Pasteurellosis is an infectious disease causing severe damage to livestock and poultry since it leads to animals’ death, including sheep of all ages. In this study, we developed a sensitive, specific and accurate PCR method for detecting P. multocida in Phan Rang sheep using FKMT1/RKMT1 primers targeted to the KMT1 gene of P. multocida. The PCR-based method was used to detect the KMT1 gene from 104 copies of the KMT1-bearing plasmid. The method’s specificity was demonstrated by the successful amplification of KMT1 from the mixture containing other DNA of Gram-negative bacteria, such as E. coli or M. haemolytica. In particular, with the present method, we successfully detected P. multocida with crude DNA obtained from P. multocida or nasal swabs of pasteurellosis-suspected sheep samples treated in a TE buffer containing 0.1% TritonX-100. This is the first report on using a PCR-based method for detecting P. multocida from Phan Rang sheep, and it can serve as the basis for an effective procedure to diagnose pasteurellosis in sheep.Tụ huyết trùng là một bệnh truyền nhiễm có thể gây thiệt hại nghiêm trọng cho chăn nuôi gia súc, gia cầm nếu không được chẩn đoán và điều trị kịp thời. Vì vậy, trong nghiên cứu này chúng tôi đã phát triển phương pháp PCR có độ nhạy, độ đặc hiệu và độ chính xác cao để phát hiện sự có mặt của vi khuẩn P. multocida, một trong những tác nhân gây bệnh tụ huyết trùng trên cừu Phan Rang. Gen KMT1 của vi khuẩn P. multocida được nhân lên bằng cặp mồi đặc hiệu FKMT1/RKMT1 ở nồng độ khoảng 104 bản sao của plasmid mang gen đích. Phản ứng PCR không bị ảnh hưởng khi có mặt DNA của một số vi khuẩn Gram âm khác như E. coli hay M. haemolytica. Đặc biệt, với phương pháp PCR, chúng tôi đã phát hiện sự có mặt của vi khuẩn P. multocida từ mẫu DNA thô thu được bằng xử lý mẫu vi khuẩn/mẫu dịch ngoáy mũi của cừu nghi nhiễm bệnh trong đệm TE chứa 0,1% TritonX-100 mà không cần tinh sạch DNA tổng số. Đây là nghiên cứu đầu tiên công bố một phương pháp xác định sự có mặt của P. multocida trên cừu Phan Rang và là cơ sở để xây dựng quy trình chẩn đoán hiệu quả nhằm góp phần kiểm soát bệnh tụ huyết trùng trên đối tượng này
