The development of new ionization methods has allowed the
establishment of mass spectrometry as analytical tool for the
characterization of biomolecules, becoming an essential technique
for the detection of modified amino acids in natural and
recombinant proteins. Besides, this technique constitute a
promising alternative for peptide and protein sequencing. Here,
we describe the development of this technique in the last 20
years and the most advanced equipments nowadays used for protein
studies.
RESUMEN
El desarrollo de nuevos metodos de ionizacion ha permitido a la espectrometria de masas establecerse como tecnica de analisis de biomoleculas. Actualmente constituye una tecnica insustituible para la deteccion de aminoacidos modificados en proteinas naturales y recombinantes y una alternativa prometedora para la secuenciacion de peptidos y proteinas. En este trabajo se describe el desarrollo de esta tecnica en los ultimos 20 anos y la instrumentacion mas empleada actualmente para el estudio de proteinas.
Desde la decada del 50, la espectrometria de masas (EM) era ya una reconocida herramienta en la elucidacion de estructuras de compuestos organicos(1), caracterizada por una alta exactitud en las mediciones y una alta sensibilidad.
Sin embargo, hasta la decada del 80 la contribucion de esta tecnica a la elucidacion de la estructura primaria de las proteinas fue limitada(2, 3), pues aun para peptidos pequenos se requiere de una extensa derivacion (para conferirles volatilidad) y de sucesivos pasos de extraccion o purificacion del derivado. Estas razones, hicieron impracticable esta tecnica como via para la secuenciacion de proteinas de forma rutinaria.
En los ultimos anos se han logrado dos avances importantes que permiten la aplicacion progresiva de la espectrometria de masas a las biomoleculas y en particular a las proteinas. En primer lugar, el diseno de novedosos metodos de ionizacion y en segundo lugar, la introduccion de mejoras tecnologicas en los analizadores ya existentes
