【目的】探讨细胞外基质黏附分子层粘连蛋白（LN）和纤黏连蛋白（FN）与成釉细胞瘤复发和侵袭的关系。【方法】采用免疫组织化学LABC方法检测28例成釉细胞瘤组织中LN和FN的表达。【结果】在28例成釉细胞瘤中，LN和FN在基底膜的阳性表达率分别为46．4％和39．3％，复发性成釉细胞瘤LN和FN在基底膜的阳性表达率明显低于原发性成釉细胞瘤（P〈0．01）。LN和FN的表达形式相似，阳性着色部位均位于基底膜及部分肿瘤细胞的胞浆，在基底膜连续着色的部位，靠近基底膜的肿瘤外周细胞胞浆染色较强，中央内层细胞胞浆染色弱或无，而在基底膜着色缺失的部位，靠近基底膜的肿瘤外周细胞胞浆染色弱或缺失。【结论】LN和FN在基底膜表达缺失与成釉细胞瘤的复发密切相关，可能是成釉细胞瘤局部侵袭的机制之一

张彬

潘朝斌

陶谦

黄洪章

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肿瘤侵袭是肿瘤细胞与细胞外基质成分相互作用的结果, 与肿瘤复发和转移等生物学行为密切相 关 [1]。 层 黏 连 蛋 白 ( laminin, LN) 和 纤 黏 连 蛋 白( fibronectin, FN) 是细胞外基质黏附分子和基底膜的主要成分 , 在肿瘤侵袭过程中 , 它们参与调节肿瘤细胞的黏附及构成阻碍肿瘤侵袭和转移的组织屏障, 由此可见, 肿瘤组织中 LN 及 FN 的变化与肿瘤 侵 袭 和 复 发 密 切 相 关 [2 - 4]。 成 釉 细 胞 瘤( ameloblastoma, AM) 具有局部侵袭性 和 术 后 易 复发等特殊的生物学行为。目前有关 LN 和 FN 与成收稿日期: 2005-06-21基金项目: 国家自然科学基金资助项目( 30471896) ; 广东省自然科学基金资助项目( 04300240)作者简介: 张 彬( 1965- ) , 男 , 江苏徐州人 , 博士 , 副主任医师; 黄洪章 , 教授 , 导师 , 通讯作者. E-mail: huanghongzhang@tom.com.细胞外基质黏附分子表达与成釉细胞瘤生物学特性的关系张 彬 1, 陶 谦 2, 黄洪章 1, 潘朝斌 1( 中山大学 1.附属第二医院口腔颌面外科 , 广东 广州 510120; 2.光华口腔医学院口腔颌面外科 , 广东 广州 510055 )摘 要:【目的】探讨细胞外基质黏附分子层粘连蛋白( LN) 和纤黏连蛋白( FN) 与成釉细胞瘤复发和侵袭的关系。【方法】采用免疫组织化学 LABC 方法检测 28 例成釉细胞瘤组织中 LN 和 FN 的表达。【结果】在 28 例成釉细胞瘤中 , LN 和 FN 在基底膜的阳性表达率分别为 46.4%和 39.3%, 复发性成釉细胞瘤 LN 和 FN 在基底膜的阳性表达率明显低于原发性成釉细胞瘤( P< 0.01) 。LN 和 FN 的表达形式相似 , 阳性着色部位均位于基底膜及部分肿瘤细胞的胞浆 , 在基底膜连续着色的部位 , 靠近基底膜的肿瘤外周细胞胞浆染色较强 , 中央内层细胞胞浆染色弱或无 , 而在基底膜着色缺失的部位 , 靠近基底膜的肿瘤外周细胞胞浆染色弱或缺失。【结论】LN 和 FN 在基底膜表达缺失与成釉细胞瘤的复发密切相关 , 可能是成釉细胞瘤局部侵袭的机制之一。关键词 : 成釉细胞瘤 ; 层黏连蛋白 ; 纤黏连蛋白 ; 免疫组织化学中图分类号 : R739.82 文献标识码: A 文章编号 : 1672-3554(2006)01-0038-03Relationship Between Expression of Laminin and Fibronectin and BiologicalBehavior of AmeloblastomaZHANG Bin1, TAO Qian2, HUANG Hong-zhang1, PAN Chao-bin1( 1. Department of Oral Maxillofacial Surgery, the Second Affiliated Hospital, 2. Department of Oral Maxillofacial Surgery,Guanghua College of Stomatology, SUN Yat-sen University, Guangzhou 510120, China)Abstract:【Objective】 To investigate the relationship of expression of laminin and fibronectin with invasion andrecurrence of ameloblastoma.【Methods】Immunohistochemical LABC method was used in detecting the expression oflaminin and fibronectin in 28 cases of ameloblastoma. 【Results】 The total positive expression rates of laminin andfibronectin in the basement membrane were 46.4% and 39.3% . The positive expression rates of laminin andfibronectin in basement membrane of secondary ameloblastoma were significantly higher than those of primaryameloblastoma (P< 0.01). The positive expression of laminin and fibronectin was mainly located in the basementmembrane and the cytoplasm of some cells. The stained density of the outer layer cells near to continuous basementmembrane was higher than that of the inner layer cells, but the stained density of the outer layer cells near todiscontinuous basement membrane was predominantly low or deleted.【Conclusion】Absent expression of laminin andfibronectin in basement membrane could be associated with recurrent potentiality of ameloblastoma, and may be areason of invasion in ameloblastoma.Key words: ameloblastoma; laminin; fibronectin; immunohistochemistry[ J SUN Yat-sen University (Med Sci), 2005, 27(1):38- 40, 46]第 27 卷 第 1 期2006 年 1 月Vol.27 No.1Jan. 2006中山大学学报(医学科学版)JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)DOI:10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2006.0010釉细胞瘤生物学特性关系的研究较少。本研究应用免疫组化方法检测成釉细胞瘤组织 LN 及 FN 的表达, 并探讨它们的表达与成釉细胞瘤复发的关系。1 材料与方法1.1 检测对象28 例成釉细胞瘤石蜡包埋标本全部选自中山大学附属第二医院口腔颌面外科 1995- 2002 年间手术的患者, 由两位高级职称的病理医师复片, 排除诊断不统一者, 其中男性与女性各 14 例, 年龄9~65 岁, 平均年龄 39 岁。复发和原发性成釉细胞瘤分别为 16 例和 12 例, 原发性成釉细胞瘤患者均随访 2 年以上未复发。初发时 X 线片上肿瘤的平均 大 小 为 2.96 cm×4.04 cm, 其 中 复 发 性 为 2.94cm×4.09 cm, 原发性为 3.00 cm×3.96 cm。发生于下颌骨 20 例 , 上颌骨 2 例 , 颞下窝 2 例 , 颅底 2 例 ,颞、额骨各 1 例。病理分型: 滤泡型 5 例 , 丛状型 5例 , 棘皮瘤型 6 例 , 单囊型 2 例 , 基底细胞型 2 例 ,鳞状细胞型 1 例, 颗粒细胞型 1 例, 未分型 6 例。初发时的手术方式: 刮治术( 保守治疗) 17 例 , 方块切除及颌骨部分切除 ( 0.5 cm 以外, 根治性治疗) 11例。复发与原发性成釉细胞瘤的诊断标准: ①复发性: 患者既往有一次或一次以上的手术治疗史, 本次与既往发病均经病理证实为成釉细胞瘤; ②原发性: 患者首次发病及病理诊断为成釉细胞瘤。经检验, 原发复发间治疗方式及肿瘤大小无差别。1.2 检测方法常规 4 μm 厚切片 , 多聚赖氨酸包被载玻片 ,备 染 。 免 疫 组 织 化 学 方 法 采 用 链 霉 素 - 生 物 素( LSAB) 免疫酶标染色法, 一抗兔抗人 Laminin( LN,BA0087) 和 Fibronectin( FN, BA0052) 购自 Boster 公司, 参照说明书进行染色。1.3 结果判定标准在成釉细胞瘤组织中 LN 和 FN 的阳性染色以肿瘤周围基底膜着色为主 , 呈棕黄色 , 部分肿瘤细胞的细胞质亦着色。基底膜着色连续或基本连续线状( 包绕瘤团周径 3/4 以上) 为Ⅰ级; 基底膜着色呈间断包绕瘤团周径 1/4~3/4 为Ⅱ级; 基底膜着色包绕瘤团多处间断、周径 1/4 以内或缺失为Ⅲ级。Ⅰ级为阳性表达, Ⅱ、Ⅲ级为阴性表达[5]。试验用已知阳性片作阳性对照 , 用 PBS 代替第一抗体作为阴性对照。1.4 统计学处理所有数据处理均采用 SPSS/PC 10.0 软件包在微机上分析。用卡方检验和 Fisher’s 精确概率检验对结果进行统计分析, 检验水准 α=0.05。2 结 果LN 和 FN 的阳性产物均呈明亮的棕黄色染色 ,其在成釉细胞瘤的表达见表 1。在 28 例成釉细胞瘤中 , LN 和 FN 阳 性 表 达 率 分 别 为 46.4%( 13/28)和 39.3%( 11/28) , 阴 性 表 达 率 分 别 为 53.6%( 15/28) 和 60.7%( 17/28) 。LN 和 FN 的表达形式相似 ,阳性着色部位均位于基底膜及部分肿瘤细胞的胞浆 , 在基底膜连续着色的部位 , 靠近基底膜的肿瘤外周细胞胞浆染色较强, 中央内层细胞胞浆染色弱或无( 图 1A, 1B) , 而在基底膜着色缺失的部位 , 靠近基底膜的肿瘤外周细胞胞浆染色弱或缺失( 见图1C, 1D) 。在 LN 和 FN 阳性表达的病例中均各有 2例复发, 分别占阳性表达病例数的 15.4%( 2/13) 和18.2%( 2/11) , 而阴性表达病例的复发比率分别为93.3%( 14/15) 和 82.4%( 14/17) , 阴性表达病例的复发比率均明显高于阳性表达者( P< 0.01) ; LN 和 FN在复发性 AM 的阳性表达率( 均为 2/16) 均明显低于原发性 AM( 11/12、9/12) , P< 0.01。3 讨 论纤黏连蛋白( FN) 和层黏连蛋白( LN) 是细胞外基质粘附分子和基底膜的主要成分, 均为多结构域糖蛋白。一方面 FN 和 LN 作为黏附分子与广泛存在于各种细胞表面的相应受体结合, 调节细胞与基质之间的黏附, 影响肿瘤细胞的移动。另一方面它表 1 LN 和 FN 蛋白在成釉细胞瘤中的表达( 28 例)Table 1 Expression of laminin and fibronectin inameloblastoma detected with immunohistochemistryCompared positive with negative, LN: χ2 = 14.2423, P< 0.001;FN: P = 0.0062Secondary AMPrimary AMTotal161228Ⅰ21113Ⅱ213Ⅲ12012Ⅰ2911Ⅱ224Ⅲ12113Positive PositiveNegativeGroups NegativenLN FN张 彬 , 等. 细胞外基质黏附分子表达与成釉细胞瘤生物学特性的关系第 1 期 39图 1 免疫组化检测 LN 和 FN 在成釉细胞瘤中的表达Fig.1 Expression of laminin and fibronectin in ameloblastoma detected with immunohistochemistryA, B: the stained density of the outer layer cells near to continuous basement membrane was higher than that of the inner layer cells in theexpression of laminin and fibronectin (A: laminin, B: fibronectin); C, D: the stained density of the outer layer cells near to discontinuous basementmembrane was predominantly low or deletion in the expression of laminin and fibronectin (C: laminin, B: fibronectin), LABC method, hematoxylinstain ( ×200)们与Ⅳ型胶原( Col Ⅳ) 等形成基底膜 , 构成阻碍肿瘤侵袭和转移的屏障。目前对二者在肿瘤侵袭不同阶段的作用及具体机制尚不清楚。有研究认为 LN-5 可通过形成新的基底膜区使角化细胞保持稳定 ,抑制其移动[6]。Giannelli 等[2]运用免疫组织化学方法对 LN 在口腔鳞癌侵袭和转移的作用进行了研究 ,发现 Laminin- 1 (LN- 1),、Laminin- 5( LN- 5) 在侵 袭性鳞癌基底膜的表达不连续、不规则 , 而在原位癌及癌前病变的表达连续正常 , 说明 LN 表达的降低或缺失促进了癌细胞的迁移, 与口腔鳞癌的侵袭和转移有关。在对成釉细胞瘤的研究也发现, LN- 5γ2的表达主要位于肿瘤团块的周边细胞, 肿瘤上皮岛周围基底膜区表达较弱或呈片块状, 显示基底膜的不连续性 , 提示 LN- 5 在基底膜表达的中断与成釉细胞瘤的进行性生长和侵袭行为有关[7]。另外, 在研究 FN 与肿瘤生物学行为的关系时也发现 , 神经胶质瘤 FN 的表达与肿瘤的恶性程度及分级呈负相关[8]; 在侵袭性乳腺癌 , FN 阴性表达者的复发率明显高于阳性表达者[3]。本研究显示 , 在初发时 , 原发性与复发性成釉细胞瘤的手术方式及肿瘤大小相似 , 但 LN 和 FN在成釉细胞瘤基底膜阴性表达病例的复发比率均明显高于阳性表达者 , 复发性成釉细胞瘤 LN 和FN 的阳性表达率明显低于原发性成釉细胞瘤 , 说明 LN 和 FN 在基底膜表达缺失与成釉细胞瘤的复发密切相关, 提示成釉细胞瘤 LN 和 FN 在基底膜表达的缺失, 导致阻碍肿瘤侵袭转移的屏障丧失,可能与其局部侵袭生长有关。有学者通过对成釉细胞瘤凋亡和增殖的研究发现[9], AM 具有较高的存活能力 , 抗凋亡增殖的部位在肿瘤的外层 ( 周边) ,促进凋亡分化的部位在肿瘤的内层( 中央) , 认为成釉细胞瘤的外周细胞增殖活跃 , 在其发生、发展及侵袭过程中起重要的作用。本研究中也发现, LN 和FN 阳性表达率分别为 46.4%和 39.3%, 阳性着色部位均位于基底膜及部分肿瘤细胞的胞浆, 在基底膜连续着色的部位, 靠近基底膜的肿瘤外周细胞胞浆染色较强 , 中央内层细胞胞浆染色弱或无 , 而在基底膜着色缺失的部位, 靠近基底膜的肿瘤外周细胞胞浆染色弱或缺失。以上结果提示, 成釉细胞瘤 LNA BC D( 下转第 46 页 to page 46)中山大学学报(医学科学版) 第 27 卷40[1][2][3][4][5][6][7][8][9]和 FN 表达下调, 尤其是外周瘤细胞 LN 和 FN 表达的下调或缺失, 导致细胞与基质之间的连接紊乱,促进肿瘤细胞移动, 利于外周细胞向周围侵袭, 这可能是成釉细胞瘤局部侵袭生长的又一个原因, 具体机制有待进一步研究。LN 和 FN 已被许多学者建议作为评估肿瘤预后的重要指标[3,4]。在 LN 和 FN 阴性表达的成釉细胞瘤标本中 , 基底膜着色包括Ⅱ级和Ⅲ级 , 大多数瘤细胞的胞浆染色并非全阴性, 有的呈中等阳性染色 , 有的呈弱阳性染色 , 有的弱阳性与阴性染色相混杂。这种结果反映了肿瘤发生和发展过程中 LN和 FN 的不稳定表达。参考文献 :彭挺生, 丘钜世, 吴惠茜, 等. 基质金属蛋白酶- 2,9 及其抑制剂在骨肉瘤中表达的意义[J]. 中山大学学报(医学版), 2003, 24(2):132- 135.GIANNELLI G, MILILLO L, MARINOSCI F, et al.Altered expression of integrins and basement membraneproteins in malignant and pre- malignant lesions of oralmucosa[J]. J Biol Regul Homeost Agents, 2001, 15(4):375- 380.TAKEI H, IINO Y, HORIGUCHI J, et al. Immuno-histochemical fibronectin staining pattern and prognosisin invasive breast carcinoma[J]. Oncology, 1995, 52(2):106- 111.RICCI E, CAVALOT A L, SANVITO F, et al.Differential expression and topography of adhesionmolecules in laryngeal and oropharyngeal carcinomas[J].Acta Otolaryngol, 2002, 122(2): 234- 240.杨 芳, 朱世柱, 李红钢, 等. Ⅳ型胶原、层黏连蛋白在甲状腺肿瘤组织中的表 达[J]. 华 中 科 技 大 学 学 报 : 医学版, 2003, 32(5):544- 546.YUEN H W, ZIOBER A F, GOPAL P, et al. Suppressionof laminin-5 expression leads to increased motility,tumorigenicity, and invasion[J]. Exp Cell Res. 2005, 309(1):198- 210.SAOL T, KAINULAIUEN T, PARIKKA M, et al.Expression of laminin- 5 in ameloblastomas and humanfetal teeth[J]. J Oral Pathol Med, 1999, 28(8):337- 342.OZ B, KARAYEL F A, GAZIO N L, et al. Thedistribution of extracellular matrix proteins and CD44Sexpression in human astrocytomas[J]. Pathol Oncol Res,2000, 6(2):118- 124.SANDRA F, NAKARMURA N, MITSUYASU T, et al.Two relatively distinct patterns of ameloblastoma: ananti-apoptotic proliferating site in the outer layer( periphery) and a pro- apoptotic differentiating site inthe inner layer( centre) [J]. Histopathology, 2001, 39(1):93- 98.(编辑 刘清海)( 上接第 40 页 from page 40)dose is important [J]. Thorac Cardiovasc Surg, 1999,117(3):515- 520.McCORMACK, FRANCIS X. Structure, processing andproperties of surfactant protein A [J]. Biochim BiophysActa, 1998, 1408( 2- 3) :109- 131.CROUCH E, WRIGHT J R. Surfactant protein a and dand pulmonary host defense [J]. Annu Rev Physiol,2001, 63:521- 554.LINKE M, ASHBAUGH A, KOCH J, et al. Surfactantprotein A limits pneumocystis murina infection inimmunosuppressed C3H/HeN mice and modulates hostresponse during infection [J]. Microbes Infect, 2005, 7(4):748- 759.PAUL D A, GREENSPAN J S, DAVIS D A, et al. Therole of cardiopulmonary bypass and surfactant inpulmonary decompensation after surgery for congenitalheart disease[J]. J Thorac Cardiovasc Surg, 1999, 117(5):1025- 1026.GRIESE M, WILNHAMMER C, JANSEN S, et al.Cardiopulmonary bypass reduces pulmonary surfactantactivity in infants [J]. J Thorac Cardiovasc Surg, 1999,118(2): 237- 244.RUMALLA V, CALVANO S E, SPOTNITZ A J, et al.The effects of glucocorticoid therapy on inflammatoryresponses to coronary artery bypass graft surgery [J].Arch Surg, 2001, 136(9): 1039- 1044.( 编辑 张敏瑞 )[10][11][12][13][14][15]!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!中山大学学报(医学科学版) 第 27 卷46

细胞外基质黏附分子表达与成釉细胞瘤生物学特性的关系

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