Avaliação da relação entre peso e número de larvas esterilizadas de Chrysomya megacephala (Fabricius: 1794) (Diptera: Calliphoridae): subsídios à Terapia Larval / Evaluation of the relationship between weight and number of sterilized larvae of Chrysomya megacephala (Fabricius: 1794) (Diptera: Calliphoridae): subsidies to Larval Therapy

Abstract

Terapia Larval é uma bioterapia que utiliza larvas de moscas necrobiontófogas previamente esterilizadas para desbridar feridas necrosadas. Há um gradual aumento de aceitabilidade desta terapia, principalmente nos casos de feridas crônicas, como pé diabético, que cursa com o risco de amputação. O objetivo do estudo foi avaliar o peso médio de trinta larvas de segundo ínstar (L2) de Chrysomya megacephala, após esterilização pelo Glutaraldeído. As etapas de esterilização dos ovos ocorreram a partir da obtenção de duas massas de ovos de 0,15 g imersas em solução salina estéril (5 mL) e dissociadas com pincel No. 0. Foram submetidas ao processo de esterilização por 15 minutos em Glutaraldeído (Glutacin 28®), ativada com Solução de Bicarbonato de Sódio a 12 %, atingindo pH 8,3-8,5. Após filtração, o material foi rinsado com 30 mL de Caldo Soja Tripticaseína (TSB), em Cabine de Segurança Biológica Classe I. As massas de ovos foram postas em placas de Ágar Sangue e após 72 horas, já em L2, transferidas para um bécher e lavadas com água destilada. Trinta larvas L2 foram transferidas individualmente para uma Coluna Spin (750 µL) com Tubo de Coleta (2 mL) para extração/purificação de DNA (Norgen®), contendo água destilada. Com o auxílio de uma microcentrífuga, o excesso de água destilada foi removido da coluna para avaliação do peso das larvas, realizada em balança analítica em dez repetições. A temperatura média registrada durante os três dias de experimento foi de 27 ºC (dia) e 20 ºC (noite). A média do peso para 30 L2 de C. megacephala foi de 0,129 g, com peso mínimo de 0,09 g e o peso máximo de 0,18 g. Para o biodesbridamento do tecido necrosado, é necessária a aplicação de cinco a dez larvas por cm² da ferida. Desta forma, ao conhecer o peso médio referente a 30 L2, é possível calcular a quantidade de larvas a serem usadas em qualquer ferida necrótica.