Díez, Carmen

Díez Monforte, Carmen

Repositorio Institucional de Asturias (RIA)

 urante los últimos 25 años los métodos para el control y la manipulación de la reproducción en los mamíferos han alcanzado un notable grado de desarrollo, fundamentalmente en el campo de las técnicas de reproducción in vitro y de la crioconservación.  La producción de embriones bovinos in vitro (embriones FIV) puede considerarse hoy en día como rutinaria. Sus aplicaciones son muy diversas, y no sólo desde el punto de vista de la investigación (clonaje, individuos transgénicos), sino que también permiten la obtención de descendencia a partir de vacas de alto valor genético que por una u otra razón son eliminadas de la reproducción. Obtención de los embriones  La técnica más usual es la de Ovum Pick-up (OPU) que permi-te, con o sin la ayuda de la eco-grafía, la punción de los ovarios en vacas vivas (a un ritmo de dos sesiones por semana, durante dos meses) y la recogida de una cantidad variable de ovocitos que posteriormente serán madurados, fecundados y puestos en cultivo en el laboratorio. Aquellos que tengan un desarrollo normal, podrán ser transferidos a hembras receptoras, o bien congelados para su conservación durante largos períodos de tiempo.  Asimismo, en el caso de hem-bras muy valiosas que por algún problema grave deban ser sacri-ficadas, se pueden recuperar los ovarios y puncionarlos para re-coger los ovocitos que contengan. Dichos ovocitos serán procesados de igual forma que en el caso de la OPU.  De todas las técnicas comentadas anteriormente, quizás sean los métodos de crioconservación, derivados de los estudios realizados a partir de embriones recuperados in vivo, los que aún no hayan sido satisfactoriamente desarrollados en el caso de los embriones FIV.  Numerosos equipos de investigación han demostrado que el embrión FIV es mucho más sensible a la congelación que el producido in vivo. Así, las tasas de gestación tras la transferencia a hembras receptoras de embriones in vivo congelados se acercan a las obtenidas con embriones frescos (60%), mientras que para el caso de los producidos in vitro no se supera el 20-30% de gestaciones.  El camino a seguir en el terre-no de la criobiología consiste en determinar el origen de las le-siones que se producen en el embrión FIV, así como poner a punto diferentes sistemas que, proporcionando una protección al embrión, nos permitan obte-ner una tasa de desarrollo nor-mal tras su congelación/descon-gelación.  Manejo y problemática de la crioconservación  Básicamente, la congela-ción/descongelación de embrio-nes consiste en la realización de cuatro etapas:  1.- Suspensión de los embrio-nes en una solución que contiene una sustancia denominada "crio-protector", cuya finalidad es pro-teger a los embriones de los efectos perjudiciales del frío. 2.- Congelación propiamente dicha, y almacenamiento en Ni-trógeno líquido. 3.- Descongelación de los embriones. 4.- Transferencia (directa o con retirada del crioprotector)  Numerosos equipos de investi-gadores centran actualmente sus estudios en este campo, con el fin de encontrar el origen de esta mayor sensibilidad a las bajas temperaturas de los embriones FIV, y poder mejorar los resulta-dos obtenidos hasta ahora.  Los primeros resultados obte-nidos apuntan hacia la existencia de importantes diferencias entre ambos tipos de embriones:  a) diferencias estructurales: los embriones FIV parecen tener menor densidad que los obteni-dos in vivo, posiblemente debido a su mayor contenido en lípidos. No obstante, no se conoce el mecanismo exacto por el que este hecho podría explicar una mayor sensibilidad al enfriamiento de los embriones FIV.  b) diferencias en el metabolis-mo: los embriones FIV podrían desarrollar diferentes rutas meta-bólicas. que explicarían también el diferente contenido en lípidos.  Aunque el contenido en lípidos parece afectar la sensibilidad al frío y alterar la supervivencia embrionaria durante la congela-ción, existen otros factores como la velocidad de enfriamiento, la edad y el estadio de desarrollo de los embriones, características celulares (permeabilidad celular, propiedades osmóticas) y la uti-lización de diferentes crioprotec tores, que también tienen un efecto importante sobre la con-gelabilidad de los embriones.  Trabajos en el CIATA  Las vías actualmente orienta-das al estudio de este problema, y en estos momentos en fase de experimentación en el Laborato-rio de FIV del CENSYRA de So-mió (CIATA), son:  - caracterización metabólica de los embriones FIV. - optimización de la calidad de los blastocistos producidos, lo que se traduciría en una mayor supervivencia tras los procesos de congelación/descongelación. - estudio de fenómenos osmó-ticos y desarrollo de un sistema de congelación empleando el crioprotector más adecuado a las características del embrión.  Todos estos estudios van diri-gidos a la mejora de las tasas de supervivencia de los embriones obtenidos por técnicas in vitro, y a una optimización de los resul-tados conseguidos actualmente en el laboratorio.  A efectos prácticos, ello su-pondría el incremento del po-tencial reproductivo de hembras de elevado valor; permitiría la obtención de crías de vacas "problema" (por ejemplo, con mala o nula respuesta a los tra-tamientos superovulatorios), y finalmente nos posibilitaría la conservación a largo plazo de los embriones obtenidos, lo que supondría un importante instru-mento de mejora genética, de potenciación de razas autóctonas y de conservación de aquellas que puedan encontrarse en peligro de desaparición.  Colaboración técnica: Carmen DÍEZ MONFORTE D La congelación de embriones bovinos  Reproducción Animal                                               Tecnología Agroalimentaria. CIATA. Edición especial 1998  80 

La congelación de embriones bovinos

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