Inicjacja i stabilizacja kultur tkankowych milinu (Campsis radicans (L.) Seem.)

Abstract

A trumpet creeper (Campsis radicans) is a very decorative shrub propagated vegetatively through cuttings. So far, there is no available information on micropropagation of this beautiful species. Determination of the optimal sterilization methods as well as types and concentrations of plant growth regulators as medium constituents is one of the most important factors of successful micropropagation. With the aim of optimization of in vitro initiation and multiplication of C. radicans, the effect of different methods of disinfection and terms of explants isolation on contamination rate of cultures as well as the influence of cytokinins on growth and branching of shoots was studied. The cytokinins used in the experiments were: benzyladenine (BA), isopentenyl adenine (2-iP) and kinetin (KIN). The obtained results show that contamination rate is a very significant problem to overcome in order to initiate tissue cultures of C. radicans. The best results were observed when explants were excised in spring (May), shortly after the vegetation had started (88% contamination rate). Soaking initial the fragments in a mixture solution of Topsin M 500SC and streptomycine for 12 hours decreased the contamination rate of explants from 100 to 94%. The shoot tips are more suitable to establish the tissue culture of a trumpet creeper, in comparison to nodes with axillary buds. The multiplication rate after two subcultures was 2.6–3.7 for shoot tips (depending on the media) and 1.9–2.1 for nodes. The cytokinins used in the experiment had a significant influence on multiplication rate of C. radicans. The highest number of good quality shoots was obtained on the media supplemented with KIN in concentration of 2 mg˙dm-3Milin (Campsis radicans) to bardzo dekoracyjny krzew, który rozmnaża się wegetatywnie za pomocą sadzonek. Obecnie nie ma informacji dotyczących mikrorozmnażania tej pięknej rośliny. Określenie najlepszej metody dezynfekcji oraz optymalnego rodzaju i stężenia regulatorów wzrostu w pożywce to jedne z najważniejszych czynników udanego mikrorozmnażania. W celu optymalizacji inicjacji oraz rozmnażania w warunkach in vitro C. radicans badano wpływ różnych metod dezynfekcji i terminów pobierania eksplantatów na poziom zakażeń oraz wpływ cytokinin na wzrost i rozkrzewianie pędów milinu. W badaniach wykorzystano następujące cytokininy: benzyloadeninę (BA), izopentenyloadeninę (2-iP) i kinetynę (KIN). Uzyskane wyniki wskazują, Że zakażenia to bardzo poważny problem przy inicjacji kultur tkankowych milinu. Najlepsze rezultaty uzyskano, gdy eksplantaty inicjalne były pobierane w maju (wiosną), krótko po rozpoczęciu wegetacji (88% zakażonych kultur). Moczenie fragmentów inicjalnych w mieszaninie Topsin M 500SC oraz streptomycyny przez 12 godzin zmniejszyło procent zakażeń z 100 do 94. Stwierdzono też, Że do inicjacji i stabilizacji kultur milinu bardziej nadają się wierzchołki pędów niż węzły. Współczynnik rozmnażania po dwóch pasażach wyniósł2,6–3,7 dla wierzchołków pędów (w zależności od pożywki) oraz 1,9–2,1 dla węzłów. Cytokininy użyte w doświadczeniu miały znaczący wpływ na rozmnażanie C. radicans. Najwięcej dobrej jakości pędów uzyskano na pożywce zawierającej KIN w stężeniu 2 mg˙dm-3

    Similar works