人体的免疫监视机构包括细胞免疫、体液免疫和补体系统。对肿瘤的免疫反应,以细胞免疫为主。但近几年对体液免疫(包括补体)也日益重视,研究细胞免疫与体液免疫的相互关系,对于进一步深入了解肿瘤发生发展的免疫机制有着重要的意义。 由抗体介导的细胞溶解需要补体的参与,这提示血清总补体的改变与肿瘤的发病有一定关系。近年有不少关于肿瘤病人血清补体研究的报道,但有些结果互相矛盾

简志瀚

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中 山 医 学 院 学 报期第年第 1卷1 9 8 0 A C T A A C A D E M I A E M E D IC IN A E Z H O N G S H A NV o l.1,N o.1 9 8 0鼻咽癌病人的血清补体与栩胞免疫功能肿瘤研究所病理免疫室 筒志瀚 潘丽珍 梁淑萍谷人体的免疫监视机构包括细胞免疫、体液免疫和补体系统。对肿瘤的免疫反应,以细胞免疫为主。但近几年对体液免疫 (包括补体 ) 也 日益重视,研究细胞免疫与体液免疫的相互关系,对于进一步深入了解肿瘤发生发展的免疫机制有着重要的意义。由抗体介导的细胞溶解需要补体的参与,这提示血清总补体的改变与肿瘤的发病有一定关系。近年有不少关于肿瘤病人血清补体研究的报道,但有些结果互相矛盾,而且大部分限于网状内皮和淋巴系统肿瘤①,对鼻咽癌的研究极少⑧。据此,我们对鼻 咽癌病人血清总补体 ( C HS 。) 及其与细胞免疫的相互关系,进行了初步的探讨。现将 试 验方法及结果报告如下:材 料 及 方 法一、检侧对象( 一 ) 初诊未经抗癌治疗的鼻咽瘤确诊病人 3 4例。病理活检大多数属低分化型 (鳞癌 l 级 )。(二 ) 鼻 咽癌以外的肿瘤住院病 人 12 例 (其中淋巴肉瘤 3 例,何杰金氏病 1例,喉癌 l 例,宫颈癌 1例,甲状腺癌 2 例,肝癌 1 例,乳腺密 1 例,食管癌 l 例,盆腔肿瘤1 例 )。(三 ) 随机抽取血库献血员35 例作正常对照组。其中男性 23 例,女 性 12 例。年龄2 1一 5 0岁。血型 A型 1 1例,B型 6 例,O 型 一2例。二、血清总补体 C HS 。测定方法C H。 。测定按 Ma y e r 的 5 0%溶血测定⑧。(一 ) 1.5%绵羊红细胞混惫液:取绵羊红细胞保养液数毫升,离心,用吸管吸去上清液,以 10 倍体积生理盐水洗 3次,最后一次,以 2, 。0 转 /分离心 10 分钟,弃上清液后,吸取红细胞 1 毫升,加入巴比妥稀释液 (含 C +a十 、M g干 十 , p H 7.3) 约 1 40 毫升,混匀。每次使用的红细胞悬液,均应含红细胞约 1x l 。 “ /毫升。亦可以红细胞溶血后的吸光度作为标准,即取 1.。 毫升悬液加蒸馏水 5毫升,使红细胞完全溶解。用 72 型分光光度计比色,波长 5 50 微米,要 求光密度 ( O、D ) 为 4 0 0,若不符,v: :为原红细胞悬掖体积可按 v! 二 v : p瑟加以调整。V, :为当纠正光密度到 40 时应有的体积昔 广东省中山县肿瘤研究所DOI : 10. 13471 /j . cnki . j . sun. yat -sen. univ (med. sci ) . 1980. 00063 8 中 山 医 学 院 学 报 i 卷v ; 一 v : 二 需增加 (或减少 ) 的体积O、D、为比色之光密度(二 ) 1 , 2, 0 0 0溶血素 (含 4 单位 )(三 ) 1 : 40人血清根据血清试验份数,各排 6 支试管于试管架上,每管加人溶血素 l 毫升,绵羊红细胞 l 毫升及不同量的巴比妥缓冲液 (各管分别为 0.1到。.6毫升 ),置 37’C水浴 箱 内 保温 10 分钟。然后分别加人检测的血清。.4至 0.9毫升,使最后每管的液量为 3 毫升。保温3 7“C, 3 0分钟。取出离心,将上清液比色 (5 5 0微米 )。从各管所得的光密度,分别计算出溶血的% 数,再按补体浓度与溶血% 的关系式x = K(六 )言或 ,。 g一 ,。 g K +告,。 g六为补体毫升数为溶血%数鲁为反应系统常数k 为 5 0%溶血时补体的毫升数分别以 X 值和相应的瑞值在双对数座标纸上作图,啊求出 K。再 , 算为用 , 毫升补体稀释液时的血清稀释度,以此稀释度作为补体的单位。三、白细胞移动抑制试验取血 2 毫升,肝素抗凝。置 37OC温箱自然沉降 1 小时,取上层 血浆,以 2 2 5 9 离心10 分钟,弃去上清,将沉降细胞加人 5 毫升Ha o k, s液中,离心、洗 涤 2 次。最 后将。,5% 水解乳蛋白液 (含 10 %胎牛血清 ) 0.5毫升加人细胞中。将上述细胞悬液灌人毛细玻璃管内 ( 孔径为 1 一 1.2毫米,长度为 75 毫 米 ),管的一端加热封闭。2 2 5 9离心 10 分钟。从细胞与液体的界面切断,用羊毛脂将内有细胞的一段毛细玻管粘放在小培 养室内。并加人含 P H A ( 3 50 微克 /毫升 ) 的水解乳 蛋 白 液,并以单加水解蛋白液的作对照。盖上盖玻片。置 37OC温箱21 小时。取出后,测定细胞游出的面积。计算白细胞移动指数。移动指数愈小,说明白细胞移动抑制因子在 P H A作用下释放愈多,提示细胞免疫反应的能力愈强。反之则否。白细胞移动指数 =P H A面积实 验 结 果一、血清 C H, 。含纽(一 ) 35 例正常人血清 C H。 。最高为了6.9单位 (以下同 ),最低为 2 6.7。平 均 值 士标准差为 4 7.9 士 22.2.C HS 。在 7办以上者 2 例 ( 5 % ),在 3 0以下者 3 例 ( 8 % )。在 35 例正常 人中,血清 C H。 。与性别、年龄、血型的关系见表 1 ~ 3。(二 ) 34 例未经治疗鼻咽窟病人血清 C H, 。最高为 16 0,最低 为 3.3。平均值 士标准差为5 9.7 士 2 5。C H。 。在 7 0以上者 7 例 ( 2 1% );在 3 0以下者为 。。1期 鼻咽癌病人的血清朴体与细胞免疫功能表 1 性别与血清 C Hs 。的关系性 别 例数 (人 )男 2 3女 12合 计 3 5C HS。(单位 )平均数士标准差4 7.7士 9.94 8_5土 1 6_34 7_9士 1 2 2表 2 年龄与血请 C H。 。的关系年龄 (岁 ) 识数 ( 气、) C HS。(草位 )平均数 士标准差2 1~ 3 03 1~ 4 04 l wt 5 03 3.6士 7.14 8.5士 2 2.75 0_7士 1 2_1月气no,工ù .一上表 3 血型与血清 C Hs 。的关系血 型 例数 (人 ) C HS 。(单位 )平均数 士 标准差A 1 1 4 7.9士 1 2.70 1 2 4 7.0 士 1 5.4B 6 5 4.7士 2 0.3(三 ) 1 2例其他肿瘤病人血清 C H。 。为 6 5.1 士 5.5。上述三组的血清 C H。 。及统计学分析结果见表 4。二、血清 C H, 。与白细胞移动抑制试验的关系对 26 例鼻咽癌病人和 2 例淋巴肉瘤、1 例何杰金氏病病 人进行了血清 C HS 。及白细胞移动抑制能力两者之间相互关系的观察。26 例鼻咽癌病人中:① C H。 。> 60,移抑指数 < 0.1者 7 人,占27 %; ② C HS 。< 6 0,移抑指数 < 0.1者 1 0人,占3 7.1% 多 ③ C H。 。> 6 0,移抑指数 ) 0.1 者 i 人,占 3.9 % ;④ C H。 。< 6 0,移抑指数 > 0.1者 s 人,占3 0.5% ( 表 5 )。表 5C HS 。鼻咽癌病人 C H。 。与移动抑制指数27。0%( 7 )3。9%( 1 )60 }—} 37.1 % 3D.8%( 1 0 ) ( 8 )0。1一一一0白细胞移动抑制指数4 0 中 山 医 学 院 学 报 1 卷2例淋巴肉瘤的 C H。 。 , i 例 > 6 0 (9 5.3 ), 1 例 < 6 0 ( 4 4.9% ),但移 抑 指数均在 0.1以上。i 例何杰金氏病 C H。 。> 6 0 ( 8 6.9 ),移抑指数亦 > 0.1 ( 0.2 7 )。表 4 鼻咽癌及其它肿瘤病人血清C H。 。与正常人的比较C HS 。分布率 (% )例数 (人 )C H。 。(单位 )平均数 土标准差 < 3 0 > 7 0O八ù1土氏曰20八甘 自ēnù正 常 人鼻 咽 癌其它肿瘤4 7.9 士 1 25 9.7 士 2 56 5.1 士 8.2补若 .8 . 铃一ó24,J八01几正常人 与鼻啊癌之差有显著差 异 (0.05 > P > 。.01 )正常人与其电肿瘤之差有非常显著差异 ( P < 。.01 )料.鼻咽癌与其电肿瘤之差无显著差异 (P > 。.0 5)讨 论一、35 名正常人血清 C H: 。的平均值 士标准差为 47.9士 12.2。与国外资料 比 较,比犬山征夫报告为高⑧ ( 42.7 士 3.8) , 比松崎的结果更高⑥ ( 27 例, 3 3.。士 6.8 )。但 比P at ` ic a 的结果略低 (3 4例,50.8 士 2 4) ⑤。与国内资料近似,如广州 医 学 院 附 属医院报道 2 例正常 人为 4 9.5 士 7.9。总的来说,相差不致太大。这些差异可能和彼 此 实验的一些条件,如溶血素的浓度不同,绵羊红细胞数目有差别等因素有关。不同年龄组中, 3 2~ 吐。, 吐z~ 5 0两年龄组 C H。 。分别为 4 8.5士 2 2.7和 5 0.7 士 12.1十分接近,惟 21 ~ 30 岁年龄组较低,为 3.6 士 7.1。但本组例数只有 4 人。在血型分组中,A型和 0 型 C H。 。较为接近,A 型为4 7.9 士 1 2.7 , O型为 4 7.0 士 15.通。B型稍高,为 5 4.7士10.3。但例数只有 6 人。因此,是否在正常人群中 C H。 。在 E型较高和在 30 岁 以 下青年较低,尚须进一步观察。值得提出的是性别间的差异。P at iu ic a 报告女性 C H。 。 比 男 性 为 高。本文 男 女的C H。 。分别为 47.7士 9.9与 48.5 士 16.3 , 亦有女高于男的倾向。这须进一步确定。如确有差异,则在实验组的病例选择上应该考虑性别的因素。二、34 例未经治疗鼻咽癌病人血清 C H。 。比正常人增高 (P < 。.0 5)。看 来 这 不是特异性的。因为在 12 例其他肿瘤病人中,同样发现其 C H。 。比正常人高,而且 差 异非常显著 ( P < 0.0 1 )。鼻咽癌病人血清补体的研究,未见过单独的报道,但犬山征夫等研究头颈部恶性肿瘤的补体时,在 1 09 例病人中有鼻咽癌 2 例,总的结果是头颈部肿瘤的 C H。 。比 正 常人高。病人照射前、复发转移、晚期等情况下,补体常升高。反之,缓解时,五年治愈等时,常见补体恢复正常。有人报告,随着瘤体的增大,补体随即升高。瘤体 不 足 3c m时,补体稍升, 4 c m时,补体上升。1 期 鼻咽癌病人的血清朴体与细胞免疫功能癌肿时补体上升的原因可能是 由于①癌细胞弱抗原引起反复多次抗原抗体反应使补体消耗后的代偿性增加; ②组织破坏、感染使补体生成亢进;或者是③补体释放增加之故。肿瘤时补体上升的意义可能是补体参与细胞毒性作用。侧定肺癌病人经过肺窟病灶的肺动脉和肺静脉中的C H。 。和 C4 ,发现在肺静脉中含量降低,这是补体参与病灶部位免疫机构的一个有力证据。在活检材料中,10 ~ 40 %的癌细胞表面存在有抗原抗体和补体复合物,而在正常细胞是没有的。补体与细胞免疫的关系。在一般条件下,由免疫淋巴细胞引起的细胞毒反应不一定需要补体参加,但这绝不意味着补体对细胞免疫完全没有影响,因为根 据 Govae rt s 和最近 Gr a nt 的报告,由免疫淋巴细胞引起的细胞溶解现象可因补体促进之。如免 疫淋巴细胞与靶细胞之比为 1 0 :1 以上时,加入新鲜血清并无影响,但当比例减 少 到 5 :1 时,加入新鲜血清,可使免疫淋巴细胞的作用增加 40 倍以上。有人提出补体与细胞免疫的四类型说,即认为患者免疫状态可有以 下四 种 类 型:①补体、O T反应均上升, ②补体下降,O T反应上升, ③补体上 升,O T 反 应 下 降,④补体及O T反应均降低。并提出类肉瘤 (S ar co i d) 和窟以第③型为多 见,此 型 可 视为在人的免疫机构中,补体因细胞免疫降低而有代偿性的升高 (所谓补体系统的代偿学说 )。我们的结果则以②型为多,占3 7.1 %。这种现象是否可以理解为,细胞免疫功能正常时,补体就不升高,反映了代偿系统的另一个侧面。第④型占第二位 ( 30.8 % ),可能与病人的病情较重有关。但第③型最少,仅为 3.9%,原因未明。结一、3 5例正常人用 Ma y e r 氏法侧得血清总补体 ( C H。 。) 为 4 7.9 士 1 2.2单位。二、34 例未经治疗鼻咽癌病人血清 C H。 。为 5 9.7 士 2 5。与正常人血清中C H。 。比较,有显著差异。三、12 例其它肿瘤的病人,其血清 C H。 。为 6 5.1 士 8.8 , 与正常人比较,有非常显著的差异。四、鼻咽癌病人与其它肿瘤病人血清 C H。 。比较,无明显的差异。五、26 例真咽癌病人中,C H。 。与 白细胞移动抑制指数的关系以补体 不 高,移抑正常这一组最多,意义未明。参 考 文 献① S o u t h a m C M, e t a l:E f f e e t o f n i t r o g e n m u s t a r d o n s e r u m e o m p l e m e : ti n v i t r o a n d i n p a t i e n t s w i t h n e o p l a s t i e d i s e a s e.P r o e S o e E x p B i o l M e d7 6 : 4 3 0 , 1 9 5 1② L i b a n s k y J, e t a l:I n v e s t i g a t i o n o f t h e im m u n o l o g i e a l r e a t i v i t了 i n h a e m o -b l a s t o s e s,1.B lo o d e o m P l e m e n t v a l u e s i n l e u k e m i a , m a l i g n a n t l y m p h o m a4 2 中 山 医 学 院 学 报 l 卷a n d nr y e l o m a.N e o p l a s m a 1 0: 6 0 5, 1 9 6 3③ Se h i e r W W, e t a l:H o d g k i n’ 5 d i s e a s e a n d i m m u n i t y.A m J 人l e d 2 0 : 9 4,1 9 5 6`万,Wo h l H, e t a l:C o m p l e m e n t l e v e l s b e f o r o a n d a f t e r r a d i o t ll e r a p y i n e a n e e rp a t i e n t s.O n e o l o g y 2 5 : 34 4,19 7 1卿 P a t n i e i a F, e t a l:S e r u m e o m p l exn e n t l ov e l s i n p a t i e n t : 、、一i t h d i琶e s t i v etr a c t e a r c i n o m a s a n d o t h e r n e o p l a s t i e d i s e a s e.o n e o l o g y 3 4 : 名了, 一97 7网 松崎 稚等:恶性肿疡 ; : 势廿 为 血清补体.癌。 临宋 23 (1 5 ) : 1 4 0 9,1 9 7了`了 N is h i a k a 王又:C o m p l e n 、 e n t a n d t u m o r i n : m u n o l o 毯y a d、 一 a n e e : i工: e a n c o r r o a -s e a r e h,1 4 : 2 3 1~ 2 3 9,A e a d e rn i e p r e s s,N Y.1 9 7 1⑧ 犬山征夫等:头颈部恶性肿疡 去血清补体 价.J a p C o n C e r T h e,·1 1 ( 、 ) : 71 1,1 9 7 6酒`I l a y e r M M, e t a l:E x p e r i m e n t a l i 。 I n : u n o e l, e n l i s t r )·, p 1 3 3一 2 4 0,T h o 。 , a s,, P l·i n g f ie l d,1 9 6 1.

鼻咽癌病人的血清补体与细胞免疫功能

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