Biochemistry is an important and necessary subject in professional training in some undergraduate courses, but it is difficult to assimilate and can generate repulsion due to the lack of prior knowledge of Chemistry in elementary school. For this reason, a high level of dedication is required from educators for methodological and pedagogical practices that arouse curiosity and interest in students and improve the teaching process. In order to identify the limitations of this process, this study investigated the main subjects that generate difficulties in teaching and learning Biochemistry and collected videos published on YouTube on the different topics of Biochemistry. The greatest difficulty pointed out were “assimilation” (56.8%), “learning” (32.4%) and “density of the course program” (31.1%). Furthermore, “class notes” (71.6%) and “textbooks” (66.2%) are the materials that students most often use to study. Furthermore, the citric acid cycle (55.4%), electron transport chain (52.7%), bioenergetics (45.9%) and lipids (45.9%) are the topics that generate the most difficulty in understanding. On YouTube, explanatory videos in different languages were raised for all the content indicated in the survey. Thus, it was possible to identify limitations in the teaching and learning of Biochemistry, such as the deficiency acquired at the basic level in organic chemistry, the lack of laboratory structure that makes micro visualization difficult, making videos a facilitator in the classroom. However, the use of videos depends on the student's concentration on the digital medium, access to the Internet, equipment and teaching planning, and does not replace teacher clarifications.A Bioquímica é um conteúdo importante e necessário na formação profissional em alguns cursos de graduação, mas é de difícil assimilação, podendo gerar repulsa pela carência conhecimentos prévios de Química na escola básica. Por essa razão, um elevado nível de dedicação é exigido do educador para práticas metodológicas e pedagógicas que despertem curiosidade e interesse do estudante e melhore o processo de ensino. Na intenção de identificar as limitações desse processo, esse trabalho sondou os principais assuntos que geram dificuldade no ensinar e aprender Bioquímica e levantou no YouTube os vídeos publicados nos diferentes temas que abordam a Bioquímica. As maiores dificuldades apontadas foram a “assimilação” (56,8%), o “aprendizado” (32,4%) e “densidade da ementa” (31,1%). Ainda, as “anotações das aulas” (71,6%) e “livros didáticos” (66,2%) são os materiais que os estudantes mais recorrem para estudar. Além disso, o ciclo do ácido cítrico (55,4%), cadeia transportadora de elétrons (52,7%), bioenergética (45,9%) e lipídeos (45,9%) são os temas que mais geram dificuldade de entendimento. Já no YouTube, vídeos explicativos em diferentes línguas foram levantados para todos os conteúdos apontados na sondagem. Assim, foi possível identificar limitações no ensino e no aprendizado da Bioquímica, como a deficiência adquirida no nível básico em química orgânica, a falta de estrutura laboratorial que dificulta a visualização micro, tornando os vídeos um facilitador em sala de aula. Contudo, o uso do vídeo é dependente da concentração do educando no meio digital, do acesso à internet, de equipamentos e planejamento docente, não substituindo os esclarecimentos docentes