Department of BiochemistryKatedra biochemieFaculty of SciencePřírodovědecká fakult

Křížková, Jitka

CU Digital Repository

oponentský posudek na diplomovou práci Jitky KřížkovéV diplomové práci nazvané,,Cytochrome P450 1A subfamily induction by selectedíIavonoidsu. se autorka zabývá studiem vlivu rrybraných flavonoidů na expresi cytoclrromůP4-50 iAi a 1A2 u potkanů premedikovaných zvolenými flavonoidy. Jitka Křížkaváse zaměřila zejména na indukci enzymů v gastrointestinálním traktu a játrech'Při práci na tomto tématu autorka veimi dobře zviádia Širokou Škáiu technik (izolacemikrosomální frakce, stanovení základnich parametrů' SDS elektroforézav polyakrylamidovém gelu, imunodetekční techniky i fluorimetrická stanoveni}. kdy nezřídkabylo nutné velmi trpělivě optimalizovat a ověřovat podminky jednotlivých stanorrení. JitkaKřížková byla též schopna ziskaná experimentálni data spráwě vyhodnotit a interpretovat'Diplomová práce je přehledně členěna a stránkový rozsah jednotlivých oddílůje v1n,.ážený. Úvod,. ktery je srozumitelně sepsán" seznamuje čtenáře se základními pojmyi scučasnj;m stavem znalostí ve studované oblasti. Výsledky jscu prezentovány ťorrncutabu1ek, graffr a obrázlď, z nichŽ je zřejmé, k čemu autorka v práci dospěla. Diskuse jeadekvátnř získaným výsledkům. Součástí práce je i závěr stručně sumarizujíci dosaženévýsiedky Diplomová práce obsahuje i i i literárních ocikazů' coŽ spoiu s ťaktem, že je psánav anglickém l*y." svědčí o autorčině zaujetí studovanou problematikou. Po formální astylistické stránce je práce vypracována velmi pečlivě, s minimem gramatických chyb.Z hlediska odborné úrovně a zpracováni předkládanou práci hodnotím jaka velnrikvalitni. v niž autorka splnila q'týčené cíle.K práci mám následující připomínky a dotazy:1) otlrazky 4.8' 4'10 a4.12 na stranách 53 - 55 d*monstrující elekÍroťoretické rozdě|eníproteinů mikrosomálních frakcich nejsou opatřeny standardem molei<ulovýchhmotností' ale pouze odkazem na zónu odpovídající sledovanému C\?'2) Funkce CYP je závislá na donaci elek1ronů z NADPH:CYP-oxidoredukÍasy. Jelikožbyly vysledné preparáty použity pro měření metabolické aktivity CYP 1A, aniž byreakčnl směs obsahovala přídavek tohcto esenci"álníhc enzymu, pcstrádá diplomovápráce uvedeni hodnot aktivity NADPH: CYP-oxidoreduktasy.3) Po<istatnou část práce na předkiádané dipiomové práci stráviia slečna Křižkováoptimalizací podminek imurrodetekce CYP. Dle mého názoru jsou tyto r{lsledkyv práci prezentovány velmi okrajově.4) vtabulce 4'3 a4,4 na straně 45 a46 prezentujete výsledkil izolaci mikrosomálniehfrakcí jater a střev. Čím si vysvětlujete, že u střevních preparátů nebylo možnostsnovit obsah CYP a tc ani u '::orků zviřat pre:nedik*vaných $-naft*Ílavonern,naringinem či hesperidinem, které vykazovaly obdobný obsah proteinů jako preparátyjaterní?/5) V kapitole 4.2 uvádíte výsledky měření aktivity CYP 1A v jaterních mikrosomálnichpreparátech pomocí nefyziologických substratů 7-ethoxyresorufinui ?.methox}.resorufinu. Jak lze lrysvětlit roedílaý metabolismus těchto dvou substrátůu vzorků zviřatpremedikovaných naringeninem a hesperetinem?Podle mého ú:u:oru předkládaná práce i,yhor,ujepráce a proto doporučuji, aby byla přijata k obhajobě.výborně,Praha 20.5.2006požadavkům kladeným na diplomovéPráci hodnotím klasifikačním stupněmMcr J. Fidlerová

Cytochrome P450 1A subfamily induction by selected flavonoids

https://dspace.cuni.cz/bitstream/handle/20.500.11956/93813/DPPO_2005_2_11310_MDIPL001_165257_0_31496.pdf?sequence=5&isAllowed=y

Cytochrome P450 1A subfamily induction by selected flavonoids

Abstract

Similar works

Full text

Available Versions

CU Digital Repository