ｍｉＲ－２９ａ促进小鼠子宫内膜的蜕膜化

Abstract

摘 要： 【目的】 探讨微小ＲＮＡ２９ａ（ｍｉＲ－２９ａ）在小鼠子宫内膜基质细胞（ＥＳＣ）蜕膜化中的作用。【方法】 收集孕第１～９天（Ｄ１ ～ Ｄ９）的小鼠子宫，通过实时定量ＰＣＲ（ｑＲＴ－ＰＣＲ）的方法检测小鼠子宫组织中ｍｉＲ－２９ａ的表达；构建去除卵巢及其甾体激素的处理模型，观察甾体激素对ｍｉＲ－２９ａ表达的影响。采用雌二醇（Ｅ２）和孕酮（Ｐ４）对分离培养的小鼠子宫内膜基质细胞进行蜕膜化处理，并通过瞬时转染的方法下调ｍｉＲ－２９ａ的表达，分别收集蜕膜化处理不同时间及干扰前后的细胞，采用ｑＲＴ－ＰＣＲ检测催乳素相关蛋白（ｄＰＲＰ）ｍＲＮＡ的表达，Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ法检测细胞周期蛋白Ｄ３（ｃｙｃｌｉｎ Ｄ３）、孕酮受体（ＰＲ）蛋白的表达。 【结果】 在小鼠妊娠第１～５ 天，子宫组织中的ｍｉＲ－２９ａ 表达量较低，随着蜕膜化的进程（妊娠第６～９天），ｍｉＲ－２９ａ的表达量均显著性增加（与妊娠Ｄ１相比）；在去除卵巢及其甾体激素的处理模型中，一旦给予雌孕激素刺激，ｍｉＲ－２９ａ的表达量显著增加；在小鼠子宫内膜基质细胞体外诱导蜕膜化过程中，ｑＲＴ－ＰＣＲ结果显示ｄＰＲＰ ｍＲＮＡ的表达以及ｍｉＲ－２９ａ的表达随着蜕膜化时间的延长逐渐升高（与２４ ｈ相比），Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ法显示蜕膜化标志分子ｃｙｃｌｉｎ Ｄ３、ＰＲ的表达也随着蜕膜化时间的延长逐渐升高；转染下调ｍｉＲ－２９ａ后，蜕膜化标志分子及ｍｉＲ－２９ａ的表达也相应下降。【结论】 妊娠早期ｍｉＲ－２９ａ表达于母胎界面，且受子宫内膜蜕膜化的影响，说明ｍｉＲ－２９ａ具有促进子宫内膜蜕膜化的作用