Hinokio, Kenji

Iwasa, Takeshi

Kagawa, Tomohiro

Kuwahara, Akira

Noguchi, Hiroki

Suto, Ayako

Takeda, Asuka

Yamamoto, Shota

Yamamoto, Yuri

Yano, Yuya

Yasui, Toshiyuki

Yoshida, Kanako

Japanese

Objective : The effects of oocyte activation with a Ca ionophore and roscovitine (Ca+R), a selective inhibitor of M-phase promoting factor, on unfertilized oocytes after intracytoplasmic sperm injection (ICSI) or testicular sperm extraction (TESE)-ICSI were evaluated. Method : Oocytes without pronuclei at 18 hours after ICSI were judged to be unfertilized and were exposed to the Ca ionophore A23187 (5 μM) with or without roscovitine (50 μM). The activation rate was measured 3, 7, and 18 hours later. Oocytes with two polar bodies and two pronuclei with a sperm tail were judged to have been activated. Results : At 18 hours, the activation rates in the control, Ca ionophore, and Ca+R groups were 3.5% (4 / 112), 26.9% (7 / 26), and 32.1% (17 / 53), respectively. The activation rate of the Ca+R group was significantly higher than that of the control and similar to that of the Ca ionophore group. Among the oocytes that remained unfertilized after TESE-ICSI, the activation rates of the Ca ionophore and Ca+R groups were 22.2% (2 / 9) and 43.8% (7 / 16), respectively. Conclusions : Sequential treatment with an Ca ionophore and roscovitine activates oocytes that remain unfertilized after ICSI. In TESE-ICSI, the activation rate tended to be increased by the co-administration of roscovitine with a Ca ionophore

Tokushima University Institutional Repository

様式(11) こで、申請者らはより安全な人為的卵活性化法として MPF の選択的阻害薬であるロスコビチンに着目した。 本研究ではヒト胚を用いてロスコビチンと Ca イオノファを併用した人為的卵活性化法の有効性を検討した。ICSI 治療後に未受精となった廃棄予定の胚を用い、5μM の Ca イオノファで 5 分間処理した後に 50μM のロスコビチンを含む培養液中で 5 時間培養することにより人為的卵活性化をおこなった。2 前核 2 極体を有する卵子を活性化卵と定義した。得られた結果は以下の通りである。 １） 卵活性化率は、Ca イオノファ単独群では 26.9%（7/26）、ロスコビチン・Ca イオノファ併用群では 32.1%（17/53）であり、活性化処理をしないコントロール群 3.5%（4/112）と比較し有意に高い結果が得られた。（p＜0.05） ２） 精巣内精子回収術（Testicular sperm extraction、TESE）の精子を用いた ICSI 症例における卵活性化率は、Ca イオノファ単独群 22.1%（2/9）よりロスコビチン併用群 43.8%（7/16）の方が高い傾向にあった。 ３） TESE の精子を用いた ICSI 症例では、ロスコビチン併用群で卵活性化作用が長く持続する傾向にあった。  以上より Ca イオノファにロスコビチンを併用することで、MPF活性の持続的低下が起こり、卵が活性化される可能性が示唆された。これは今後生殖医療における有用な治療として臨床的意義が大きく、学位授与に値すると判定した。   

Activation with a Ca ionophore and roscovitine is effective in terms of fertilization, especially in the TESE-ICSI treated cases.

https://repo.lib.tokushima-u.ac.jp/files/public/11/118372/20230630145411493805/k3739_review.pdf

顕微授精後のヒト未受精卵に対するカルシウムイオノファとロスコビチンを併用した卵活性化の有用性

顕微授精後のヒト未受精卵に対するカルシウムイオノファとロスコビチンを併用した卵活性化の有用性

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