La Organización Mundial de la Salud estima que dos terceras partes de la población mundial menor de 50 años está infectada por el virus del Herpes simplex tipo 1 (HSV1). El HSV-1 es capaz de infectar las neuronas de los mamíferos, en la cual ingresa en estado de latencia de por vida o pueden reactivarse ante eventos de estrés, lo que conlleva a la replicación del material genético viral y la consecuente producción de nuevos virus infectivos. Los antivirales actualmente disponibles no son capaces de eliminar los herpesvirus latentes y cepas resistentes a las drogas de primera elección. Debido a ello es necesario buscar nuevos fármacos o estrategias capaces de eliminar la latencia y la producción de nuevos virus en las células infectadas. Una de las estrategias actualmente utilizadas es la terapia génica, basada en el sistema CRISPRCas9. Sin embargo, actualmente los vectores virales y no virales utilizados para la administración de los componentes del sistema presentan ciertos retos. Ante esta
situación, los vectores virales como los bacteriófagos filamentosos, ofrecen ventajas: no se integran en el genoma de las células eucariotas, son estables, seguros, se los puede modificar genéticamente, poseen mayor capacidad de empaquetamiento de
genoma y son fáciles de producir. En este trabajo se construyeron bacteriófagos filamentosos recombinantes transportadores de un sistema CRISPR-Cas9 con gRNAs únicos y dobles, capaces de inhibir el ciclo viral del HSV-1. Los fagómidos desarrollados fueron evaluados mediante transfección e infección con HSV-1 de las células HEK293T, observándose que independientemente al número de gRNAs, el sistema CRISPR-Cas9 fue capaz de inhibir la producción de nuevos HSV-1. Los vectores derivados del fago M13 fueron capaces de empaquetar fagómidos de hasta 9290 pares de bases (pb) y un rendimiento de 1011 a 1013 VGC/mL.CONACYT - Consejo Nacional de Ciencia y TecnologíaPROCIENCI