Resumo da comunicação apresentado ao XII Congresso Nacional de Medicina Nuclear, 12-14 Novembro 2009, Mealhad

Abrantes, A. M.

Botelho, M. F.

Casalta-Lopes, J.

Gonçalves, C.

Laranjo, M.

Oliveiros, B.

Rio, J.

Sarmento-Ribeiro, A. B.

Acta Médica Portuguesa

Estudo Geral

320www.actamedicaportuguesa.com
ORAL PRESENTATIONS
Realizamos duas aquisições sequenciais, a primeira (A1) com
o dobro do tempo por vista (20 s/vista/60 vistas) a segunda
(A2) com o tempo de aquisição de 10 s/vista/60 vistas.
A A1 foi processada pelo WBR e a A2 pelo Xpress3.
O conjunto de 60 estudos foram processados utilizando o
software de Cedars-Sinai (QGS e QPS) com determinação
da FEVE, VTD, VTS e quantificação da perfusão por terri-
tórios vasculares determinando SSS, SRS, assim como a
extensão e gravidade as lesões (%).
Foi utilizado o teste t de Student emparelhado e o coefi-
ciente de correlação para análise estatística dos diferentes
parâmetros nestas duas populações.
Os cortes tomográficos foram ainda analisados e classifi-
cados qualitativamente em melhor, pior ou igual sendo
Xpress3 considerado a referencia
Resultados: Na apreciação qualitativa dos resultados não
foram significativas as diferenças. Foram considerados de
igual e boa qualidade 22 estudos.
Com o Xpress3 foram consideradas melhores qualidades
de imagem em quatro estudos.
Em 4 estudos em repouso o Xpress3 revelou pior qualidade.
Em nenhum dos estudos a apreciação das imagens se
repercutiu na alteração do relatório final.
A análise quantitativa por territórios vasculares analisando
as áreas de lesão, gravidade das lesões, SSS e SRS revelou:
Relativamente à análise dos Scores não foram encontradas
diferenças estatisticamente significativas (p > 0.05).
Na análise da extensão e gravidade das lesões apenas se
encontraram pequenas diferenças nos estudos em repouso
no território da DA para a extensão e no território da CX para
a gravidade, no entanto sem repercussão na análise global.
Os restantes parâmetros analisados não mostraram diferen-
ças estatisticamente significativas:
Conclusão: Os bons resultados obtidos neste estudo ani-
ma-nos o prosseguimento do trabalho para atingir uma
população representativa em numero e em variabilidade
de padrões gamagráficos.
OP13
EFEITO DOS MODULADORES DE MDR
EM LINHAS CELULARES DE ADENOCARCINOMA
COLO-RECTAL
J. CASALTA-LOPES, A.M. ABRANTES, J. RIO, M.
LARANJO, B. OLIVEIROS, C. GONÇALVES, A.B.
SARMENTO-RIBEIRO, M.F. BOTELHO
Instituto de Biofísica e Biomatemática. Instituto de Bioquímica.
Faculdade de Medicina da Universidade de Coimbra. Coimbra. Por-
tugal
Introdução: A multi-resistência a fármacos (do inglês
Multidrug Resistance – MDR) define-se pela resistência
celular a diferentes compostos, não relacionados estru-
turalmente. Um dos mecanismos de MDR descritos é a
diminuição da acumulação de fármacos no interior celular
por aumento da expressão de sistemas de efluxo. Dentro
destes, os mais comuns são a expressão de proteínas como
a glicoproteína-P (Pgp), a Multiple Drug Resistance-Re-
lated Protein (MRP) e a Lung Resistance-Related Pro-
tein (LRP). Estas proteínas conferem resistência a uma
gama semelhante de substratos, embora apresentem meca-
nismos de captação e localizações celulares diferentes. O
verapamil é um modulador dos canais de cálcio do tipo L e
substrato conhecido da Pgp. A L-butionina-sulfoximina
(BSO) é um inibidor da γ-glutamilcisteína sintetase e pode
ser usado como inibidor da MRP1 a nível celular. Neste
estudo pretendemos comparar a dinâmica de transporte
de 99mTc-Sestamibi para uma linha celular resistente de
adenocarcinoma colo-rectal, na presença e ausência de
moduladores de MDR, o verapamil e a BSO, e comparar
simultaneamente com uma linha sensível.
Material e métodos: A expressão de proteínas MDR (Pgp,
MRP-1 e LRP) foi avaliada numa linha celular de adeno-
carcinoma colo-rectal sensível (ATCC-WiDr) e numa resis-
tente (ATCC-LS1034) utilizando citometria de fluxo. A ex-
pressão de Pgp foi também analisada usando western blot-
ting. A dinâmica de transporte celular foi analisada na pre-
sença e ausência dos moduladores verapamil e BSO, atra-
vés de estudos de retenção com 99mTc-Sestamibi após
incubação com os fármacos anteriormente referidos, para
diferentes períodos de tempo (10 e 60 minutos) e concen-
trações (10, 25, 50 e 100 µM). Para isso incubaram-se as
células durante 60 minutos com 99mTc-Sestamibi, sendo
lavadas e ressuspensas em meio sem actividade ao fim
desse tempo. Foram colhidas amostras cujo metabolismo
foi parado e que foram centrifugadas para obtenção da
percentagem de retenção através da medição em contador
de poço calibrado para 140 keV. Os estudos de retenção
foram também efectuados usando LigandTracer® Yellow
(Ridgeview Instruments AB, Uppsala-Sweden), um equipa-
mento que permite a obtenção de curvas de retenção con-
tínuas.
Resultados: Os resultados de citometria de fluxo mostraram
uma expressão de Pgp e MRP-1 significativamente supe-
rior (p < 0,05) na linha celular resistente, quando comparada
com a sensível, que foram confirmados por western blot-
ting. A percentagem de retenção de 99mTc-Sestamibi foi
significativamente menor (p < 0,05) na linha celular resis-
tente. Nas células resistentes incubadas com moduladores
MDR não se verificaram diferenças estatisticamente signi-
ficativas (p < 0,05) quando consideradas as curvas no
global. No entanto, para os primeiros minutos de expe-
riência, verificam-se diferenças (p < 0,05) na percentagem
retenção com a utilização dos moduladores, sendo esta
superior nas células incubadas.
Conclusões: Os dados obtidos até à data sugerem que os
EVEF
RBW sv 3sserpX
DTV
RBW sv 3sserpX
STV
RBW sv 3sserpX
p 50,0> 50,0> 50,0>
r %19 %89 %79
321 www.actamedicaportuguesa.com
ORAL PRESENTATIONS
moduladores estudados deverão ser utilizados imediata-
mente antes da administração de citostáticos.
OP14
TIROGLOBULINA NEGATIVA NA PRESENÇA DE
TECIDO TIROIDEU RESIDUAL
Em Doentes com Carcinoma Diferenciado da Tiróide
R. MACEDO, J. CORREIA, F. AZEVEDO-SILVA, A.
ALBUQUERQUE, G. COSTA, J.M. PEDROSO-LIMA
Serviço de Medicina Nuclear. Hospitais da Universidade de Coimbra.
Coimbra. Portugal
Introdução: A tiroglobulina (Tg) é um excelente marcador
tumoral, amplamente utilizado no seguimento de doentes
com carcinoma diferenciado da tiróide de origem folicular
(CDTOF) já operados, desde que os anticorpos anti-
tiroglobulina (TgAb) sejam negativos. É exclusivamente
produzida por células de carcinoma diferenciado da tiróide
e também por tecido tiroideu normal, nomeadamente pelo
resíduo tiroideu após tiroidectomia. A técnica imagiológica
mais sensível para detectar in vivo a presença de tecido
tiroideu residual após tiroidectomia total é a cintigrafia
obtida após tratamento com I-131.
Objectivo: O objectivo deste estudo é avaliar a incidência
de doentes com CDTOF que apresentem valores indoseá-
veis de Tg e de TgAb na presença de remanescente tiroideu
documentado pela cintigrafia após tratamento ablativo.
Materiais e métodos: Entre Janeiro de 2007 e Março de
2009 foram referenciados ao nosso Serviço, para terapêutica
ablativa com I-131, 96 doentes com CDTOF de baixo risco,
78 do sexo feminino e 18 do sexo masculino, com idades
compreendidas entre os 17 e os 76 anos (média 47,75 ± 13,2
anos). A actividade administrada de I-131 a cada doente
foi de aproximadamente 3700MBq (100 mCi) e todos os
tratamentos foram realizados sob TSH recombinante
(rhTSH), de acordo com o protocolo recomendado. O I-131
foi administrado no terceiro dia, a Tg e os TgAb foram
determinados no quinto dia e a cintigrafia realizada entre o
sétimo e o 10º dia após a primeira das duas injecções
intramusculares de 0.9 mg de rhTSH. A Tg é considerada
como negativa/indoseável abaixo de 0,2 ng/ml e os TgAb
abaixo dos 20 UI/ml.
Resultados: Nove dos 96 doentes apresentavam valores
negativos de Tg e de TgAb apesar da cintigrafia evidenciar
claramente captação de I-131 a nível cervical, que relacio-
námos com tecido tiroideu residual. Não se observaram
alterações cintigráficas sugestivas de metástases nesta
população.
Conclusão: Foi encontrado um número significativo de
doentes nesta amostra (9,4%) que apresentavam valores
de Tg/TgAb negativos, apesar da presença de remanes-
cente tiroideu identificado na cintigrafia pós-tratamento.
Este facto sugere que um valor indoseável de Tg durante
o seguimento, mesmo quando efectuado sob rhTSH, não
pode ser usado para garantir a eficácia da terapêutica abla-
tiva com I-131 destes doentes. Estes resultados levantam
ainda a questão da eficácia do doseamento da Tg na
avaliação de eventual recorrência local ou de metástases
neste grupo de doentes.
OP15
A UTILIZAÇÃO DE 99MTC-HL-91 NA AVALIAÇÃO
DA HIPÓXIA TUMORAL EM ADENOCARCINOMA
CORLORECTAL
Da Síntese Química aos Estudos In Vitro, In Vivo e Ex
Vivo
A.M. ABRANTES, E. SERRA, C. GONÇALVES, M.
LARANJO, A. SARMENTO-RIBEIRO, A. ROCHA-
GONÇALVES, M.F. BOTELHO
Instituto de Biofísica e Biomatemática. Centro de Investigação
em Meio Ambiente. Genética e Oncobiologia. Departamento de
Química. Instituto de Bioquímica. Faculdade de Medicina da Uni-
versidade de Coimbra. Coimbra. Portugal
O adenocarcinoma colorectal constitui a principal causa
de morte por cancro em Portugal. Uma das causas de resis-
tência ao tratamento desta patologia é a presença de hipó-
xia intratumoral. A hipóxia apresenta-se como um estado
de reduzida pressão parcial de oxigénio nos tecidos, sendo
que nos tumores sólidos, é uma característica comum e
possui um forte impacto ao nível biológico sendo de
extrema importância para a compreensão da progressão
tumoral. Diferentes métodos para a quantificação e detec-
ção de hipóxia têm sido desenvolvidos desde os anos 80;
no entanto, e tendo em conta o seu carácter invasivo, é de
extrema importância a contribuição da Medicina Nuclear
através do desenvolvimento de marcadores de hipoxia.
Objectivos: Correlacionar a captação do radiofármaco
99mTc-HL-91 in vitro e in vivo com alterações moleculares
resultantes da hipóxia.
Material e métodos: Para a avaliação da hipóxia tumoral,
foi sintetizado o ligando 99mTc-HL-91. Com este radiofár-
maco foram realizados estudos in vitro e ex vivo com recur-
so a citometria de fluxo para a caracterização do ambiente
redox intracelular de células de adenocarcinoma colo-rec-
tal. Realizámos igualmente, estudos in vivo, num modelo
animal de xenotransplante em ratinhos Balb/c nu/nu, o
que nos permitiu avaliar a biodistribuição do radiofármaco
e calcular as razões tumor/músculo em imagens funcionais
obtidas após administração do 99mTc-HL-91.
Resultados e Discussão: Após a síntese e optimização da
marcação do radiofármaco, os estudos in vitro mostraram
que a sua captação pelas células incubadas em ambiente
hipóxico era significativamente maior do que quando em
nor-móxia (p < 0,0001). Os estudos de citometria de fluxo
confirmaram que as células incubadas em ambiente com
baixo nível de oxigénio apresentavam um meio interno hipó-
xico e a viabilidade celular estudada com a dupla marcação
com anexina-V e iodeto de propídeo mostrou que não havia
diferenças significativas entre as duas condições. Porém
em relação às ROS, e quantificação de aductos proteicos
derivados do pimonidazol, verificou-se a existência de dife-
renças estatisticamente significativas entre as condições


Efeito dos Moduladores de MDR em Linhas Celulares de Adenocarcinoma Colo-Rectal

http://estudogeral.sib.uc.pt/jspui/bitstream/10316/13745/1/Efeito%20dos%20Moduladores%20de%20MDR.pdf

Efeito dos Moduladores de MDR em Linhas Celulares de Adenocarcinoma Colo-Rectal

Abstract

Similar works

Full text

Available Versions

Estudo Geral

Estudo Geral