Lnc-1708对体外人骨髓间充质干细胞成骨分化的抑制效应

Abstract

【目的】探讨长链非编码RNA-1708（lncRNA-1708）在人骨髓间充质干细胞（hBMSC）成骨分化中的表达差异及其对hBMSC成骨分化的影响。【方法】将购买的3组不同来源的hBMSC进行体外增殖培养，并用实时荧光定量逆转录-多聚酶链反应（qRT-PCR）方法检测3组hBMSC成骨诱导分化前后lncRNA-1708的表达，分析其与hBMSC成骨分化的关系。分别转染lncRNA-1708过表达慢病毒及lncRNA-1708干扰质粒，获得稳定的hBMSC细胞株后成骨诱导分化14d，用qRT-PCR检测Runt相关转录因子2（RUNX2）、碱性磷酸酶（ALP）mRNA的表达并行碱性磷酸酶染色。【结果】相较成骨诱导分化前，3组hBMSC成骨诱导分化7d后lncRNA-1708表达量均降低（P<0.001）。在稳定高表达lncRNA-1708和低表达lncRNA-1708的hBMSC细胞株中lncRNA-1708的表达量较其对应的阴性对照相比有明显变化（lncRNA-1708过表达细胞株：48h，P<0.05；lncRNA-1708低表达细胞株：48h，P<0.01）。与阴性对照组相比，转染过表达lncRNA-1708的hBMSC中成骨相关基因RUNX2、ALP表达水平降低（0.46±0.03vs.1.00±0.02，0.15±0.07vs.1.02±0.28，P均<0.01）。相反，沉默LncRNA-1708的hBMSC中的RUNX2、ALP表达水平与其对应的阴性对照组相比则升高了（1.62±0.18vs.1.00±0.04，1.58±0.11vs.1.01±0.18，P均<0.01）。【结论】LncRNA-1708可能有抑制hBMSC的成骨分化的作用