33 p.El sistema inmunitario innato utiliza los llamados receptores tipo Toll (TLR) para reconocer patrones moleculares asociados a patógenos (PAMPs) y peligros (DAMPs). Diferentes subpoblaciones de linfocitos B expresan TLRs que inducen producción de inmunoglobulinas y promueven la respuesta adaptativa. Estudios previos del laboratorio de inmunobiología demuestran que los TLRs extracelulares TLR2 y TLR4 interfieren en la viabilidad, proliferación y diferenciación de células B en pulmón de ratón neonatal. Como continuación de estos resultados, planteamos la hipótesis de que los TLRs intracelulares (TLR3, 7 y 9) interfieren en la homeostasis de las células B. Nuestro objetivo fue demostrar la presencia de estos TLRs en las células B del pulmón y demostrar cambios en la viabilidad, proliferación y diferenciación celular después de estimular estos TLRs con ligandos, así como cuantificar los niveles totales de IgM producidos por las células estimuladas. Realizamos un análisis ex vivo para evaluar la expresión de los TLRs intracelulares en estas células e hicimos cultivos celulares para estimular las células B con ligandos de TLR3, 7 y 9. Utilizamos citometría de flujo para analizar cambios en los parámetros de viabilidad, proliferación y diferenciación. Determinamos los niveles de IgM en los sobrenadantes de los cultivos utilizando la técnica ELISA. Nuestro estudio demostró la presencia de los TLRs intracelulares en las células B del pulmón neonatal y su implicación en la viabilidad y proliferación. No observamos efectos significativos en la diferenciación, solo se encontraron diferencias en la producción de IgM en células de bazo estimuladas con el ligando de TLR7.The innate immune system utilizes receptors so-called Toll-like receptors (TLRs) to recognize molecular patterns associated with pathogens (PAMPs) and dangers (DAMPs). Different subpopulations of B lymphocytes express TLRs that induce immunoglobulin production and promote adaptive response. Previous studies from the immunobiology laboratory have shown that extracellular TLRs, TLR2 and TLR4, interfere with the viability, proliferation, and differentiation of B cells in the neonatal mouse lung. Building upon these results, we hypothesized that intracellular TLRs (TLR3, 7, and 9) also interfere with B cell homeostasis. Our objective was to demonstrate the presence of these TLRs in lung B cells and to show changes in cell viability, proliferation, and differentiation after stimulating these TLRs with ligands, as well as to quantify the total levels of IgM produced by the stimulated cells. We performed an ex vivo analysis to evaluate the expression of intracellular TLRs in these cells and conducted cell cultures to stimulate B cells with TLR3, 7, and 9 ligands. We used flow cytometry to analyze changes in viability, proliferation, and differentiation parameters. We determined IgM levels in the culture supernatants using the ELISA technique. Our study demonstrated the presence of intracellular TLRs in neonatal lung B cells and their involvement in viability and proliferation. We did not observe significant effects on differentiation, except for differences in IgM production in spleen cells stimulated with the TLR7 ligand.Máster Universitario en Microbiología Aplicada a la Salud Pública e Investigación en Enfermedades Infecciosas (M138
