Ten behoeve van de exportcertificering door de Veterinaire Dienst van met bloedmeel en vismeel gedenatureerde melkpoeder is een in Spanje voorgeschreven analysemethode voor bloedmeel getoetst op haar bruikbaarheid

Cazemier, G.

Elenbaas, H.L.

NARCIS 

Toetsing van een spaanse analysemethode voor bloedmeel in gedenatureerd melkpoeder

Wageningen Yield 

..... - ... " 
. ,..-
_ ... 
Afq. Vlees en Vleespr odukten 1983-02-03 
VERSLAG 83.9 Pr.nr. 303.0010 
Onderwerp: Toetsing van een Spaanse 
analysemethode voor bloedmeel 
in gedenatureerd melkpoeder. 
Ve~zendlijst; direkteur, direktie VKA, sektorhoofd (2x), afd. Vlees en 
Vleesprodukten (/+x), afd. Normal1.satie (Humme), 
Projektbeheer, Projektleider (?) 
.839 

Afdeling Vlees en Vleesprodukten 1983- 02- 03 
VERSLAG 83.9 Pr.nr. 303.0010 
Projekt: Dienstverlening diversen 
Onderwerp: Toetsing van een spaanse a nalysemethode voor bloedmeel in 
gedenatureerd melkpoeder 
Doel: 
Ten behoeve van de exportcertificering door de Veterinaire Dienst van 
met bloedmeel en vismeel gedenatureerde melkpoeder is een in Spanje 
voorgeschreven analysemethode voor bloedmeel getoetst op haar bruik-
baarheid. 
Samenvatting: 
De analysemethode, afkomstig van l1et Spaanse Ministerie van Financi~n, 
is vertaald en getoetst aan de hand van twee door de afd. Microscopie 
onderzochte monsters en twee zelf bereide monsters melkpoeder, gedena-
tureerd met bloedmeel . Verder is de specifieke absorptie van enkele 
bloedmelen die gebruikt worden voor de denaturatie van melkpoeders, 
bepaald. 
Conclusie: 
- Het is goed mogelijk om met de in spanje voorgeschreven analyse-
methode het gehalte aan bloedmeel in gedenatureerde melkpoeders te 
bepalen. Het gehalte is nauwkeurig te bepalen als ook over het dena-
turatiemiddel wordt beschikt. 
- De in de analysemethode gehanteerde gemiddelde referentiewaarde voor 
de specifieke absorptie van het denaturatie (bloedmeel) is ca . 20% 
lager dan de specifieke absorptie van de onderzochte, nederlandse 
bloedmelen die voor denaturatie worden gebruikt. 
- De spreiding in de gemeten ,.,aarde van de specifieke absorptie van 
bloedmeel komt bij ~~n monster waarschijnlijk door inhomogeniteit 
van het monster. De nauwkeurigheid van de bepaling is echter ook 
niet zo groot dat de E: waarde tot op 0, 1 kan ,.,orden opgegeven. 
Verantwoordelijk: drs H.L. Elenbaas 
Medewe rker/Samensteller: G. Cazemier 
Projektleide r: ? 
839.0 
Inleiding 
In Spanje ingevoerd melkpoeder, bestemd voor diervoeding, moet zijn 
gedenatureerd met een mengsel van bloedmeel en vismeel. (Van beide 
produkten moet volgens de Spaanse verordening minimaal 1% en maximaal 
1,5% in het eindprodukt aanwezig zijn). In verband met moeilijkheden 
die een nederlandse fabrikant ondervond bij de export van melkpoeder 
naar Spanje, werd het RIKILT door de Veterinaire Dienst benaderd met 
het verzoek enkele onder gekontroleerde omstandigheden gedenatureerde 
produkten m.b.v. de in Spanje gehanteerde methode te bepalen. De VD 
moet certificeren. Vanwege het urgente karakter van het onderzoek is 
de methode niet uitputtend getoetst. 
Methode 
Het principe van deze methode is het in water oplossen van het bloed-
meel waarna de haemgroep van het haemoglobine wordt afgesplitst met 
azijnzuur. De extinktie bij 396 nm is een maat voor het bloedgehalte. 
Om het gehalte aan bloedmeel in een monster nauwkeurig te kunnen bepa-
' I len is het nodig om de specifieke absorptie E1 te bepalen. Indien E1 
niet bekend is wordt een waarde van 52,4 aangehouden. 
Monstermateriaal 
Om enige ervaring met de methode op te doen werden van een standaard-
monster bloedmeel en van een standaardmengsel bloedmeel/vismeel (50/50) 
de specifieke extinkties E: bepaald. 
Het behulp van deze waarden werden van twee monsters de gehalten aan 
bloedmeel en bloedmeel/vismeelmengsel bepaald. Het gehalte aan bloed-
meel/vismeelmengsel was reeds door de afdeling Microscopie bepaald 
door sedimentatie van de in vismeel aanwezige graatjes. 
Tevens ~o1erden 2 mengsels melkpoeder gemaakt en bepaald, waaraan een 
bekende hoeveelheid bloedmeel/vismeelmengsel was toegevoegd . 
Van de V. D. werden in 1982 2 monsters gedenatureerde melkpoeder ont-
vangen met het in deze mons ters verwerkte bloedmeel. Deze werden op 
het RIKILT genummerd van 32702 t/m 32705. 
In 1983 ~o1erd nog een S-tal monsters bloedmeel ontvangen, genummerd 
11398 t/m 11402 . 
839.1 - 3 -
32702 was 
32703 '"as 
32704 was 
32705 '"as 
bloedmeel 
bloedmeel 
melkpoeder 
melkpoeder 
- 2 -
Sibbing Egberts 
Vreugdenbil 
Sibbing Egberts 
Vreugdenhil. 
11398 t/m 11402 waren in 1982 geproduceerde bloedmelen die voor dena-
toratie van melkpoeders waren gebruikt . 
Resultaten 
In tabel 1 zijn de resultaten verwerkt van de monsters afkomstig van 
de afdeling Microscopie. 
Uit deze resultaten blijkt, dat m.b.v. de spectrafotometrische methode 
het gehalte aan denaturatiemiddel goed is te bepalen. De resultaten 
komen ook goed overeen met de op de afdeling Microscopie gehanteerde 
sedimentatiemethode. 
I I De grote standaardafwijking van E 1 va n het mengsel (E 1 van het bloed-
meel was in simplo bepaald ) zou kunnen wijzen op een vrij grote on-
nau'"keurigheid in de bepaling of op inhomogeniteit van het mengsel. 
Om dit te kontroleren werden vanuit een stamoplossing van het vismeel/ 
bloedmeelmengsel diverse hoeveelheden gepipetteerd, waarin de 
E; waarden '"erden bepaald. 
De hi erbij gevonden waarden waren: 
35,19 - 34,48 - 33,81 - 34,82 - 34 ,30 
x = 34,5 s = 0,5 
Deze veel lagere standaardafwijking dan die, welke gevonden '"erd bij 
I de eerdere E1 bepaling, '"aarbij steeds opniem" van het mengsel werd 
ingewogen, wijst op inhomogeniteit van het mengsel. 
De standaardafwijking (s = 0,5) is echter nog vrij hoog . Dit komt door 
de onnauwkeurigheid van de spektrofotometer. Een verschil in aflezing 
van de a bsorptie van 0,001 resulteert in een verschil in de specifieke 
absorptie van 0,1. Dit verschil heeft echter nauwelijks invloed op de 
bepaling van de bloedmeelgehalten in melkpoeders. 
Tabel 2 bevat de resultaten van de bepalingen van de door de V.D. mee-
genomen monsters. De veel grotere standaardafwijking van 32702 dan die 
van 32703 wijst op inhomogeniteit van het eerste monster . 
839.2 - 3 -
- 3 -
De oorzaak hiervan is waarschijnlijk een slechtere oplosbaarheid van 
nr. 32702. 
Dezelfde tendens zet zich voort in de bepaling van het bloedmeelgehal-
te in de melkpoeders. Het grotere verschil in s tandaardafwijking zou 
er op kunnen wijzen dat het bloedmeel in nr. 32705 tevens niet homo-
geen verdeeld is. 
I Er zijn totaal zeven E 1 ~o~aarden bepaald die uiteenliepen van 60,7 tot 
71,6 (mediaan 67,7). De in spanjegebruikte specifieke absorptie van 
52,4 ligt beduidend lager (ca. 20%) dan de door ons gevonden waarden. 
Dit betekent een tolerantie van ca. 20% van het gehalte aan bloedmeel 
in de melkpoeders. 
Conclusies 
- Uit dit vrij beperkte onderzoek blijkt, dat, indien men beschikt 
over de specifieke absorptie van het als denaturatiemiddel gebruikte 
bloedmeel, het goed mogelijk is om door middel van de in Spanje 
voorgeschreven spektrafotometrische methode nauwkeurig het gehalte 
aan bloedmeel te bepalen. 
- Het nauwkeurig bepalen van de specifieke absorptie van de bloedmelen 
is erg moeilijk, door de sterke kleuring van de bloedmeeloplossing, 
waardoor de aflezing van de spektrofotometer niet voldoende nauw-
keurig is . 
- De in de methode voorgeschreven specifieke absorptie van 52,4, die 
moet worden gebruikt als geen standaard denaturatiemiddel aanwezig 
is, is voordelig in de gevallen ~o~aarin de juiste specifieke absorp-
1 tie E 1 hoger is dan 52,4 . Dit ~o~as het geval met alle tot dusver door 
ons onderzochte monsters bloedmeel. 
- Er werd een duidelijk verschil in homogeniteit gevonden tussen 2 
monsters bloedmeel. 
839.3 Ca/YL 
Tabel 1. Bepaling gehalte denaturatiemiddel in 2 oudere monsters melk-
poeder. 
I 
Bepaling E1 bloedmeel 71,6. 
Bepaling E1 mengsel 50/50 bloedmeel/vismeel 34,15 s = 1,35 (n 4). 
' 
Monster oud (opgegeven gehalte 2,2%) 
bloedmeelgehalte 1,2% 
gehalte mengsel 50/50 2,5% microscopisch 2,4%. 
Monster nieuw (opgegeven gehalte 3%) 
bloedmeelgehalte 0,85% 
gehalte mengsel 50/50 1,8% microscopisch 1,7%. 
Eigen mengsel 1 (bevat 4,7% mengsel 50/50) 
bepaald 4,6% 
Eigen mengsel 2 (bevat 0,8% mengsel 50/50) 
bepaald 1,0%. 
Tabel 2 . Bepaling gehalte bloedmeel van 2 monsters gedenatureerde 
melkpoeder 
I E 1 32702 = 68,2 s = 1,1 
E 1 32703 = 69 ,1 S = 0,6 
I 
(n = 4) 
(n 4) 
gehalte bloedmeel 32704 2,0% s = 0,3 
gehalte bloedmeel 32705 1,4% s = 0,1 
(n = 4) 
(n = 4) 
Door het gering aantal bepalingen zijn de berekeningen van de stan-
daardahlijkingen \olaarschijnlijk niet statistisch verantto1oord. 
Bepaling van de specifieke absorptie van 5 in 1982 voor denaturatie 
gebruikte bloedmelen: 
E' 
I 11398 60,7 
11399 64,9 
11400 67,5 
11401 67,9 
11402 66,9 
839.4 
Ministerie de Hacienda (Ministerie van Financi~n) . 
Beschikking van de 28ste oktober 1980 voor het vaststellen van krite-
ria voor de denaturatie van melk en wei , tariefpost nr. 04 .04.A. 2 . 
APPENDIX II 
11.1 Bepaling van het percentage van oplosbaar bloed aanwezig in een 
monster gedenatureerde melk- of weipoeder. 
11 . 2 Deze methode is gebaseerd op de verkrijging van de specifieke a b-
I 
sorptie E1 van de hemoglobine van het oplosbare bloed opgelost in een 
mengsel van ijsazijn-water bij 396 nm. 
Bepaal vervolgens de absorptie van het monster bij dezelfde golfleng-
te en onder vergelijkbare omstandigheden. Uit beide waarden laat zich 
het percentage oplosbaar bloed dat aanwezig is in het monster afleiden 
door toepassing van de desbetreffende formule . 
1!.3 
II.3.1 Spectrofotometer met toebehoren (cuvet voor vloeistoflaag van 
1 cm) 
II . 3 . 2 Magnetische roerder 
II . 3.3 Centrifuge 
II . 3.4 Maatkolf van 250 ml 
II.3.5 Maatkolf van 100 ml 
II.3.6 Pipet van 20 rol 
II . 3.7 Centrifugebuizen voor 10 rol vloeistof 
II.3 . 8 Trechter met filter. 
839.5 
11.4 
11.4.1 Mengsel van ijsazijn-water . Weeg 50 g ijsazijn en 50 g gedes-
tilleerd water af . Meng en homogeniseer. 
11 . 5 Bestaat uit twee onderdelen: 
11.5 . 1 Bepaling van de specifieke absorptie in het monster oplosbaar 
bloed 
Weeg, met een nauwkeurigheid van 1 mg, ca. 100 mg bloedmeel af en 
breng over in een bekerglas van 250 ml , voeg toe 150 ml gedestilleerd 
water en roer gedurende 5 min. Breng de oplossing over in een maatkolf 
van 250 ml en ~.,as het glas herhaalde malen met gedestilleerd ~o1ater. 
Vul aan tot precies 250 ml. Neem vervolgens 20 ml van deze oplossing, 
giet uit in een maatkolf van 100 ml en vul namo1keurig aan met het ijs-
azijnwatermengsel. Centrifugeer 10 ml van deze oplossing en meet de 
absorptie in een cuvet van 1 cm bij 396 nm, met als blanco de ijsazijn-
wateroplossing. 
E: = 12,5 x A 
p 
I E 1 =specifieke absorptie 
A = afgelezen absorptie 
P gewicht van het bloedmeel in g. 
Als de specifieke absorptie E: lager is dan 50 , mag het bloedmeel niet 
als denatureermiddel gebruikt worden. 
11.5.2 Bepaling van de absorptie van het monster melk of gedenatureer-
de ~o1ei 
Weeg nauwkeurig 10 g melk of weipoeder en breng over in een bekerglas 
van 250 ml, voeg toe 150 ml gedestilleerd water dat eerst verwarmd is 
tot 40-50°C en roer totdat zich een emulsie vormt; breng vervolgens 
deze emulsie over in een maatkolf van 250 ml, was het glas herhaalde 
malen met gedestilleerd water, koel en vul nauwkeurig aan tot 250 ml; 
neem 20 ml van de emulsie en giet uit in een maatkolf van 100 ml; vul 
nauwkeurig aan met het mengsel van ijsazijn en gedestilleerd water. 
839.6 
.. 
Indien de oplossing troebel is, centrifugeer (dan) 10 ml gedurende 15 
min bij 5700 omwentelingen; verwijder vervolgens met behulp van een 
spatel het bovendrijvende vlies, filtreer het centrifugaat en herhaal 
zonodig de bewerkingen zodat de oplossing tenslotte helder blijft . 
Meet vervolgens de absorptie in de cuvet van 1 cm bij 396 nm, met als 
blanco de azijn-wateroplossing. 
II.6 Het percentage aan oplosbaar bloed leidt men af door toepassing 
van de volgende formule 
s 
S percentage oplosbaar bloed aanwezig in het monster 
A = absorptie afgelezen in II.5 . 2 
P ge\dcht van de melk of het \.,eipoeder uitgedrukt in g 
E: =specifieke absorptie van het bloed bepaald in II.5.1. 
Indien men deze waarde niet heeft kunnen bepalen v66r de toevoeging 
van het bloedmeel aan de melk of de wei , wordt als gemiddelde referen-
tiewaarde E~ = 52,4 gebruikt . 
839 . 7 


http://library.wur.nl/WebQuery/wurpubs/fulltext/250667

Toetsing van een spaanse analysemethode voor bloedmeel in gedenatureerd melkpoeder

Abstract

Similar works

Full text

Available Versions

NARCIS

Wageningen Yield