筑波大学University of Tsukuba博士（医学）Doctor of Philosophy in Medical Sciences1984【要旨】thesi

49975

Homma, Yoshimi

Tsukuba Repository  (Tulips-R)

Macrophage activation and lipid metabolism著者 Homma Yoshimi内容記述 Thesis--University of Tsukuba, D.M.S.(A), no.261, 1984. 9. 30Includes supplementary treatises発行年 1984URL http://hdl.handle.net/2241/1411【21民　名（本　　籍）学位　の　種類学位記番号学位授与年月B学位授与の要件審査研究　科ほん　　　　ま　　　　　　　　　　よしみ本聞　　好（福島県）医　　学　　博　　士博　甲　第261号昭和59年9月30日学位規則第5条第1項該当医学研究科　生物系専攻学位論文題目　晩c岬陶8Ac細鮎a耐岬d晩勧◎l1鰍　　　　　　　　　　（アクロファージ活憧化と鰭質代謝）主　査　　筑波大学教授副　査　　筑波大学教授副　査　　筑波大学教授副査筑波大学教授副査　筑波大学助教授医学博士　　田　　村　　　　　昇医学博士　　杉　　田　　良　　樹医学博士東　　恵彦医学博士　　眞　　崎　　知　　生医学博士　　柏　　木　　　平八郎論　　文　　の　　要　　旨　マクロファージは種々の外来刺激により活性化されてその機能を果たすようになるが，その瀞性化反応は，非常に速い反応（速反応）とゆっくりと進行する反応（遅反応）に大別される。著者は，この二つの活性化反応の機序の違いを明らかにすることを目的として，刺激応答としての細胞膜リン脂質及びアラキドン酸代謝の変化について検討した。細胞としてはモルモット腹腔湊出マクロファージを，速反応と遅反応を誘導する活性化物質としては走化性ペプチド（fomy互臓ethio町1－1euc汁pheny1a1狐1ne，fMLPと略す）とマクロファージ活性化因子（使用した因子は同時に遊走阻止活性をも示すことからM王F／MAFと表示）をそれぞれ，用いた。　はじめにfMLP刺激によるリン脂質代謝変化を明らかにした。リン脂質はリン酸，グリセロール及び脂肪酸を構成成分とするので，これらの放射性同位体を用いたトレーサー実験により変化を解析した。脳LPによる刺激では，刺激後1分以内にイノシトノールリン脂質の急激な分解とジァシルグリセロール（DG）及びホスファチジン酸（PA）の一過性蓄積が生じた。これらの事実は，重MLPによりホスファチジルイノシトール（P工）レスポンスが誘導されたことを示唆する。すなわち，重MLP受容体が刺激されることによりイノシトールリン脂質特異的ホスホリパーゼCが活性化され，イノシトールリン脂質のDGへの急激な分解が起き，さらに生成したDGがPAを経てPIへ再合成されるというP夏を中心とした代謝回転が充進すると考えられる。また，これに伴ってアラキドン酸の動態変化も生じた。刺激後5分以内にPI分画のアラキドン酸が滅少し，DG，PA及び遊離脂一3一肪酸（FFA）分画で増加した。すなわち，アラキドン酸はPIレスポンスに伴ってPI→DG→PAと移動し，PAからホスホリパーゼA2により遊離されると推定できる。　MIF／MAFによるリン脂質代謝についても同様に調べた。MlIF／MAFによる刺激では，fMLpによる場合のような速い変化はみとめられなかったものの，刺激後3時聞以降でホスファチジルェタノールァミン（PE），ホスファチジルコリン（PC），PI，PAなどのdenovo合成促進がみとめられた。また，PE，PCの分解は検出できなかったが，アラキドン酸の動態変化も生じ，刺激後ユ時聞から12時間以上にわたってPE，PC分画のアラキドン酸の減少とFFA分画及び代謝産物の増加がみとめられた。MIF／MAFによる刺激ではホスホリパーゼA2が活性化され，主にPE，PCよりアラキドン酸が遊離すると推定できる。　以上，2つの刺激物質によって生じるリン脂質脂肪代謝の変化はそれぞれの場合で異なることが示され，マクロファージには，その機能と密接に関連する少なくとも2方向の反応性が存在することが明らかになった。　つぎに，あらかじめ放射性アラキドン酸をとり込ませた細胞を用いて刺激に伴うアラキドン酸代謝変化を解析した。fMLPでは刺激後5分でアラキドン酸代謝産物の放出が有意に促進され10分以降でプラトーに達した。これに対し，MIF／MAFではfMlLPの場合と全く異なり，1時聞から6時聞以上にわたって有意に充進していた。そこでfMLP刺激15分及びMIF／MAF刺激6時問の培養上清中に放出されたアラキドン酸代謝産物を高速液体クロマトグラフィーにより分離し，各産物の生成量を解析した。アラキドン酸は細胞膜リン脂質から遊離した後，リポキシゲナーゼによりロイコトリェン（LT）やとドロキシアラキドン酸（HETE）に，またシクロオキシゲナーゼによりプロスタグランジン（PG）やトロンボキサン（TX）に代謝される。そこで，まずポキシゲナーゼ系の代謝産物について解析すると，fMLPの場合LTB垂，LTC4，LTD4などのLT類の産生が促進された。これに対して，M工F／MAFの場合では肥TEの増加は顕著であったが，LTの産生促進は6時間までのどの時聞でもみとめられなかった。一方，シクロオキシゲナーゼ系の代謝産物では，両者でPGE2，PGF2、，TXB2の生産促進がみとめられた。すなわち，アラキドン酸代謝においてもfMLPによる速反応とMIF／MAFによる遅反応が区別できることが明らかにされた。審　　査　　の　　要　　旨　外来刺激に対して生じるマクロファージの活性化反応は，遠反応と遅反応の二つの大別される。本論文は，この二つの活一性化反応の機序の違いを明らかにすることを最終目的として，外来刺激がマクロファージのリン脂質やアラキドン酸の代謝にどのような変化を与えるかを調べたものである。その結果として，この二つの活性化反応では，リン脂質の代謝もアラキドン酸の代謝も明らかに異なることが示された。この代謝変化の違いが，この両浄性化反応の機序の違いに直接緒びつくか否．かは，この研究段階ではまだ不明であるが，マクロファージの関与する生体反応の場でメディエー一4一ターとして働くことが確実視されているアラキドン酸の代謝産物の生成過程を明らかにし得たことは，高く評価される。　よって，著者は医学博士の学位を受けることに十分な資格を有するものとみとめる。一5一

Macrophage activation and lipid metabolism

Abstract

Similar works

Full text

Available Versions

Tsukuba Repository (Tulips-R)