A identificação e a quantificação de fitormônios em matrizes complexas, como biomassa de microalgas, pelo método atualmente utilizado, envolvem várias etapas de preparo da amostra, muitos consumíveis e análise por cromatografia de ultra‑alta eficiência (UHPLC) acoplada à espectrometria de massas (MS). Visando a simplificar e reduzir o custo analítico, este trabalho propõe um método que envolve etapas de extração, purificação, concentração e quantificação de fitormônios em um único extrato de biomassa de microalga, com a utilização de cartucho SPE C18 por UHPLC acoplado a detector de arranjo de diodos (PDA). As fontes de biomassas constaram de três microalgas cultivadas em diferentes condições. O método apresentou boa linearidade para o ácido 3‑indolaético (AIA) e o ácido salicílico (AS), principais alvos de interesse deste trabalho, com coeficiente de determinação (R2) > 0,98. Análise de biomassa de algas crescendo isoladamente ou em cocultivo demonstrou que o método é sensível para detectar variações de concentrações de AIA e AS em função das condições de crescimento e competição entre elas
