Ghrelin对脓毒症大鼠肺泡巨噬细胞炎症信号通路Akt、NF-κB和iNOS的影响

Abstract

： 【目的】观察生长激素释放肽（ghrelin）对脓毒症大鼠肺泡巨噬细胞（AM）炎症信号通路蛋白激酶 B （Akt）、核因子-κB（NF-κB）及诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）的影响。【方法】24只SD雄性大鼠随机分为假手术 （Sham）组、脓毒症（CLP）组、ghrelin干预（CLP+ghrelin）组与ghrelin对照（Sham+ghrelin）组。盲肠结扎穿孔（CLP）构建 大鼠脓毒症模型，分别于术后3 h与5 h腹腔注射20 nmol/kg ghrelin进行干预。观察各组肺组织病理改变并评分；从 支气管肺泡灌洗液（BALF）中提取AM，ELISA测定BALF中炎症因子白介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF- α）、白介素-6（IL-6）的水平，qPCR测定AM的IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA的表达水平，免疫荧光、免疫印迹检测AM 的NF-κB p65、IκBα、p-IκBα等NF-κB信号蛋白、Akt、p-Akt等Akt信号蛋白和iNOS蛋白水平。【结果】Ghrelin干预 组肺组织病理学评分［（6.7±0.8）分］、BALF 中 IL-1β［（146±12）pg/mL］和 IL-6［（182±10）pg/mL］分别较脓毒症组 ［（10.3±0.7）分、（263±17）pg/mL和（273±5）pg/mL］降低了35.4%、44.5%和33.3%，组间差异有统计学意义（P<0.05）， ghrelin干预组BALF中TNF-α与脓毒症组差异无统计学意义。Ghrelin干预组AM的IL-1β、TNF-α和IL-6 mRNA的 表达水平分别较脓毒症组下调 54.38%、53.6%和 46.42%（P<0.05），且 ghrelin 干预组 AM 胞核 NF-κB p65 与胞浆 p- IκBα、p-Akt、iNOS 表达较脓毒症组减少，分别减少 32.58%、45.42%、27.6%和 48.33%，组间差异有统计学意义（P< 0.05）。假手术组与ghrelin对照组上述指标差异无统计学意义。【结论】Ghrelin可降低脓毒症大鼠AM炎症调控信号 通路蛋白Akt、NF-κB和iNOS的活性，进而下调AM促炎因子IL-1β、TNF-α和IL-6的表达，减轻脓毒症急性肺损伤