Padronização da coleta do condensado do exalado respiratório utilizando coletor específico para equinos : Standardization of respiratory condensate collection using a specific collector for horses

Abstract

The lack of standardization in exhaled breath condensate (EBC) collection techniques complicates the comparison of studies due to variations in cooling methods, collection temperatures, and inadequate reporting on nasal cleaning and equipment preparation. This study evaluated the effects of collection temperature on sample volume and the influence of nasal cleaning techniques on sample contamination, using two EBC collectors specifically developed for equines by the authors. Fifteen mixed-breed mares were used to test two cooling methods — solutions 1 (ice) and 2 (ice with salt) — and three nasal cleaning techniques — groups WS (water and soap), NaCl (physiological saline), and G (dry gauze). EBC samples were stored in Stuart transport medium and plated on blood agar and MacConkey agar for bacterial analysis. The average collection temperatures between cooling methods showed no significant differences (p = 0.999). There was no correlation between collection temperature and sample volume for ice without salt (p = 0.276), ice with salt (p = 0.622), or the new collector (p = 0.715). However, ambient temperature and sample volume showed a moderate negative correlation with ice cooling (p = 0.005, r = -0.680) and a strong negative correlation with the new collector (p = 0.013, r = -0.860). In terms of bacterial contamination, all groups exhibited higher numbers of Gram-positive colonies compared to Gram-negative colonies: group G had 4.013 ± 1.073 vs. 1.713 ± 1.349 bacteria (p = 0.001); group NaCl had 4.107 ± 1.216 vs. 2.217 ± 1.701 bacteria (p = 0.006); and group WS had 3.850 ± 1.454 vs. 2.168 ± 1.574 bacteria (p = 0.019). There were no statistical differences between nasal cleaning methods for Gram-positive bacteria (p = 0.990) or Gram-negative bacteria (p = 0.920). In conclusion, given the lack of significant differences among cooling methods, nasal cleaning techniques, and collectors, the use of ice cooling, dry gauze cleaning, and the new collector is recommended for future studies.A falta de padronização da técnica de coleta do condensado do exalado respiratório (CER) dificulta a comparação entre estudos devido às variações no resfria-mento, temperaturas de coleta e falta de informações sobre a limpeza nasal e o equipamento. Este estudo avaliou o efeito da temperatura no interior do coletor quanto ao volume de amostra e à técnica de limpeza das narinas e sua influência sobre a contaminação das amostras, utilizando dois coletores de CER específicos para equinos desenvolvidos pelos autores. Foram utilizadas 15 éguas sem raça definida, testando-se dois meios de resfriamento — soluções 1 (gelo) e 2 (gelo com sal) — e três formas de limpeza de narina — grupos AS (água e sabão), NaCl (soro fisiológico) e G (gaze seca) — para determinar a melhor técnica de coleta de CER. As amostras foram acondicionadas em meio Stuart e plaqueadas em ágar sangue e MacConkey. A temperatura média da coleta entre os meios não diferiu (p = 0,999), assim como não houve correlação com o volume de amostras sem sal (p = 0,276), com sal (p = 0,622) e no novo coletor (p = 0715). A temperatura ambiente e o volume de amostras com gelo apresentaram correlação negativa moderada (p = 0,005 e r = -0,680), enquanto no novo coletor houve correlação negativa forte (p= 0,013 e r = -0,860). Quanto às bactérias, observou-se maior número de colônias Gram positivas do que negativas em todos os grupos, sendo: grupo G: 4,013 ± 1,073 vs. 1,713 ± 1,349 bactérias (p = 0,001); grupo NaCl: 4,107 ± 1,216 vs. 2,217 ± 1,701 bactérias (p = 0,006); e grupo AS: 3,850 ± 1,454 vs. 2,168 ± 1,574 bactérias (p = 0,019). Não houve diferença na quantidade de bactérias entre os métodos de limpeza tanto para Gram negativas (p = 0,920) quanto para positivas (p = 0,990). Conclui-se que, diante à ausência de diferenças entre os métodos de resfriamento, limpe-za nasal e coletores, foram eleitos o resfriamento com gelo, limpeza com gaze seca e o novo coletor para utilização em estudos futuros