Caballero Hernández, Diana Elia

Covarrubias Cardenas, Karina

Orozco Flores, Alonso Alberto

Tamez Guerra, Patricia

Valadéz Lira, José Alberto

Repositorio Academico Digital UANL

III Simposio Nacional de   Ciencias Farmacéuticas y Biomedicina I Simposio Nacional de  Microbiología Aplicada 14 RCFB, Ed. Esp. 1, 2017  Septiembre 1 y 2 2016 Coagulación de plasma humano y actividad citotóxica y apoptótica sobre la línea celular de linfoma L5178Y-R, del extracto de bristles de Megalopyge sp. Karina Covarrubias-Cardenasa,, Patricia Tamez-Guerraa,*, Diana Caballero-Hernándeza,, Alberto Valadez-Liraa y Alonso A. Orozco-Floresa.  aUniversidad Autónoma de Nuevo León, Departamento de Microbiología e Inmunología, Facultad de Ciencias Biológicas, Cd. Universitaria, San Nicolás de los Garza, N. L. México.  66455 *patricia.tamezgr@uanl.edu.mx Palabras clave: Megalopyge opercularis, Lonomia obliqua, orugas urticantes, oruga peluche, Nuevo León, México.  Introducción  Existen de 125-150 mil especies de lepidópteros agrupadas en 80 familias de las cuales 12 poseen la capacidad de provocar lesiones de gravedad al contacto con los humanos, siendo Saturniidae, Limacodidae y Megaloygidae1 las de mayor interés médico. La mayoría de los estudios se centran en Lonomia obliqua, que posee componentes proteicos de gran importancia al presentar actividad anticoagulante, antiapotótica, y citotóxica2. En México, en el año 2015 se presentó un brote de Megalopyge opercularis en zonas focalizadas, con casos de lesiones por contacto recurrentes. Sin embargo, existen pocos estudios de este especie, por lo cual nuestro objetivo fue investigar en mayor detalle las propiedades de M. opercularis con potencial uso en las industrias clínico-farmacéuticas.  Parte experimental.  El extracto de bristles (EB) fue colectado de tegumento y tejido de la oruga, el cual fue re suspendido en buffer de fosfatos salino y sonicado para posteriormente recuperar el sobrenadante por centrifugación. Se evaluó la actividad citotóxica del EB a dosis desde 3.9 hasta 500 µg/mL sobre la línea celular de linfoma murino L5178Y-R mediante la técnica colorimétrica de MTT3, así como la actividad apoptótica mediante la tinción con naranja de acridina y bromuro de etidio4. La visualización se realizó por microscopia de florescencia, usando como control positivo 800 ŋg/mL de actinomicina-D. Para medir la capacidad de coagulación se evaluó el tiempo de recalcificación del plasma sanguíneo solo (control), en contraste con la adición de 500 µg/mL de EB5 al suero, reactivando la coagulación con CaCl2.    Resultados y discusión  En cuanto al estudio de citotoxicidad, el EB mostró una concentración citotóxica media estimada de 308.65 (±188.7-539.4) µg/mL. Los resultados obtenidos se observan en la Fig. 1.     Figura 1. Porcentaje de células apoptóticas con extracto de bristles (EB) de Megalopyge opercularis, actinomicina D (control +) o buffer de fosfatos salino  (control -)  Al evaluar apoptosis, los resultados con el EB mostraron más del 30% de actividad apoptótica en la línea celular L5178Y-R, en comparación a los EB de Lonomia obliqua, con los cuales anteriormente se reportó una actividad anti-apoptótica contra la línea celular Sf-9 de Spodoptera frugiperda6  En el ensayo de coagulación se observó una clara aceleración en el tiempo de coagulación en plasma citratado durante el primer minuto del ensayo con la aplicación del EB (Fig 2), contrario a lo reportado en otros estudios con el extracto de L. obliqua, donde refieren una actividad anticoagulante en los casos registrados de ataque a humanos con larvas de este insecto5.   Figura 2. Actividad de coagulación de plasma humano medida por tiempos de recalcificación, evaluando plasma sanguíneo solo (control) o adicionado con extracto de bristles de M. opercularis   Conclusiones  Se observó que el extracto de bristles de la oruga M. opercularis tiene actividad citotóxica y apoptótica sobre la línea celular L5178Y-R, y coagulante en plasma humano citratado.  Referencias  1. Hossler, E.W. Dermatol Therapy. 2009, 22(4): 353-66 2. Greco, K.N., Mendonça, R.M., Moraes, R.H., Mancini, D.A. y Mendonça, R.Z. Antiviral Res. 2009, 84(1): 84-90 3. Gomez-Flores, R., Quintanilla-Licea, R., Verde-Star, M. J., Morado-Castillo, R., Vázquez-Díaz, D., Tamez-Guerra, R., Tamez-Guerra, P. y Rodríguez-Padilla, C. Phytother Res. 2012, 26 (11): 1632-1636.   4. Katia, M., Mazzoni, F., Carvalho, N. D. De, & Rofatto, H. K.  BMC Proc. 2014, 8 (Suppl 4):p148.  5. Veiga, A.B.G, Antonio F.M, Pinto, Guimaraes, J.A. Thromb Res. 2003 111, 95-101 6. Souza, A. P. B., Peixoto, C. C., Maranga, L., Carvalhal, A. V, Moraes, R. H. P., Mendonc, R. M. Z., Mendonc, R. Z. Biotechnol. Prog. 2005, 21(1):99−105. 050100EB Control (+) Control (-)Apoptosis (%)0.20.220.240.260.280 10 20 30Abs (650nm)Tiempo (min)extractocontrolTratamientos 

Coagulación de plasma humano y actividad citotóxica y apoptótica sobre la línea celular de linfoma L5178Y-R, del extracto de bristles de Megalopyge sp.

Coagulación de plasma humano y actividad citotóxica y apoptótica sobre la línea celular de linfoma L5178Y-R, del extracto de bristles de Megalopyge sp.

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