectivo realizado no Hospi- tal Universitário da Universidade Federal de Santa Catarina, en- tre setembro de 1989 e abril de 1990. ` ~ o .- O teste de aglutinaçao em latex na urina para a detecçao do antígeno do Streptococcus Pneumoniae e Haemophilus Influen- zae foram realizados em 2 grupos de pacientes. O primeiro grupo consistia de pacientes internados na enfermaria pediátrica do Hospital Universitário, com o diagnóstico clínico e radiolõgico de pneumonia. O exame foi solicitado no 19 dia de internação,in- dependente do uso prévio ou não de antibióticos.g O segundo grupo consistia de pacientes atendidos no ambu- latõrio de Pediatria do Hospital Universitário e que não apre- sentavam nenhum quadro infeccioso confirmado ou suspeito, pelo menos 15 dias antes do exame e será denominado de grupo contro- le. , O kit utilizado foi o sildex mêningite - kit, produzido pelo laboratório Bio-Mêrieux. Nenhuma amostra de urina foi concentrada. O resultado do exame foi graduado em negativo, fracamenterr , 09 positivo e fortemente positivo. Sendo que as amostras fracamente positivas (presença de granulaçoes finas) para o Streptococcus Pneumoniae, foram consideradas como negativas, conforme indica- ção da bula do testez O protocolo formulado para a obtençao de dados incluía as seguintes informações: nome, nQ de registro, idade, sexo, dia da internação e resultado de exame.rr RESULTADOS Foram analisadas amostras de urina de 31 pacientes inter- nados e de 38 pacientes no grupo controle. A distribuição do sexo do grupo controle e dos pacientes está relacionado na ta- bela I sExo Ó' To'1¬AL GRUPO Controle 25 (65,8%) 13 (34,2%) 38 (100%) Internados 23 (74,2%) 08 (25,8%) 31 (100%) Tabela I: Distribuição de acordo com o sexo no grupo con- trole e em pacientes internados. A idade dos pacientes internados variou de 02 meses ä 14 anos e 8 meses com uma média de 2 anos e 3 meses. No grupo con- trole a idade variou de 1 ano e 4 meses ã l3 anos e 2 meses com uma média de 5 anos e 3 meses. Distribuiçao de acordo com a idade no grupo controle em pacientes internados e demonstrado na tabela IIr ll GRUPO INTERNADOS CONTROLE IDADE 3o'â›--- 2 anos- 21 ‹õ7,7%) 5 ‹13,1%) 2 anos|-- 7 anos 07 (22,6%l 23 (60,5%) 7 anos H--15 anos 03 (9,7% ) 10 (26,4%) TOTAL 31 (100%) 38 (100%) . Tabela II: Distribuição de acordo com a idade no grupo controle e em pacientes internados. Os resultados dos testes de aglutinaçao em látex obtidos do grupo controle e internados estão relacionados na tabela III GRUPOS A ' INTERNADOS coNTRoLE RESULTADOS S. Pneumoniae + 05 (l6,l%) l5*(38,5%) H. Influenza + os ‹9,7 %) 1*‹ 2,5%) Negativo 23 (74,2%) 23 (59,0%) TOTAL A 31 39 Tabela III: Resultados dos testes do grupo controle e in- ternados. * Um paciente teve amostra positiva para ambos.1r1 DISCUSSÃO Conforme observamos na tabela I, a pneumonia incidiu mais em crianças do sexo masculino (74,2%), discordando da literatu- ra, mas não deve ser levado em consideração devido a baixa amos- tragem. A tabela II mostra que a faixa etária mais acometida foi a de 30 dias ã 2 anos (67,7%), concordando com a literatura. A necessidade de um método eficaz, barato e não invasivo para o diagnóstico etiológico das pneumonias têm, estimulado vã- rias pesquisas. O teste de aglutinação em lãtex tem despertado especial interesse por tratar-se de um método barato e não inva- sivo. Estudos para avaliar a sua eficácia tem sido relatados na literatura internacional; estes estudos tem demonstrado resulta- dos contraditórios. Passaremos a fazer uma breve revisão biblio- gráfica e compararemos com os nossos resultados. O teste de aglutinação consiste em misturar a amostra de urina do paciente, com partículas de.lãtex cobertas com anticor- pos específicos. Se existir antígeno na amostra (no caso antíge- nos capsulares do Streptococcus Pneumuniae e Haemophilus Influ- enzae) ocorrerá um nítida reação de aglutinação. Esses antígenos capsulares são produzidos no sítio de in- fecção e distribuídos por via sanguínia (antigenemia) nosA1 13 diversos líquidos corporais, entre eles, a urina (antigenüria). Segundo Cerosaletti e colaboradores, os antígenos capsulares (polissacarideos) pneumococicos e do Haemophilus Influenzae al- tamente resistentes ã degradação, e a sua mëtabolização ocorre ._ Q , ^ . vagarosamente, resultando em excreçao urinaria cronica dos po lissacarideos degradados, justificando a prolongada detecçao do antígeno apesar da terapia antibiõtica concomitante. 'Salientamos que na literatura pesquisada, os testes foram ... , / _ realizados com kits para a detecçao de antigenos no luquor, sen d0.que em alguns a urina foi concentrada. Em nosso trabalho, encontramos no grupo de pacientes in- ternados, 03 (9,7%) pacientes com amostras positivas para o Hae- mophilus Influenzae e l (2,5%) com amostra positiva no grupo de controle. Esses resultados concoradaram com os estudos de A.D. Fri- edman, B.W. Ramsey e colaboradores. O estudo de G.W Ajello tam- . \ bém demonstrou uma alta sensibilidade e especificidade ( :> 90%ä para o diagnóstico de peneumonia por Haemophilus Inflenzae a- través do teste de aglutinação em látex. O estudo de Ajello en- controu 3% de resultados falso positivos, concordando com nosso estudo. Entre os pacientes internados, 05 (l6,l%) apresentaram a- mostras positivas para o Pneumococo, este achado coincidiu com o estudo de B.W. Ramsey e colaboradores. Os estudos realizados por A.D. Friedman e G. W. Ajello não encontraram amostras posi- tivas em pacientes com pneumonia pneumococica comprovada. Nor '_ 14 entanto, estudos realizados por K.M Cerosaletti encontraram 63% de positividade entre pacientes com pneumonia pneumocõcica com- provada. Outro estudo realizado por S. Lenthe-Eboa e colaborado- res, analisando 2 kits diferentes, encontrou positividade em l4% e 19% dependendo do kit utilizado, em pacientes com pneumonia pneumocõcica com bacteremia e 0% nos pacientes sem bacteremia. Em nosso grupo controle, 15 (38,5%) apresentaram amostras posi- tivas para o pneumococo, resultado este muito superior ao encon- trado por outros autores. Os achados de G.W. Ajello e colaboradores; B.W. Ramsey e colaboradores; S. Lenthe-Eboa e colaboradores; K.M. Cerosaletti e colaboradores foram respectivamente 19%, 4%, 0% e 0%.r1 CONCLUSÃO Concluímos que: l - O teste de aglutinaçao em látex para a pesquisa do\ Streptococcus Pneumoniae na urina mostrou-se ineficaz devido a um alto número de amostras positivas em pacientes assintomáti- cos, superando inclusive, ao número de pacientes com pneumonia. 2 - O teste de aglutinação em látex para a pesquisa do Ha- emophilus Influenzae na urina parece ser confiável, haja visto, serem os nossos resultados encontrados concordantes com os da literatura. Sugerimos a náo solicitação deste exame como rotina para o isolamento do agente etiológico das pneumonias em vista* da alta positividade no grupo controle, reservando-o para aqueles pacientes com suspeita de infecção por Haemophilus Influenzae.v1 REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS 01. POZOW, T. In: Marcondes, Ped. Básica, Sarvier 1986, p.l.388 02. AJELLO, GW; BOLAN, G.A; HAYES, P.S; LEHEMAM, D; MONTGOMERY, J.; FEELEY, J.C.; PERLINO, C.A. e BROOME, C.V. :z Comer- cial Látex Agglutination Tests for Detection of Haemophi- lus Influenzae Type B and Streptococcus Pneumoniae Anti- gens in Patrents With Bacteremic Pneumonia, Journal of Clinical Microbiology 8: 1.388-1391, 1987. O3. LENTHE-Eloa, S,; BRIGHOUSE, G.; AUCKENTHALER, R.: LEW,_ D.; ZWAHLEN, A.: LAMBERT, P.A.; WALDVOGEL, F.A. 1- Comparison of Immunological Methods for Diagnosis of Pneumococcal Pneumonia in Biological Fluids, Eur. J. Clin. .Microbial l: 28-34, 1987. 04. CEROSALETTI, K.M.; ROGMANN, M.C.; BENTLEY, D.W. : Compar- son of latex Agglutination and' Conterimmunoelectrophore- sis for the Detection of Pneumococcal Antigen in Elder- ly Pneumonia Patientsm journal of Clinical Microbioly 4: 553-557, 1985. 05. RAMSEY, B.W.; MARCUSE, E.K.; FOY, H.M.; COONEY, M.K.; Al- lan, I.; BREWER, D.; SMITH, A.L. : Use of Bacterial Anti- gen Detection in the Diagnosis of Pediatric Lower Respi- ratory Tract Infections, Pediatrics 1: l-9, 1986.rr 17 06. FRIEDMAN, A.D. : Urine Latex Particle Agglutination, Pedia- trics 3: 470; 1988. 07. STERN, R.C. In Nelson, Tratado de Pediatria Interamericana, 1983. p. 1.143..' va..- TCC UFSC PE 0345 Ex.l - NCh2m TCC UFSC PE 0345 Autor Bo1ngJun1or,Ha1l Tltulo Teste de aglutmaçao em latex pa Exl UFSC BSCCSM

Comparson of latex Agglutination and' Conterimmunoelectrophoresis for the Detection of Pneumococcal Antigen

Urine Latex Particle Agglutination, Pediatrics 3: 470;

Use of Bacterial Antigen Detection in the Diagnosis of Pediatric Lower Respiratory Tract Infections, Pediatrics 1: l-9,

z Comercial Látex Agglutination Tests for Detection of Haemophilus Influenzae Type B and Streptococcus Pneumoniae Antigens in Patrents With Bacteremic Pneumonia,

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