名古屋大学Nagoya University博士(医学)doctoral thesi

87271

88055

Asano, Marina

浅野, 麻里奈

English

Nagoya Repository

 主論文の要旨    Differences in peritoneal solute transport rates in peritoneal dialysis  腹膜透析における腹膜透過性の検討              名古屋大学大学院医学系研究科 総合医学専攻 病態内科学講座 腎臓内科学分野 （指導：丸山 彰一 教授） 浅野 麻里奈  【緒言】 腹膜透析は腹膜を利用する透析法であり、腹膜透過性をみる試験として腹膜平衡試験（PET）が広く用いられている。通常、クレアチニン（Cr）の dialysate-to-plasma concentration ratio (D/P) で評価されているが、他の小分子物質における透過性は検討されていない。長期の腹膜透析では腹膜透過性が高くなり、その生命予後も悪化することが報告されているが、腹膜透過性の詳細は不明な点が多いため、本研究を行った。  【方法】  分析 A：名古屋大学医学部附属病院にて PET を施行した 57 例の PD 患者のうち、腹膜透析導入から 6 か月未満の患者を除いた 50 例の PET を施行した際に採取した排液と血液を使用し、分子量と透過性の関係を検討した。 urea (MW: 56),  phosphate (MW:98), β2-microgloblin (MW:11,800), albumin (MW:69,000), transferrin (MW:80,000), immunoglobulin (Ig)G (MW:150,000), α2-macroglobulin (MW: 820,000)の D/P 比を測定し、D/P Cr と比較した(Table 1, Analysis A)。 分析 B：分析 A に使用したサンプルのうち 19 例をランダムに選び、メタボローム解析を行った(Table 1, Analysis B)。Capillary electrophoresis time-of-flight mass spectrometry（CE-TOFMS）を使用し、質量電荷比 60-800m/z の小分子の D/P を測定し、D/P Cr と比較検討した。 電荷の測定：分析 B で測定した分子に関し、ACD/Lab pKa DB (ACD/pKa DB, version 7.07, Advanced Chemistry Development, Toronto, Canada) を使用して、pH7.4 での電荷を算出した。 蛋白結合率の測定：Liquid chromatography/mass spectrometry (LC/MS/MS)を使用し、allantoin, 4-methyl-2-oxopentanoate,2-hydroxybutyrate, ornithine, hippurate, indoxyl sulfateの蛋白結合率を平衡透析法にて測定した。 残腎機能と血中濃度の関係の分析：メタボローム解析した 19 例を High renal Kt/V group (残存腎機能による週当たり尿素除去量が 0.3 以上の群)と Low renal Kt/V group (残存腎機能による週当たり尿素除去量が 0.3 未満の群) に分け(Table 4)、蛋白結合率を測定した分子の血中濃度を比較した。  【結果】 分析 A：各分子の D/P の中央値を Fig. 1 に示す。それぞれの分子の D/P と D/P Cr をグラフにプロットした (Fig. 2)。 分析 B：574 の測定代謝物のうち全ての患者で検出可能な代謝物は 66 であった。このうち、血清濃度が 30μM 以上の 38 の代謝物の測定値から、それぞれの D/P の中間値を計算した(Table 2)。さらに、各分子の D/P と D/P Cr をグラフにプロットした結果をFig.3 に示す。 電荷：測定した結果を Table3 に示す。 蛋白結合率：回帰係数が 0.3 以下の分子(Groups B・C, Fig. 3)のうち、histidine, lactate- 1 -を除く 6 分子の蛋白結合率を測定した。 allantoin, 4-methyl-2-oxopentanoate,2-hydroxybutyrate, ornithine, hippurate, indoxyl sulfate の蛋白結合率はそれぞれ、4.4±3.7%, 10.4±6.4%, 14.5±6.9%, 7.9±3.0%, 28.3±2.1%, 57.1±0.5%であった。 残腎機能と血中濃度の関係の分析：High renal Kt/V group と Low renal Kt/V group における 6 分子の血中濃度を Fig.4 に示す。Hippurate と 3-indoxyl sulfate は、Low Kt/V group において有意に血中濃度が高かった(p < 0.001)。  【考察】 分析 A で検討を行った多くの物質で、小分子、中分子、大分子の順で腹膜の透過性が高かったが、大分子の中で、albumin は、transferrin より分子量が大きいにもかかわらず、透過性が低かった。Albumin は transferrin に比べ、より強い陰性荷電を有しており、そのことが透過性の低さに関与していると報告されている。一般に腹膜の電荷は陰性電荷とされているため、陰性荷電の分子は透過性が低くなると考えられている。同様の理由で、Cr より分子量の小さい phosphate が Cr より透過性が低いと考えられる。さらに、phosphate の 15–20% が蛋白と結合しており、5%が他のイオンとの複合体であることも、透過性が低い要因とされている。 分析 B において、Citrulline と choline は高い腹膜透過性を示した(Table 2)。多くのアミノ酸は血液透析患者において血中濃度が低下しているが、citrulline と choline は上昇していると報告されている。腹膜透析患者においても、透過性は高いが欠乏はみられず、腎機能正常者より血中濃度は上昇していた。 Fig.3 において、ほとんどの分子の D/P が D/P Cr と正の傾きを示したが、負の傾きを示した分子も認めた(Group C)。Group C のうち、histidine, lactate は、PD 液に含まれるため逆移送が起こったものと考えられる。 電荷を測定した 38 分子のうち、Cr より透過性が高く、PD 液に含まれない urea, citrulline,choline (Table 2) は電荷が陽性、あるいは 0 に近かった(Table 3)。一方、陰性電荷をもつ hippurate, urate, citrate, glucuronate は、腹膜透過性が比較的低かった(Table 2)。しかし、より陰性荷電が強いものでも透過性が比較的高い分子もあり、腹膜透過性には電荷以外の要因も関与していると考えられた。 hippurate, 3-indoxyl sulfate, L-ornithine は腹膜透過性が比較的低く、それらの D/P はD/P Cr と相関しなかった (Fig. 3, GroupB)。そのうち、hippurate と indoxyl sulfate は、蛋白結合率が比較的高かった。さらにこれらは、Low Kt/V group において有意に血中濃度が高く、尿毒症性物質とされていることから、透析患者の予後に影響を与える可能性が示唆された。 我々の研究で、分子量、電荷、蛋白結合率が腹膜透過性に影響を及ぼすことがわかったが、オルニチンの腹膜透過性が低い要因は明らかでなく、他の要因も存在することが示唆された。  【結語】 - 2 -解析を行った分子の中には、その腹膜透過性が D/P Cr と一致しないものも存在した。腹膜透過性には、分子の大きさ以外に電荷や蛋白結合率を含めた多因子が影響すると考えられた。メタボローム解析は、腹膜透析患者において蓄積する小分子尿毒素の分析や個々の分子の腹膜透過性の分析に有用であると考えられた。  - 3 -

Differences in peritoneal solute transport rates in peritoneal dialysis

https://nagoya.repo.nii.ac.jp/record/26552/files/k12522_abstract.pdf

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