在探讨鼻咽癌病人细胞免疫功能障碍的原因中,我们曾发现鼻咽癌组织浸出液能非特异性地抑制外周淋巴细胞的转化。那末,存在于癌组织内的这种免疫抑制因子是否会分泌到体液中,从而起到损伤宿主的细胞免疫的作用?为了弄清这一问题,我们又观察了鼻咽癌病人血浆对外周淋巴细胞转化试验的影响,实验结果,发现鼻咽癌病人血浆也能抑制外周淋巴细胞的转化。为进一步研究鼻咽癌病人细胞免疫功能低下的机制提供有益的线索。现把实验结果报告如下

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第 3 卷 第 1 期19 8 2 年中 山 医 学 院学 报 V o l . 3 , N o .A C T A A C A D EM LA E M列D] CL IN A B Z H O N G S H A N 1 98 2鼻咽 癌 免 疫抑 制 因 子 的研 究1.鼻咽癌病人血浆对外周淋巴细胞转化的抑制蔡体育 简志瀚 崔景华 陈爱珍( 肿瘤研究所病理免疫室 )在探讨鼻咽癌病人细胞免疫功能障碍的原因中,我们曾发现鼻咽癌组织浸出液能非特异性地抑制外周淋巴细胞的转化。那末,存在于癌组织内的这种免疫抑制因子是否会分泌到体液中,从而起到损伤宿主的细胞免疫的作用 ? 为了弄清这一间题,我们又观察了鼻咽癌病人血浆对外周淋巴细胞转化试验的影响,实验结果,发现鼻咽癌病人血浆也能抑制外周淋巴细胞的转化。为进一步研究鼻咽癌病人细胞免疫功能低下的机制提供有益的线索。现把实验结果报告如下。实 验 材 料 及 方 法实验对象 鼻咽癌初诊病人肠例,全部均经病理确诊,未曾使用抗癌药物治疗。输血员71 例,其中 36 例作为输血员之间交叉互换血浆的转化试验用。实验方法 每次实验选择相应例数的鼻咽癌病人及输血员,每例取静脉血 3 毫升,肝素抗凝,吹匀,低速离心 40 0转 /分 x Z尸或静置30 分钟,「吸血浆层 ( 白细胞层 ) 移入另一离心管内,离心 2,00 转 /分 x 1 0尹 ,使血浆与细胞分层,·细心把血浆层移至另一试管中 ( 切勿混 带有细胞 ),然后把细胞层用 1五血, s 液吹洗,留细胞悬液 0.2毫升,分为两管,一管加入原自体血浆 0.5 毫升,另一管加入 异 体 血 浆0.5毫升,置 37 ℃温水孵育 30` ,然后每管加入 0.5% 水解乳蛋 白 aH kn、 培养液至 4 毫升,常规加青链霉素及 PH A 5 0 微克,用N a H CO : 液调 P H 值至 7.2 , 置 3 7 oC 恒温箱 7 2小时,离心,涂片染色,镜检 2 0 个淋巴细胞中母细胞的转化率。互换血浆如图所示。离心 1,50 转 /分 x 10产 ,弃上清液再洗涤 3 次,图 血液互换实 验 结 果3 5例输血员在 自体血浆条件下培养的淋巴细胞转化率 5 4.9% 士 1 4.9 , 这些输血员的淋巴细胞经过洗涤以后,分别换上鼻咽癌病人的血浆进行培养,在 P H A刺激下淋巴细胞转化率下降至 4 6。2% 士 16.6。两组 比较,统计学处理相差显著 (P < 0.0 5 )。3 5例未经坑癌治疗的鼻咽癌病人在自体血浆条件下培养的外周淋巴细胞转化率 4 4.3% 士DOI : 10. 13471 /j . cnki . j . sun. yat -sen. univ (med. sci ) . 1982. 00081期 鼻咽癌免疫抑制因子的研究 7 5 91 7.7。但是,这些病人的淋巴细胞经过洗涤后,换上输血员的血浆进行培养,病人淋巴细胞对 P H A 的刺激反应并没有回升,病人的淋转率平均 4 1.4% 土 1 4.8,两组之间无显著差异。另外 36 例输血员进行异体血浆培养,在 P H A刺激下观察异体血浆对淋转率的影响,在自体血浆条件下常规转化试验,淋巴母细胞转化率平均率 5 7.7 4% 士 1 0.96 ; 这些输血员的淋巴细胞经过洗涤后换上异体的输血员血浆进行转化培养,在 P H A 刺激下淋巴 母 细 胞 转 化率5 2.5 3% 士 1 2.1 , 两组前后之 比,统计学处理相差不显著 (P > 0.0 5 )。讨 论引起人体免疫功能降低的因素是多方面的,例如:先天性免疫缺陷、营养、年龄、感染、放射、化疗药物及激素的长期使用等,都可不同程度地导致免疫功能的损伤。肿瘤宿主免疫损伤的程度.似乎伴随着肿瘤的发生发展而加重。显然,肿瘤的存在对于宿主的细胞免疫功能的损害起着重要的作用。关于鼻咽癌病人细胞免疫功能损伤的原因,我们曾报告了鼻咽癌组织浸出液能抑制淋巴细胞转化的现象〔 ”。结合此次试验结果,证明鼻咽癌病人的细胞免疫功能确是低下的。输血员的淋巴细胞经过洗涤后换 上 N PC 病人血浆进 行 培养,在 P H A 刺激下淋巴细胞的平均转化率由原来的 5 4.9%降至 46.2% (P < 0.0 5 )。有趣的是输血员的淋巴细胞加上了 N P C 病人血浆后的平均淋转率十分接近 N P C 病人淋转率的水平( 46.2%, 4 4.2% )。从本实验结果提示 N P C 病人的血浆含有抑制外周淋巴细胞转化的因子,而病人血浆中的免疫抑制因子是否来自肿瘤组织,它与鼻咽癌组织中的免疫抑制因子是否等同,有待今后深入研究。值得注意的是,NP C 病人的外周淋巴细胞经过洗涤后换上正常人的血浆进行培养.病人淋巴细胞对 P H A 的反应能力并没有回升,这一结果与 W h it ak ert“ ’对乳腺癌病人的研究结果不同,他的报告指出,乳腺癌病人的血清能抑制正常人的淋巴细胞转化,这一结果与我们的实验结果相似。但不同的是,他指出乳腺癌病人的淋巴细胞经过洗涤后换.上正常人的血浆,可使淋巴细胞转化率升高,他们的实验结果似乎说明了乳腺癌病人的细胞免疫功能损伤的主要原因是存在于病人血清中的免疫抑制因子,而病人的淋巴细胞一旦去除了免疫抑制因子之后其免疫功能是可以恢复的。从我们的实验结果看,鼻咽癌病人的淋巴细胞在改变了血浆环境后转化率并没有明显回升,N PC 病人的淋巴细胞在自体血浆环境下,其平均转化率 4 4.26 %,换上了正常人的血浆后平均淋转率 41.4%,两组结果之比统计学上无显著差异。究其原因可能有下列因素:1.免疫抑制因子牢固地附着在病人的淋巴细胞膜表面,通过 aHn ks 液洗涤,这种免疫抑制因子难以被洗脱。2.免疫抑制因子引起淋巴细胞膜的改变 (起着封闭 T 淋巴 细 胞 表 面 的 PH A 受 体 作用 ? ),受损伤的淋巴细胞在短时间的培养难以恢复其功能。3.引起 N p C 病人细胞免疫功能低下的原因是多方面的,除了免疫抑制因子之外,鼻咽癌病人的外周淋巴细胞的本身是否存在着某种缺陷的可能性。伪 ant“ ’曾报告了对 96 例 N P C病人细胞免痊的研究结果指出,N CP 病人的细胞免疫功能是低下的,这些病人治疗后经过 9个月至 9 年,检测其细胞免疫功能并役有明显回升,这与76 。 中 山 医 学 院 学 报 3 卷我们的实验结果有相似之处,似乎都提示了有免疫功能障碍的N P C 病人较难恢复正常水平。这一情况为鼻咽癌病因发病学方面的研究提供了新的索线。本实验结果是否由于异体血浆的影响引起淋巴细胞转化的抑制 ? 从 N P C病人淋巴 细 胞换上了正常人血浆后淋转率既没有明显抑制亦没有明显升高的现象可以回答这一疑间外,本次输血员和正常人之间配对交换血浆的转化试验无显著性差异,也排除了异体血浆引起转化抑制的可能性。鼻咽癌病人血浆抑制淋巴细胞转化因子的来由及其性质,它对宿主免疫反应的作用都甚不清楚,这些间题期待进一步研究。( 本文承蒙宗永生副教授审阅,肿瘤医院张锋、张万团、邓清泉医师提供病例,均此致谢。), 考 文 欲〔月 蔡体育 简志瀚等:鼻咽癌免疫抑制因子的研究— 鼻咽癌组织液对外周淋巴细胞转化的抑制。中山医学院肿瘤研究所学术资料汇编 ( 三 ),1 978 年 n 月[ 2」 W恤 t a ke r M G: R e d u e e d Iy m Ph o c y t e t ar n s f o rm a t ion in b r e a st e a n e e r.L a n ce t l : 8 92,19 7 1[ 3〕伪a n S H 江m p a证 d g ene ar l e e l l一m e d认 t e d im mun e fu n ct i o n s i n v i v o a n d i n v i t r o in 禅 t ie Dt s w i t hN P C.I n t J aCn e e r 1 8 : 13 9 , 19 76小 结本文报告了用植物凝血素 (P H A )作为 T 淋巴细胞的刺激原,证实鼻咽癌 ( N P c) 病人的细胞免疫功能是低下的。用这些 NP C病人的血浆分别与正常人的淋巴细胞培养,发现 N P C 病人血浆对正常人的淋巴细胞转化有抑制作用。而正常人血浆对异体淋巴细胞转化没有抑制现象。提示了 N r C病人血浆含有抑制淋巴细胞转化的因子。慢 性 肾 功 能 衰 竭 中 的 消 化 性 溃 疡叶任高等中华消化杂志 i : 30 5,19 8 1本文报告了 43 例慢性肾功能衰竭中并发消化性溃疡 14 例,并发率为3.3%,远较一般人群为 高。约有半数病例的溃疡病症状可不典型或不明显,但常可发生慢性小量出血,导至贫血加重,如发生上消化 道大出血,则可危及生命,本组死亡 9 例中,6 例便死于大出血。此外,溃疡病也是肾移植中的重要 问题,必须先处理演疡病,以避免移植术后因使用大量皮质激素而发生上消化道出血,故在慢性肾衰患者 中,及 早发现和处理溃疡病,有利于防止致死的隐匿性的出血或上消化道大出血。作者认为:对可疑溃疡病 者或拟作肾移植者,应常规作 X线钡荆检查,以期及早获得诊治。其治疗与一般溃疡病同,但认为用氢氧 化铝作抗酸剂,不但有良好抗酸能力,且能与礴结合,有助于防洽肾衰中的高磷血症,甲氰咪肌较有效,在 肾衰时用t 应较常人减半。据本文材料,慢性肾衰中演疡病发生率增高的原因,可能与肾衰时血 清胃 泌 素 增布,肾衰导致甲状旁腺机能亢进,和肾衰病人的精神负担较重有关。1 期 鼻咽癌免疫抑制因子的研究 7 6 1A R e s e a r c h f o r t he Im m u n o lo g ic a l In h ibi t o r s in P a t沁n t sw it h N a s o Pha r y n g e a l C a r c i n o m a ( N P C )1.T he !n h ibit o r y E f f e c t o f N P C P a t ie n t s’P l a s m a o nLy m p ho e y t e T r a n s f o rm a t i o n in V it r o妙C a i T i y u J i an Z h ih a n C h u e i J in g h u a C h e n A i z h e n(D e p a r tm en t o f P a t h o lo g y a n d Imuno l o g y,C a cn e rR e s e a r e h I n s t i t u t e,z h o n g Sh a n Me d ica l OC l le g e )Abs t r a C tO u r pver io u s r e s e a cr h wo kr ha d s h o w n t h a t t h e r a t e o f t r a n s fo r m a t io n ly m p h o e y t e s w a sm a r k e d ly l o w e r e d i n N PC p a t i e n t s.T h e p u 印 o s e o f ht i s s t u d y 15 t o d e m o n s t r a t e t h e i n h ib i t o r y e f f e e t o f NT C p a t ie n t s,p l a sm ao n t h e ly m p h o e y et t r a n s fo mra t io n r a t e i n v i t r o.T h e N PC p a t ien ts , p l a s m a a d e d t o n o r m a l s u b je e t s,ly m ph o e y t e s a p p e a r ed ot s h o w s o m ei n h ib i t o r y e f fe e t o n t h e ly m phoe y t e t r a n s fo rm a t i o n r a t e.T h i s t r a n s fo mra t io n r a te i n 5 5 n o r m a ls u b iec t s w a s r e d u e ed f r o m 5 4.9 % to 4 6.2 ;石 士 1 6.6 9 a f et r a d in g NP C pa t ie n t s,p l a s ma.W h i l e t h e a d d i t io n o f onrm a l s u b ie e t s,p l a sm a h a d n o s u e h e f fe e t.T h is i: d e m o sn t r a t e dw h e n t h e t r a n s fo r m a t io n r a t e o f 3 6 on rma ls u b je e ts,l y m p h o e y ot w il e n a u t o g e n o u s p l a sm a w a sa dd ed w a s 5 7.7 % 士 1 0.9 6 a n d w i t h a l l o g e n ic p l a sm a i t w a s 5 2.5 % 士 1 2.1 ( P> 0.0 5 ).oH w vee r , N PC p a t ic n t s,ly m ph o e y t e s e u l t u r e d e i t h e r w iht t h e pa t i e n t s’p l a sm a o r onr m a lp l a sm a s h o w e d l o w e r t r a n s fo rm a t i o n r a t e s ( 4 4.2 6% 士 1 7.7 a n d 4 1.4% 土 1 4.5 ).x t 15 a s u me d tha t t h e er m a y b e e e r t a i n im mun o l o g i e a l in h ib i t or s p er s e n t i n t il e p l a汕 a o fp o s s ib ly N P C p a t ic n t s a n d t h e p a t i e n t s,l ym p hae y t e ma ya ls o be de fee t iv e pe r s e.少

鼻咽癌免疫抑制因子的研究 Ⅰ.鼻咽癌病人血浆对外周淋巴细胞转化的抑制

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