Evaluación del efecto de los factores embriotróficos a diferentes tensiones de oxígeno en cultivo in vitro sobre la tasa de desarrollo embrionario hasta la etapa de Blastocisto en Alpacas

Abstract

El estudio se realizó en el Centro de Innovación y Producción Quimsachata – Lampa – Puno; con el objetivo de evaluar el efecto de factores embriotróficos (EGF e IGF-I) y diferentes tensiones de oxígeno (6% y 20%) en cultivo in vitro sobre la tasa de desarrollo embrionario hasta la etapa de blastocisto en alpacas; para lo cual se recolectaron 215 ovarios procedentes de alpacas beneficiadas en el Camal Municipal de Nuñoa, los mismos fueron trasladados en solución salina+ATB a una temperatura de 37°C en termos de boca ancha. De los ovarios se colectaron 1156 ovocitos, de los cuales se seleccionaron 1051. Los ovocitos selectos fueron divididos en cinco grupos: 205 para el grupo 1 EGF 6% de oxígeno, 219 para el grupo 2 EGF 20% de oxígeno, 206 para el grupo 3 IGF-I 6% de oxígeno, 210 para el grupo 4 IGF-I 20% de oxígeno y para el grupo control 211 ovocitos. Todos los grupos fueron madurados con medio TCM-199 suplementados con piruvato de sodio, glutamina, gentamicina, suero fetal bovino, estradiol, hormona luteinizante, folículo estimulante y sometidos a la incubadora a una temperatura de 38.5°C, 5% de CO2, mayor humedad relativa por 32 horas. Por otra parte, en la fertilización in vitro se trabajó con espermatozoides colectados por maniquí y diluidos con dilutor y capacitados con heparina, penicilamina, hipotaurina y epinefrina. Los ovocitos maduros fueron desnudados parcialmente por pipeteo suave y colocados en 80 uL de medio de fecundación y luego se procedió con inseminación de espermatozoides capacitados bajo incubación por 10 horas. Pasadas las 10 horas los presuntos cigotos fueron colocados en medio KSOM suplementados con los factores embriotróficos a diferente tensión de oxígeno por 48 horas. Los resultados que se obtuvieron fue una tasa de clivaje para el primer grupo de 24.9%, segundo grupo 5.9%, tercer grupo 20.4 %, cuarto grupo 11.4% y para el grupo control 15.6%. Pasadas las 48 horas post primera evaluación se cambió al segundo cultivo embrionario SOF suplementado con los factores embriotróficos a diferente tensión de oxígeno hasta el día 7; del cual se logró una tasa de blastocisto para el primer grupo de 14.15%, segundo grupo 5.48%, tercer grupo 18.45%, cuarto grupo 6.67% y para el grupo control 2.84%. En conclusión, los resultados sugieren la adición de los factores embriotróficos a los medios de cultivo embrionario in vitro y una baja tensión de oxígeno al 6% son favorables para el desarrollo embrionario en alpacas.Tesi