Crioconservación de yemas de microtubérculos de papa Solanum tuberosum ssp. andigena mediante desecado de tejidos

Abstract

At the Corporación de Investigación Agropecuaria Corpoica, C.I. Tibaitatá, the cryoconservation of microtubers buds was evaluated in two potato accessions of Solanum tuberosum ssp. andigena, C.C.C. 4318 (carriza) and C.C.C. 4981 (guata negra), from the Colombian Central Collection by using the dried bud methodology. This methodology had two steps, the preliminary one or adjustment and the main one. In the main step, the tissue drying was made with sterile air flow for 30 minutes, cryoconservation in liquid nitrogen at -196°C during 1 day, water bath thawing at 37°C for 3 minutes and recuperation culture medium (100% MS + 8% sucrose + 2 g/L activated charcoal) during 7 days in dark, then the cultured medium was changed (100% MS + 0.04 mg/L kinetin + 0.1mg/L gibberellic acid). A completely randomized experimental design with 2 accessions, 4 treatments, 10 replications and 10 buds, was used. The survival was evaluated at 7, 14 and 30 days. At the same time, the tetrazolium test on seeds was adapted at 0.5% a 25°C for 24 hours, and evaluated after 14 and 30 days. In this bioassay, the survival evaluation of the buds was difficult possibly due to the effect of culture medium and environmental factors. The final result was loss of survival at 30 days, probably because the recovery conditions were not suitable. En la Corporación de Investigación Agropecuaria Corpoica, C.I. Tibaitatá, se evaluó la crioconservación de yemas de microtubérculos en dos accesiones de papa Solanum tuberosum ssp. andigena de la Colección Central Colombiana: C.C.C. 4318 (carriza) y C.C.C. 4981 (guata negra) mediante la metodología del desecado de yemas. Esta metodología tuvo dos etapas: la preliminar o de ajuste y la principal. En la principal, el secado se hizo con flujo de aire estéril durante 30 minutos, crioconservación en nitrógeno líquido a -196°C durante un día, descongelamiento en baño maría a 37°C durante 3 minutos y recuperación en medio de cultivo (100% MS + 8% sacarosa + 2 g/L carbón activado) durante siete días en oscuridad; luego, el medio de cultivo se cambió (100% MS + 0,04 mg/L kinetina + 0,1mg/L ácido giberélico). El diseño experimental fue al azar: dos accesiones, cuatro tratamientos, diez repeticiones y diez yemas. Se evaluó sobrevivencia a 7, 14 y 30 días. Paralelamente se adaptó la prueba de tetrazolio en semillas al 0,5% a 25°C durante 24 horas, y se evaluó a los 14 y 30 días; en esta prueba se dificultó la evaluación de la sobrevivencia de las yemas posiblemente por efecto del medio de cultivo y los factores ambientales; el resultado final fue pérdida de sobrevivencia a los 30 días, posiblemente porque las condiciones de recuperación no fueron aptas.