Resumo
A drepanocitose é uma doença hereditária monogénica, causada pela mutação c.20A>T no gene HBB, caracterizada por eritrócitos falciformes, anemia hemolítica crónica e elevada morbilidade e mortalidade, sobretudo no continente africano onde tem elevada prevalência.
A malária humana é causada pelo parasita do género Plasmodium e é considerada um problema de saúde pública, nomeadamente na região da África Subsariana e, tal como a drepanocitose, encontra-se associada a uma elevada taxa de morbilidade e mortalidade infantil.
O objetivo principal deste estudo foi investigar a relação entre a variabilidade fenotípica da drepanocitose e da malária e a variabilidade genética dos genes CD36, ICAM-1 e HBA, numa população sujeita a ambas as patologias.
O estudo incidiu sobre 65 crianças com drepanocitose residentes em Angola. Genotiparam-se cinco regiões polimórficas no gene CD36, seis no gene ICAM-1 e uma em HBA, recorrendo a técnicas moleculares de PCR, Gap-PCR, sequenciação de Sanger e análise de fragmentos.
Os resultados revelaram uma elevada prevalência da deleção α-talassémica de 3,7kb (73%) na população drepanocítica estudada. A deleção talassémica revelou-se benéfica para os doentes no que toca à gravidade da anemia hemolítica.
Os estudos de associação demonstraram que o alelo_C do SNP rs3211891 T>C, no gene CD36, se encontra associado negativamente à concentração média de hemoglobina (p=0,013) pois os doentes com genótipos contendo o alelo_C nesse SNP apresentaram uma concentração significativamente mais baixa de hemoglobina que os restantes, portanto um maior grau de anemia.
No gene ICAM-1, os genótipos com o alelo_T no SNP rs5491 A>T demonstraram estar associados a um número de eritrócitos significativamente mais baixo (p=0,044) e a níveis de LDH superiores (p=0,020), que os genótipos wild-type. Concluímos assim que se encontra associado a um agravamento da anemia e da taxa de hemólise. Ainda em ICAM-1, os genótipos com o alelo_A no SNP rs5496 G>A revelaram uma associação com uma concentração de hemoglobina (p=0,009) e número de eritrócitos (p=0,036) superior, bem como com uma percentagem de reticulócitos (p=0,044) inferior aos demais, concluindo-se que melhora os fenótipos da drepanocitose, nomeadamente a anemia e a taxa de hemólise. Em sentido contrário, os genótipos contendo o alelo_G no SNP rs5498 A>G revelaram associação com uma elevada percentagem de reticulócitos (p=0,015).
Em relação à malária, os doentes drepanocíticos com genótipos que contêm o alelo_G no SNP rs5494 C>T revelaram ter uma probabilidade 5,63 vezes maior de apresentarem malária em comparação com aqueles que têm os genótipos wild-type, na população estudada, OR=5,63, IC95% de 1,07-29,73, p=0,028.
Este estudo permitiu desvendar o papel modulador de algumas variantes genéticas em relação aos fenótipos da drepanocitose e da malária.Abstract
Sickle cell anemia is a hereditary disease caused by c.20A>T mutation in the HBB gene. It is characterized by sickle-shaped erythrocytes, chronic hemolytic anemia, and high morbidity and mortality rates. The disease is particularly prevalent in the African continent.
Human malaria, caused by the Plasmodium parasite, is a public health issue, especially in sub-Saharan Africa. Like sickle cell disease, malaria is associated with high morbidity and infant mortality rates.
The aim of this study was to investigate the relationship between the phenotypic variability of sickle cell disease and malaria and the genetic variability of CD36, ICAM-1, and HBA genes in a population subject to both pathologies.
The study included 65 children with sickle cell disease living in Angola. Five polymorphic regions were genotyped in the CD36 gene, six in the ICAM-1 gene, and one in HBA using molecular techniques like PCR, Gap-PCR, Sanger sequencing, and fragment analysis.
The results showed a high prevalence of α-thalassemia deletion of 3.7kb (73%) in the studied population. The thalassemia deletion was shown to be beneficial for patients concerning the severity of hemolytic anemia.
The association studies revealed that the C allele of the rs3211891 T>C SNP in the CD36 gene is negatively associated with mean hemoglobin concentration (p=0.013). Patients with genotypes containing the allele C in that SNP had a significantly lower hemoglobin concentration than the others, indicating a higher degree of anemia.
In the ICAM-1 gene, genotypes with the allele T in the rs5491 A>T SNP were associated with a significantly lower number of erythrocytes (p=0.044) and higher LDH levels (p=0.020) than wild-type genotypes. This suggests that it worsens anemia and hemolysis rates. Conversely, genotypes containing the allele A in the rs5496 G>A SNP were associated with a higher hemoglobin concentration (p=0.009) and erythrocyte count (p=0.036), as well as a percentage of reticulocytes (p=0.044) lower than others, indicating an improvement in the phenotypes of sickle cell anemia, namely in anemia level and hemolysis rate. On the other hand, genotypes containing the allele G in the rs5498 A>G SNP were associated with a high percentage of reticulocytes (p=0.015).
Regarding malaria, sickle cell anemia patients with genotypes containing the allele G in the rs5494 C>T SNP showed a 5.63-fold higher risk of malaria compared to those with wild-type genotypes (OR=5.63, 95%CI 1.07-29.73, p=0.028).
Overall, this study sheds light on the role of some genetic variants in modulating sickle cell disease and malaria phenotypes
