Se determinó la Dosis Letal Media (DL50) de agroquímicos sobre obreras adultas de Apis mellifera mediante ensayos de toxicidad oral aguda in vitro. Se evaluaron tres tratamientos, cinco concentraciones para cada tratamiento y cinco repeticiones por concentración. Los tratamientos analizados correspondieron a dos insecticidas neurotóxicos sistémicos combinados: Thiametoxam–Lambdacialotrina (TL); Imidacloprid–Lambdacialotrina–Bifentrin (ILB) y al herbicida sistémico hormonal: 2,4 D. Se evaluaron las concentraciones: 2 x 10-3, 2 x 10-4, 2 x 10-5, 2 x 10-6 y 2 x 10-7 microgramos de principio activo por abeja (µg p.a./abeja). Se utilizó dimetoato como control tóxico a 2, 4, 8, 16, 32, y 64 µg p.a./abeja y sacarosa 50 % p/v en agua destilada estéril como control blanco. Se recolectaron abejas pecoreadoras de la piquera de una colmena, sin humo, ubicada en el apiario experimental de la Facultad de Ciencias Agrarias y Forestales, UNLP. Las abejas se anestesiaron con CO2 y se introdujeron en número de 10 por frasco, “unidad experimental”. Luego de 2 horas (h) de ayuno, se alimentaron con 200 μL del tratamiento vehiculizado en sacarosa 50% p/v y a las 5 h, luego del consumo total del tratamiento, se alimentaron ad libitum con sacarosa 50% p/v. Los frascos se mantuvieron en oscuridad a 25°C ± 2°C y 65 % HR. Se registró la mortalidad a 24, 48 y 72 h. Los valores de DL50 obtenidos con PROBIT fueron: TL: 2 x 10-3; 1 x 10-3 µg y mayor a 1 x 10-3 µg p.a./abeja a 24, 48 h y 72 h, considerados “altamente tóxicos” en las categorías de toxicidad propuestas por la International Commission for Bee Botany (ICBB). Para ILB el modelo de regresión lineal no ajustó en los tres tiempos/momentos de observación. 2,4-D arrojó: 7,1 y 3,2 x 10-2 µg p.a./abeja a 24 y 48 h, respectivamente, resultando “moderadamente tóxico” y “altamente tóxicos”, respectivamente. A 72 el modelo no ajustó. La DL50 se calculó con PRISMA. Los valores obtenidos a 24, 48 y 72 h fueron: TL: 4,7; 2,8 y 3,5 x 10-4; ILB: 3,2 x 10-4, 1,7 x 10-4 y 4,3 x 10-5; 2,4D: 1,3 x 10-4 y 1 x 10-4 µg p.a/abeja a 24 y 72 h, valores dentro de la categoría “altamente tóxicos” de los niveles de toxicidad propuestos por la ICBB. A 48 h no ajustó, Los niveles de dimetoato fueron “altamente tóxicos”: 0,28; 0,20 y 0,13 µg p.a/abeja. Se observa que los resultados con PRISMA presentaron un ajuste mayor que los obtenidos con PROBIT. La DL50 de los insecticidas combinados TL y ILB, y el herbicida 2,4-D permitieron determinar a estos productos dentro del rango de “moderadamente y altamente tóxicos” en ensayos in vitro de toxicidad oral aguda. Nuevos análisis son necesarios para evaluar el grado de toxicidad crónica y por contacto, asimismo como la realización de ensayos a campo que permitan actualizar las regulaciones de utilización de estos productos y a su vez, generar planes de contingencia para los apicultores.The Mean Lethal Dose (LD50) of agrochemicals on adult workers of Apis mellifera were determined in vitro using acute oral toxicity tests. Three treatments, five concentrations for treatment and five repetitions per concentration were analyzed. The agrochemicals used are two combined systemic neurotoxic insecticides: Thiamethoxam – Lambdacialothrin (TL); Imidacroprid – Lambdacialothrin – Bifentrin (ILB) and the hormonal systemic herbicide: 2,4 D. The analyzed concentrations were: 2 x 10-3, 2 x 10-4, 2 x 10-5, 2 x 10-6 and 2 x 10-7 micrograms of active ingredient per bee (µg pa/bee). Dimethoate was used as toxic control at 2, 4, 8, 16, 32, and 64 µg p.a./bee concentrations and 50% w/v sucrose in sterile distilled water was used as white control. Foraging bees were collected from the hive door, without smoke, located in the experimental apiary of the Faculty of Agricultural and Forest Sciences, UNLP. The bees were anesthetized with CO2 and introduced in the experimental units in number of 10. After 2 hours (h), they were fed with 200 μL of the treatment carried in 50% w/v sucrose and at 5 h, after treatment total consumption , they were fed ad libitum with 50% w/v sucrose. The experimental units were kept in the dark at 25°C ± 2 and 65% RH. Mortality was recorded at 24, 48 and 72 h. The LD50 values obtained with PROBIT were: TL: 2 x 10-3; 1 x 10-3 µg and greater than 1 x 10-3 µg p.a./bee at 24, 48 h and 72 h, considered "highly toxic" in the toxicity categories proposed by the International Commission for Bee Botany (ICBB); ILB did not adjust in the three observation times, with a value of 0.000 µg p.a./bee; 2,4-D yielded 7.1 and 3.2 x 10-2 µg p.a./bee at 24 and 48 h, respectively, resulting in "moderately and highly toxic", respectively, at 72 h it did not adjust, with a value of 0.000 µg p.a./bee. The DL50 was calculated with PRISMA. The values obtained at 24, 48 and 72 h were: TL: 4.7; 2.8 and 3.5 x 10-4; ILB: 3.2 x 10-4, 1.7 x 10-4 and 4.3 x 10-5; 2.4D: 1.3 x 10-4 and 1 x 10-4 µg pa / bee at 24 and 72 h, values within the “highly toxic” category of the toxicity levels proposed by the ICBB. At 48 h it did not adjust. Dimethoate levels were "highly toxic": 0,28; 0,20 and 0,13 µg p.a/bee. It is observed that the results with PRISMA presented a greater adjustment than those obtained with PROBIT. The LD50 values of the combined insecticides TL and ILB, and the herbicide 2,4-D determined these products within the range of "moderately and highly toxic" in acute oral toxicity in vitro tests. New analyzes are necessary to evaluate chronic and contact toxicity, as well as field tests to update the use regulations for these products and to set up contingency plans for beekeepers.Facultad de Ciencias Agrarias y Forestale
