The objective of this study was to evaluate three internal cryoprotectants to preserve semen of striped catfish (Pseudoplatystoma magdaleniatum). The cryoprotectants tested were: dimethylsulfoxide (DMSO), dimethylacetamide (DMA) and ethylene glycol (ETG) at two inclusion percentages (5 and 10%), mixed with 6% glucose, 3% skim milk powder, and 0.4% vitamin E. Five males in the spermiation phase were induced with Ovaprim® (0.4 ml/kg). The semen was diluted in the cryoprotective solution (1: 3) in 2.5 ml tubes, frozen in nitrogen vapors and thawed at 35°C for 90 seconds. A 3x2 factorial design was used, and the control treatment was fresh semen (SF). Total motility (Mt), type of motility total progressivity, and spermatic velocities were evaluated in fresh, pre-frozen and post-thawed semen using the Sperm Class Analyzer (SCA®) software. The SF volume was 6.1 ± 4.3 ml, with Mt of 72.6 ± 17.1%, activation of 31.2 ± 2.1 seconds and sperm concentration of 54.7 ± 22.9 million/μl. In the pre-frozen semen, the cryoprotectant (p <0.05) and the percentage of inclusion (p <0.01) -but not their interaction- had a significant negative effect on Mt, curvilinear velocity (VCL), and linear velocity (VSL); whereas in thawed semen only the interaction of the factors (p <0.05) was significant for Mt, static sperm percentages and VCL. The Mt decreased between 36-67% in pre-frozen semen and between 74-86% in thawed semen compared to SF. These results suggest that 5 or 10% inclusion levels of DMSO, DMA, and ETG, in combination with 3% powdered milk, 6% glucose, and 0.4% vitamin E are viable alternatives to cryopreserve semen of striped catfish.El objetivo fue criopreservar semen de bagre rayado Pseudoplatystoma magdaleniatum con tres crioprotectores internos diferentes: dimetilsulfóxido (DMSO), dimetilacetamida (DMA) y etilenglicol (ETG) a dos porcentajes de inclusiones (5 y 10%), combinados con glucosa 6%, leche en polvo descremada 3% y vitamina E (0,4%). Cinco machos en fase de espermiación fueron inducidos con 0,4 ml de Ovaprim®/Kg. El semen fue diluido en la solución crioprotectora (1:3) en tubos de 2,5 ml, congelado en vapores de nitrógeno y descongelado a 35°C durante 90 segundos. El análisis estadístico incluyó un diseño factorial 3x2 y semen fresco (SF) como tratamiento testigo. En semen fresco, precongelado y descongelado se evaluó la movilidad total (Mt), tipos de movilidad, progresividad total y velocidades espermáticas con la ayuda de Sperm Class Analyzer SCA®. El SF registró volumen de 6,1±4,3 ml, Mt de 72,6±17,1%, activación de 31,2±2,1 segundos y concentración espermática de 54,7±22,9 millones/μl. En semen precongelado, el crioprotector (p<0,05) y porcentaje de inclusión (p<0,01), pero no su interacción, tuvieron un efecto significativo en la Mt, velocidad curvilínea (VCL) y velocidad lineal (VSL); mientras que en semen descongelado sólo la interacción de los factores (p<0,05) fue significativa en Mt, porcentajes de espermatozoide estáticos y VCL. La Mt cayó entre 36-67% en semen precongelado y entre 7486% en semen descongelado con relación a SF. Los resultados sugieren que DMSO, DMA y ETG incluidos a 5 o 10%, combinados con leche en polvo 3%, glucosa 6% y vitamina E 0,4% son alternativas viables de criopreservación del semen de bagre rayado