Onderzoek naar de toepassing van seleniumsolen bij de ontwikkeling van een snelle test voor het aantonen van biologisch actieve verbindingen en milieucontaminanten op ppb-nivo

Abstract

Tussen Holland biotechnology bv (Hbt) en het RIKILT is overeengekomen een gemeenschappelijk onderzoek op te zetten naar de mogelijke toepassing van seleniumsolen in eenvoudige screeningstests voor de analyse van stoffen op het (sub)ppb-nivo. Een seleniumsol, gekoppeld aan antilichamen of eiwitconjugaten, wordt gebruikt als specifiek kleurlabel. Bij de tot nu toe uitgevoerde experimenten is nortestosteron (NT) als teststof gebruikt, omdat hiervoor voldoende antiserum en NT-eiwitconjugaten , alsmede monstermateriaal en analysemethoden beschikbaar zijn om een test op te zetten en te valideren. In eerste instantie werd gekozen voor het ontwikkelen van een striptest met nitrocellulose als drager. Uit de verrichtte experimenten bleek dat met een geringe hoeveelheid NT-eiwitconjugaat op de nitrocellulosestrip (overeenkomend met 0,3 ng NT) al een kleuring werd verkregen met antilichamen gelabeld met sol . Ook is een geringe hoeveelheid antistof op de strip (4,7 pmol IgG, dat theoretisch maximaal 2,6 ng NT kan binden) voldoende om een kleuring te geven met NT-eiwitconjugaat dat aan de sol gekoppeld is. Het laagste nivo toegevoegd vrij NT, waarbij tot nu toe een (visueel) kleurverschil werd waargenomen bedroeg 60 ng/ml. Vermoedelijk heeft het antilichaam een grotere aviditeit voor het NT-eiwitconjugaat dan voor het vrije NT, hetgeen de test nadelig beïnvloed. Door een ander NT-eiwitconjugaat of zelfs een conjugaat van een ander steroid te kiezen, kan mogelijk een veel gevoeligere test worden verkregen. De tot nu verkregen resultaten zijn hoopgevend en bieden voldoende perspectief om het samenwerkingsprojekt voor langere termijn te continueren