Бриштен, А.М.

Василевич, И.В.

Repository of Polessky State University (Репозиторий Полесского государственного университета)

181  Представленные результаты показали значимую положительную корреляцию между значения-ми ферритина и лейкоцитов (r=0,337), которые, в свою очередь, значимо коррелируют с уровнем С-реактивного белка (СРБ) (r=0,420). Взаимосвязь не случайна, так как СРБ – это белок острой фазы, уровень которого, как и количество лейкоцитов, увеличивается при воспалительных реакци-ях.  Значимые различия были найдены между уровнями ферритина и гемоглобина (r=0,614), кото-рый значимо взаимосвязан с уровнем железа (r=0,370). Ферритин является внутриклеточным бел-ком-депо, который накапливает железо внутри клетки, а гемоглобин его использует как необхо-димый структурный компонент. С помощью железа в составе гемоглобина обеспечивается транс-порт кислорода из легких к тканям: молекула гема, благодаря атому Fe2+ обладает способностью присоединять и отдавать молекулу кислорода. Выводы. Полученные результаты позволили сделать вывод, что уровень сывороточного фер-ритина является показателем воспалительного процесса. Это диагностически важно для монито-ринга заболеваний инфекционного генеза. Кроме того, определение концентрации ферритина в сыворотке крови является значимым маркером определения запасов железа в организме человека.  Список использованных источников 1. Воробьева О.И., Шабалов Н.П., Кудрявцева Е.А. Ферритин – белок, играющий важную роль в жизне-деятельности организма. // Вестник новых медицинских технологий. – 2010. – Т. 17. – №. 2. – С. 22-25. 2. Горошинская И.А., Касаткин В.Ф., Тарнопольская О.В., Малейко М.Л., Геворкян Ю.А., Немашкалова Л.А., Изменения показателей обмена железа в крови больных раком желудка. Хирургия. Журнал им. Н.И. Пирогова. 2015;(5):29−34. 3. Зыкова И.Н., Мещерякова Н.В., Шик Л.П. Ферритин в норме и патологии. // Сибирский медицинский журнал (Иркутск). – 2009. – №. 5. – С. 78-82. 4. Иванов А.А., Светличный Ю.М. Ферритин: молекулярная биология, функции и значение в клиниче-ской практике // Клиницист. – 2012. – Т. 6. – №. 2. – С. 4-10.   УДК 66.021:615.38 ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ СТАДИЙ ПРЕДВАРИТЕЛЬНОГО  КОНЦЕНТРИРОВАНИЯ И ДИАФИЛЬТРАЦИИ МЕТОДА ТАНГЕНЦИАЛЬНОЙ  УЛЬТРАФИЛЬТРАЦИИ ПРИ ПРОИЗВОДСТВЕ АЛЬБУМИНА  А.М. Бриштен, И.В. Василевич, 5 курс Научный руководитель – Н.В. Водчиц, зав. отраслевой лабораторией ˮДНК и клеточных тех-нологий в растениеводстве и животноводстве“ Полесский государственный университет Научный руководитель – Е.В. Бачмага, зав. ОППЛС филиала ГУ ˮРНПЦ ТиМБ“  Введение. В последние годы ультрафильтрация является эффективным способом разделения и концентрирования фракций крови в ходе приготовления препарата альбумина [2].  Для фракционирования донорской плазмы применяются осаждающие агенты (этанол, риванол, полиэтиленгликоль, сульфат аммония и т.д.) или хроматографические методы, при использовании которых возникают проблемы с удалением осаждающих агентов или хроматографических элемен-тов, а также с концентрированием конечного белкового раствора [2]. Ультрафильтрация является удобным методом по сравнению с другими методиками, привлекает своей простотой, высокой производительностью и экономичностью, стабильностью и бережной обработкой, а также позво-ляет получить продукт улучшенного качества при снижении себестоимости [1, с. 74]. На стадии предварительного концентрирования достигается очистка на начальном этапе, а так-же снижение объема раствора альбумина, что уменьшает объем воды и затрачиваемое время на стадию диафильтрации. Тем временем стадия диафильтрации требует поддерживания объема рас-твора альбумина на постоянном уровне добавлением освобожденной от пирогенов воды [2]. При тангенциальной ультрафильтрации направления подачи среды и фильтрации перпендику-лярны. В результате часть фильтруемой среды проходит через мембраны как фильтрат, а основная часть потока выходит из системы в рабочую емкость, затем вновь поступает в фильтрующий кон-182  тур. При таком режиме имеет место самоочищение фильтрационного модуля, что значительно увеличивает продолжительность его эксплуатации [3, с. 79]. Цель данной работы – дать оценку эффективности стадий предварительной концентрирования и диафильтрации метода тангенциальной ультрафильтрации при производстве альбумина  Методика и объекты исследования. Исследования были проведены на базе филиала ГУ ˮРеспубликанский научно-практический центр трансфузиологии и медицинских биотехнологий“.  Исходным сырьем для стадии предварительного концентрирования являлся раствор альбумина (промежуточный продукт), полученный из плазмы доноров Брестской области, с pH 7,2–7,5 и тем-пературой (5±1) °С. Исходным сырьем для стадии диафильтрации являлся раствор альбумина (промежуточный продукт) с показателем преломления 1,36–1,3620, pH 7,2–7,5 и температурой (5±1) °С.  Процесс ультрафильтрации проводили на ультрафильтрационной кассетной система PELLICON®, Millipore. Исследования проводились с периодичностью один раз в неделю в соответствии с календарным планом производства. Избыточное давление регулировалось с помощью вентилей и контролиро-валось манометрами. Значение показателя температуры фиксировалось логером. Данные показа-тели должны находиться в необходимом диапазоне значений для предотвращения денатурации альбумина. Контроль концентрации раствора осуществлялся при исследовании показания прелом-ления раствора на рефрактометре. Значение скорости мешалки устанавливалось не более 60 об/мин для предотвращения вспенивания. Проба на содержание белка в пермеате (проба с 20% ТХУ – трихлоруксусная кислота) проводилась в мерной емкости (допустима слабая опалесценция, а образование осадка указывает на нарушение целостности мембраны).  Результаты и их обсуждение. Было проведено трехкратное предварительное концентрирова-ние и диафильтрация трех серий раствора альбумина с повторностью раз в неделю.  Показатели ультрафильтрационной системы и раствора альбумина на стадии предварительного концентрирования представлены в Таблице 1.  Таблица 1 – Показатели ультрафильтрационной системы и раствора альбумина на стадии пред-варительного концентрирования   Показатель Критерии  приемлемости Номер загрузки 1023 1123 1223 Дата проведения 06.03.23 13.03.23 20.03.23 Поверка рефрактометра Проводится раз в год 18.05.22 18.05.22 18.05.22 Калибровка рефрактометра Проводится в соот-ветствии с ТНПА Проведена Проведена Проведена Температура р-ра, °С 5±1 5,8 5,9 5,3 Объем раствора альбумина, л. 61,15 60,28 71,2 Скорость вращения мешалки, об/мин Не более 60 60 60 60 Избыточное давление на входе, МПа 0,1–0,2 0,12 0,15 0,12 Избыточное давление на выходе, Мпа 0,07–0,17 0,09 0,12 0,09 Проба с 20% ТХУ отрицательная отрицат. отрицат. отрицат. Предварительное концентрирование до показания рефрактометра 1,36–1,3620 1,3605 1,3613 1,3608 Объем раствора альбумина, л. 23,0 22,0 24,0  Значения показателей указывают на пригодность раствора альбумина для проведения дальней-ших стадий ультрафильтрации. Показатели ультрафильтрационной системы и раствора альбумина на стадии диафильтрации представлен в Таблице 2.   183  Таблица 2. – Показатели ультрафильтрационной системы и раствора альбумина на стадии  диафильтрации   Показатель Критерии приемлемости Номер загрузки 1023 1123 1223 Дата проведения 06.03.23 13.03.23 20.03.23 Поверка рефрактометра Проводится раз в год 18.05.22 18.05.22 18.05.22 Калибровка рефрактометра Проводится в соответ-ствии с ТНПА Проведена Проведена Проведена Температура р-ра, °С 5±1 5,6 5,8 5,1 Объем раствора альбумина, л. 23,0 22,0 24,0 Объем воды высокоочищен-ной, л. Не менее 10 объемов к объему раствора альбу-мина 230 220 240 Температура воды высоко-очищенной, °С 5±1 °С 4,5 5,1 5,3 Скорость вращения мешалки, об/мин Не более 60 60 60 60 Избыточное давление на вхо-де, МПа 0,1–0,2 0,11 0,15 0,12 Избыточное давление на вы-ходе, МПа 0,07–0,17 0,08 0,12 0,09 Проба с 20% ТХУ отрицательная отрицат. отрицат. отрицат. Контроль содержания спирта в пермеате по рефрактометру 1,333±0,002 1,333 1,332 1,332  Полученные результаты не выходят за рамки допустимых пределов и соответствуют требова-ниям нормативных документов. Проба с 20% ТХУ не дала положительного результата, что свиде-тельствует о целостности мембраны. Давление и температура находились в необходимом диапа-зоне, что позволило предотвратить денатурацию альбумина. Значения показателей преломления также находились в нужном диапазоне. Это значит, что были достигнуты необходимые концен-трации альбумина в растворе, а также, что концентрация спирта была снижена до нуля.  Выводы. Метод тангенциальной ультрафильтрации позволяет получить препарат альбумина с необходимыми показателями, значительно уменьшив затраты высокочищенной воды и времени. Результаты исследований могут быть использованы для валидации процесса тангенциальной уль-трафильтрации и включения его в ГФ РБ.  Список использованных источников 1. Евтушенков, А. Н. Введение в биотехнологию: Курс лекций:/ А. Н. Евтушенков, Ю. К. Фомичев. – Мн. : БГУ, 2002. – 105 с. 2. Обработка растворов альбумина и иммуноглобулина с помощью ультрафильтрационной системы «ПЕЛЛИКОН» [Электронный ресурс]: техн. бюллетень – Режим доступа http://ecolabmicrotex.ru/. – Дата доступа: 28.03.2023. 3. Применение ультрафильтрации для концентрирования и очистки антигенов / А. В. Комиссаров [и др.] // Проблемы особо опасных инфекций. – 2015 – № 1 – C. 79–84.    

Оценка эффективности стадий предварительного концентрирования и диафильтрации метода тангенциальной ультрафильтрации при производстве альбумина

https://rep.polessu.by/bitstream/123456789/28823/1/Otsenka.pdf

Оценка эффективности стадий предварительного концентрирования и диафильтрации метода тангенциальной ультрафильтрации при производстве альбумина

Abstract

Similar works

Full text

Available Versions

Repository of Polessky State University (Репозиторий Полесского государственного университета)