Enterokoki imaju važnu tehnološku i higijensku ulogu u proizvodnji hrane životinjskog podrijetla. U ovom je istraživanju istražen inhibicijski potencijal soja Enterococcus faecalis 101 iz sirovog mlijeka prema sojevima L. monocytogenes iz hrane. Agar-spot i agar-difuzijskim testom utvrđene su zone inhibicije rasta L. monocytogenes ATCC 7644 i 6 izolata L. monocytogenes iz hrane primjenom neutraliziranog nadtaloga kulture E. faecalis, što može biti rezultat djelovanja enterocina. Smanjenje populacije L. monocytogenes ATCC 7644 za 4 – 5 log zabilježeno je i u tekućim hranilištima primjenom kulture, odnosno nadtaloga. Ovi povoljni preliminarni rezultati preduvjet su za daljnju karakterizaciju soja s obzirom na sintezu enterocina i moguću biozaštitnu ulogu u pokusnoj proizvodnji hrane

Dajana CRK

Nevijo ZDOLEC

Croatian

HRČAK - Portal of Croatian Scientific and Professional Journals

30HRVATSKI VETERINARSKI VJESNIK, 26/2018., 1-2SažetakEnterokoki	 imaju	 važnu	 tehnološku	 i	 higijensku	ulogu	u	 proizvodnji	 hrane	 životinjskog	podrijetla.	U	ovom	je	istraživanju	istražen	inhibicijski	potencijal	soja	Enterococcus faecalis 101	iz	sirovog	mlijeka	prema	sojevima	L. monocytogenes iz	hrane.	Agar-spot	i	agar-difuzijskim	testom	utvrđene	su	zone	inhibicije	rasta	L. monocytogenes ATCC	7644	i	6	izolata	L. monocytogenes iz	hrane	primjenom	neu-traliziranog	nadtaloga	kulture	E. faecalis,	što	može	biti	rezultat	djelovanja	enterocina.	Smanjenje	populacije	L. monocytogenes ATCC	7644	za	4	–	5	log	zabilježeno	je	i	u	tekućim	hranilištima	primjenom	kulture,	odnosno	nadtaloga.	Ovi	povoljni	preliminarni	rezultati	preduvjet	su	za	daljnju	karakterizaciju	soja	s	obzirom	na	sintezu	enterocina	i	moguću	biozaštitnu	ulogu	u	pokusnoj	proizvodnji	hrane.Ključne riječi: Enterococcus faecalis,	enterocin,	Listeria monocytogenes,	hranaAbstractEnterococci	are	important	foodborne	bacteria	from	a	technological	and	hygienic	point	of	view.	In	this	study,	Enterococcus faecalis 101	was	isolated	from	raw	milk	and	subjected	to	testing	of	its	antilisterial	ac-tivity.	Inhibition	zones	were	observed	toward	L. monocytogenes	ATCC	7644	and	6	food-originated	strains	of	L. monocytogenes by	agar	spot	and	agar	diffusion	methods,	by	applying	a	neutralized	supernatant	of	the	strain.	Reduction	of	the	population	of L. monocytogenes ATCC	7644	by	4-5	log	was	found	in	liquid	me-dia	inoculated	with	E. faecalis 101	culture,	and	the	supernatant,	respectively.	These	promising	preliminary	results	are	prerequisites	for	further	characterization	of	the	strain	with	regard	to	enterocin	synthesis	and	its	possible	protective	role	in	experimental	food	production.	Key words: Enterococcus faecalis,	enterocin,	Listeria monocytogenes,	foodAntimikrobni potencijal enterokoka izdvojenih iz sirovog mlijekaThe antimicrobial potential of enterococci isolated from raw milkCrk, D., N. Zdolec*Dajana CRK, dr. med. vet., Veterinarska stanica Vinkovci; dr. sc. Nevijo ZDOLEC, dr. med. vet., izvnaredni profesor, Zavod za higijenu, tehnologiju i sigurnost hrane, Veterinarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu, Hrvatska; *e-mail: nzdolec@vef.hr.UvodMlijeko	je	vrlo	pogodna	podloga	za	razmnožava-nje	većine	vrsta	mikroorganizama,	uključujući	pato-gene	bakterije.	S	druge	strane,	u	sastavu	mikroflore	nalazimo	 i	 poželjne	 bakterije,	 tzv.	 dobre bakterije	koje	mogu	djelovati	 blagotvorno	na	organizam	po-trošača,	 primarno	 putem	 fermentiranih	 mliječnih	proizvoda.	 Tu	 su	 posebno	 važne	 bakterije	mliječne	kiseline	(BMK)	kao	sastavni	dio	prirodne	mikroflore	mlijeka,	koje	svojom	metaboličkom	aktivnošću	utje-ču	i	na	ukupnu	kakvoću	mlijeka	i	fermentiranih	mli-ječnih	proizvoda	(Zdolec,	2009.).	Bakterije	mliječne	kiseline	vrlo	su	heterogena	skupina	gram-pozitivnih	bakterija	s	izrazitom	metaboličkom	aktivnošću	i	mli-ZNANSTVENI I STRUČ NI RADOVIZnanstveni rad31HRVATSKI VETERINARSKI VJESNIK, 26/2018., 1-2ječnom	kiselinom	kao	završnim	i	najvažnijim	produk-tom	(Šušković,	1996.;	Klein	i	sur.,1998.;	Kos,	2001.).	Unutar	skupine	BMK	nalazimo	i	rod	Enterococcus,	pri	čemu	u	hrani	dominiraju	vrste	Enterococcus faecalis	i	 Enterococcus faecium	 (Čanžek	 Majhenić,	 2006.).	Enterokoki	 	 prevladavaju	 u	 probavnom	 traktu	 ljudi	i	 životinja	 i	 do	 prije	 tridesetak	 godina	 smatrani	 su	isključivo	 izvorom	 kontaminacije	 hrane	 (fekalnim	onečišćivačima	ili	bakterijskim	kontaminantima).	No,	postupno	 su	 enterokoki	 prihvaćeni	 kao	 autohtona	populacija	želučano-crijevnog	sustava	zdravih	ljudi	i	životinja	te	dio	fiziološke	mikroflore	sirovog	mlijeka	i	 tradicionalnih	 mliječnih	 proizvoda	 gdje	 pridonose	specifičnosti	 proizvoda	 (Giraffa	 i	 sur.,	 1997;	 Fuller,	1989.;	Franz	i	sur.,	1999.).	 Industrijski	su	vrlo	važni	mikroorganizmi,	 koji	 se	 upotrebljavaju	 kao	 starter,	pomoćne	 ili	 zaštitne	 kulture	 za	 dobivanje	 različitih	fermentiranih	 mliječnih	 proizvoda	 (Leboš	 Pavunc	i	 sur.,	 2013.;	 Gelsomino	 i	 sur.,	 2001;	 Andrighetto	 i	sur.,	2001).	Također	imaju	veliko	higijensko	i	tehno-loško	 značenje	 zbog	 potencijalno	 probiotičkog	 dje-lovanja	 i	 jake	antimikrobne	aktivnosti,	producirajući	enterocine	(Banwo	i	sur.,	2013.;	Laukova,	2012.).	Jedno	 od	 poželjnih	 svojstava	 bakterija	 mliječne	kiseline	 jest,	 dakle,	 antimikrobna	 aktivnost	 prema	bakterijama	 kvarenja	 ili	 patogenim	 bakterijama.	Najvažniji	 je	mehanizam	inhibicije	nepoželjne	mikro-flore	 stvaranje	 organskih	 kiselina	 ili	 pak	 antimik-robnih	 peptida	 poput	 bakteriocina	 (Zdolec,	 2007.).	Enterokoki	koji	pokazuju	ta	svojstva	često	se	mogu	izolirati	iz	hrane,	no	da	bi	se	razmatrali	kao	potenci-jalne	probiotičke	kulture,	moraju	zadovoljiti	kriterije	sigurnosti	poput	 izostanka	virulentnih	faktora,	pre-nosivih	gena	rezistencije	ili	dekarboksilacijske	aktiv-nosti	 (Zdolec,	 2016.).	 Pojedini	 sojevi	 Enterococcus faecalis i	Enterococcus faecium ne	pokazuju	virulen-tna	svojstva,	ne	tvore	biogene	amine	niti	su	otporni	na	 antibiotike,	 pa	 ih	 to	 čini	 potencijalno	primjenjivi-ma	 u	 fermentiranim	 proizvodima.	 Također,	 brojni	enterokoki	produciraju	bakteriocine,	enterocine	koji	mogu	poslužiti	kao	zaštitne	kulture,	posebno	prema	bakteriji	L. monocytogenes (Zdolec	 i	sur.,	2017.).	U	vezi	 s	navedenim,	cilj	 je	ovoga	 rada	bio	 ispitati	 an-timikrobnu	 aktivnost	 enterokoka	 iz	 sirovog	mlijeka	na	modelu	in vitro inhibicije	rasta	različitih	sojeva	L. monocytogenes iz	hrane.	Materijal i metodeIzolacija i identifikacija enterokoka iz mlijekaIzolati	 enterokoka	 (n	 =	 10)	 prikupljeni	 su	 iz	mli-jeka	 u	 prijašnjem	 istraživanju	 (Zdolec	 i	 sur.,	 2016).	Identifikacija	soja	provedena	je	pomoću	MALDI-TOF	masene	spektrometrije	nakon	ekstrakcije	etanolom/mravljom	kiselinom	prema	preporukama	proizvođa-ča	(Bruker	Daltonik,	Bremen,	Njemačka).	Metodolo-gija	identifikacije	opisana	je	u	radu	Dobranić	i	surad-nika	(2016.).	Testiranje antimikrobne aktivnosti Krute podlogeAntimikrobna	 aktivnost	 enterokoka	 određivana	je	 agar-spot	 i	 agar-difuzijskim	 testom	 primjenom	indikatorskog	mikroorganizama	Listeria monocyto-genes ATCC	7644	te		šest	sojeva	L. monocytogenes iz	hrane.	Ukratko,	enterokoki	(n	=	10)	namnažani	su	u	Brain	Hearth	Infusion	(BHI)	bujonu	na	37	°C	tijekom	24	sata.	Dva	mililitra	kulture	potom	je	centrifugira-no	na	10	000	okr./min	tijekom	5	minuta	na	4	°C,	na-kon	čega	su	nadtalozi	odbačeni.Za	 agar-spot	 i	 agar-difuzijski	 test	 korišten	 je	standardni	BHI	agar	te	pokrovni	meki	BHI	agar	(s	0,7	%	agara)	u	koji	su	dodani	indikatorski	mikroorganiz-mi	 (BHI	 bujon,	 37	 °C,	 24	 h).	Nakon	 pripreme	ploča	(tvrdi	BHI	agar	prekriven	s	5	mL	mekog	BHI	agara)	s	 indikatorskim	 mikroorganizmom	 na	 površinu	 je	naneseno	100	 	µL	nadtaloga	kulture	pojedinog	 izo-lata	enterokoka	radi	provjere	inhibicije	rasta	L. mo-nocytogenes. Nakon	 nanošenja	 nadtaloga	 ploče	 su	stavljene	u	hladnjak	tijekom	jednoga	sata	te	potom	inkubirane	na	37	°C	tijekom	24	sata.	Nakon	inkubaci-je	provjerena	je	pojava	zone	inhibicije	rasta	indikator-skog	mikroorganizma.	Za	agar-difuzijski	test	načinjene	su	jažice	u	koje	je	dodano	100	µL	nadtaloga	 i	neutraliziranog	nad-taloga.	 Neutralizacija	 nadtaloga	 provedena	 je	 do-davanjem	10	N	NaOH	pri	čemu	je	pH	podešen	na	7.	Prije	neutralizacije	izmjeren	je	pH	nadtaloga	(pH	510	Eutech	 instruments,	 Nizozemska).	 Nakon	 nanoše-nja	nadtaloga	u	jažice	ploče	su	stavljene	u	hladnjak	tijekom	jednoga	sata	te	potom	inkubirane	na	37	°C	tijekom	 24	 sata.	 Nakon	 inkubiranja	 provjerena	 je	pojava	zone	inhibicije	rasta	indikatorskog	mikroor-ganizma.	Tekuće podlogeOdabrani	 soj	Enterococcus faecalis 101	 korišten	je	za	provjeru	inhibicije	rasta	bakterije	L. monocyto-genes ATCC	7644	u	BHI	 i	MRS	tekućim	hranilištima	(bujonima).	Listeria monocytogenes ATCC	7644	na-mnažana	 je	u	BHI	bujonu	na	37	 	 °C	tijekom	24	sata	te	u	prisutnosti	E. faecalis 101,	odnosno	uz	dodatak	1	mL	nadtaloga	kulture	E. faecalis 101.	Nakon	inkubi-ranja	određivan	je	broj	L. monocytogenes na	Palcam	agaru	(Merck,	Darmstadt,	Njemačka).	 Ista	je	meto-dologija	ponovljena	korištenjem	MRS	bujona.	ZNANSTVENI I STRUČ NI RADOVIZnanstveni rad32HRVATSKI VETERINARSKI VJESNIK, 26/2018., 1-2Rezultati  i raspravaOdabrani	izolati	enterokoka	determinirani	su	po-moću	MALDI-TOF	MS,	kako	je	prikazano	u	tablici	1.Rezultati	 testiranja	 antimikrobne	 aktivnosti	 en-terokoka	 iz	mlijeka	prema	L. monocytogenes ATCC	7644	prikazani	su	u	tablici	2.Ostalih	 6	 indikatorskih	 sojeva	 L. monocytoge-nes iz	hrane	bilo	je	inhibirano	samo	primjenom	soja	oznake	101	(Enterococcus faecalis)	i	nakon	neutrali-zacije	 nadtaloga.	 Temeljem	 tih	 preliminarnih	 rezul-tata	izabran	je	izolat	101	(Enterococcus faecalis 101)	čije	 je	antilisterijsko	djelovanje	provjereno	 i	u	 teku-ćim	hranilištima	(BHI	i	MRS),	a	rezultati	su	prikazani	tablicom	3.Nalaz	enterokoka	u	sirovom	mlijeku	zdravih	kra-va	 je	uobičajen,	što	pokazuju	nedavna	 istraživanja	 i	na	našim	obiteljskim	gospodarstvima	(Zdolec	i	sur.,	2016.).	U	ovom	su	 istraživanju	odabrani	 izolati	 en-terokoka	 iz	sirovog	mlijeka	 radi	utvrđivanja	njihova	inhibicijskog	potencijala	prema	sojevima	bakterije	L. monocytogenes iz	hrane.	 Izolati	enterokoka	podvr-gnuti	su	determinaciji	suvremenom	metodom	MAL-Oznaka soja MALDI-TOF MS Score MALDI-TOF MS21 Enterococcus faecium 2.21222 Enterococcus faecium 2.08223 Enterococcus faecium 1.95824 Enterococcus faecium 2.08926 Enterococcus faecium 2.09627 Enterococcus faecium 1.92128 Enterococcus faecium 2.07829 Enterococcus durans 1.983101 Enterococcus faecalis 2.163102 Enterococcus durans 2.072Oznaka sojaZona inhibicije (+/-)Agar-spot Agar-difuzijski	–	nadtalogAgar-difuzijski	–	neutralizirani	nadtalog21 - - -22 - - -23 + + -24 - - -26 + + +27 + + -28 + + -29 + - -101 + + +102 - - -Tablica 1. Rezultati identifikacije enterokoka metodom MALDI-TOF MS (Bruker Daltonik MALDI Biotyper) Tablica 2. Inhibicija rasta L. monocytogenes ATCC 7644 primjenom nadtaloga kulture enterokoka (n = 10)ZNANSTVENI I STRUČ NI RADOVIZnanstveni rad33HRVATSKI VETERINARSKI VJESNIK, 26/2018., 1-2DI-TOF	masene	spektrometrije	 (ljubaznošću	dr.	 sc.	Snježane	 Kazazić,	 Institut	 Ruđer	 Bošković)	 koja	 se	pokazuje	brzom	i	pouzdanom	metodom	u	rutinskim	identifikacijama	bakterijskih	izolata	iz	hrane	(Pavlovic	i	sur.,	2013.).	Enterococcus faecalis 101	pokazao	 je	u	agar-spot	 i	agar-difuzijskim	testovima	inhibicijsko	djelovanje	prema	referentnom	soju	L. monocytoge-nes te	prema	6	izolata	L. monocytogenes iz	uzora-ka	hrane	životinjskog	podrijetla,	dok	drugi	 ispitivani	sojevi	enterokoka	nisu	pokazali	antagonistički	učinak	prema	 istim	 indikatorskim	 bakterijama.	 Nadalje,	zanimljivi	 su	 naši	 rezultati	 istodobne	 inokulacije	 E. faecalis 101	 i	L. monocytogenes ATCC	7644	u	BHI/MRS	bujonima	gdje	je	evidentno	smanjenje	populaci-je	patogena	u	odnosu	na	bujone	bez	E. faecalis. Osim	toga,	primjena	nadtaloga	(neutraliziran	nadtalog	bez	stanica)	dovela	je	do	još	izraženijeg	smanjenja	broja	L. monocytogenes u	oba	bujona.Općenito,	 bakterije	 mliječne	 kiseline	 inhibiraju	rast	 srodnih	 (gram-pozitivnih)	 bakterija	 primarno	djelovanjem	 svojih	 organskih	 kiselina	 (octena,	mli-ječna),	 a	 potom	 i	 sintezom	 antimikrobnih	 spojeva	poput	bakteriocina	(Lücke,	2000.).	U	našem	je	istra-živanju	inhibicija	rasta	sojeva	L. monocytogenes za-bilježena	i	nakon	neutraliziranja	kiselina	u	nadtalogu	E. faecalis 101	(bez	stanica),	pa	se	može	pretposta-viti	 da	 je	 inhibicija	 nastala	 djelovanjem	 enterocina	ili	 drugog	 inhibitora.	 Brojna	 su	 istraživanja	 primje-ne	 enterocina	 u	 različitim	 proizvodima	 životinjskog	podrijetla	 u	 smislu	 testiranja	 njihova	 djelovanja	 na	umjetno	 inokuliranu	 patogenu	mikrofloru,	 uključu-jući	 bakteriju	L. monocytogenes. Tako	 su	 Yildirim	 i	suradnici	 (2016.)	 inokulirali	 soj	 L. monocytogenes ATCC	7644	(korišten	i	u	našem	istraživanju)	u	steri-lizirano	mlijeko	u	različitim	koncentracijama	zajedno	s	 različitim	koncentracijama	enterocina	KP.	Utvrdili	su	snažno	 inhibirajuće	djelovanje	enterocina,	no	 taj	je	 učinak	bio	obrnuto	proporcionalan	sadržaju	ma-sti	 u	mlijeku	 i	 koncentraciji	 patogena;	 odnosno	 što	je	mlijeko	 imalo	manji	sadržaj	masti	 i	manji	početni	broj	patogena,	enterocin	je	bio	učinkovitiji.	Željeni	je	utjecaj	enterocina	na	L. monocytogenes potvrđen	 i	u	 različitim	mliječnim	 proizvodima,	 poput	 jogurta	 i	različitih	tradicionalnih	 i	 industrijskih	sireva	(Lauko-va,	2012.).	ZaključakEnterococcus faecalis	101	izoliran	iz	sirovog	mli-jeka	 pokazuje	 inhibicijski	 učinak	 na	 sojeve	 L. mo-nocytogenes	 iz	 hrane	 životinjskog	 podrijetla	 što	 je	početna	osnova	 za	daljnju	 karakterizaciju	 soja.	 Pri-mjena	soja	ili	enterocina	u	pokusnoj	proizvodnji	hra-ne	pokazat	će	njihov	doprinos	u	podizanju	mikrobio-loške	sigurnosti	hrane,	posebno	s	obzirom	na	bakte-riju	L. monocytogenes.ZahvalaRad	 je	 dio	 diplomskog	 rada	 Dajane	 Crk	 naslova	„Antimikrobna	aktivnost	enterokoka	 izoliranih	 iz	si-rovog	mlijeka“	(mentor:	doc.	dr.	sc.	Nevijo	Zdolec).	Broj (cfu/mL) L. monocytogenes ATCC 7644BHI MRSL. monocytogenes	ATCC	7644 109 3,5	x	107L. monocytogenes	ATCC	7644	+	E. faecalis 101 105 2	x	103L. monocytogenes	ATCC	7644	+	nadtalog	E.f. 101 <	104 2,8	x	104Tablica 3. Broj L. monocytogenes ATCC 7644 u tekućim hranilištima s Enterococcus faecalis 101 (24 h na 37 °C)Slika 1. Inhibicija rasta L. monocytogenes u agar-spot testu (E. faecalis 101)ZNANSTVENI I STRUČ NI RADOVIZnanstveni rad34HRVATSKI VETERINARSKI VJESNIK, 26/2018., 1-2Autori	 zahvaljuju	 dr.	 sc.	 Snježani	 Kazazić	 (Institut	Ruđer	 Bošković)	 na	 determinaciji	 izolata	 pomoću	MALDI-TOF	 MS	 i	 	 Ani	 Konjević	 (Zavod	 za	 higijenu,	tehnologiju	 i	sigurnost	hrane,	Veterinarski	 fakultet)	na	 tehničkoj	 pomoći	 pri	 provođenju	 laboratorijskih	istraživanja.Literatura               •	 ANDRIGHETTO,	C.,	E.	KNIJFF,	A.	LOMBARDI,	S.	TOR-RIANI,	M.	VANCANNEYT,	K.	KERSTERS,	J.	SWINGS,	F.	 DELLAGLIO	 (2001):	 Phenotypic	 and	 genetic	 di-versity	of	enetrococci	isolated	from	Italian	chees-es.	J.	Dairy	Res.	68,	303-316.•	 BANWO,	K.,	A.	SANNI,	H.	TAN	(2013):	Tehnological	properties	and	probiotic	potencial	of	Enterococcus faecium strains	 isolated	 from	 cow	milk.	 J.	 Appl.	Microbiol.	114,	229-241.•	 ČANŽEK	MAJHENIĆ,	 A.	 (2006):	 Enterokoki:	 ying-yang	microbes.	Mljekarstvo	56,	5-20.•	 DOBRANIĆ,	V.,	S.	KAZAZIĆ,	 I.	FILIPOVIĆ,	N.	MIKU-LEC,	N.	ZDOLEC	(2016):	Composition	of	raw	cow’s	milk	microbiota	 and	 identification	 of	 enterococci	by	 MALDI-TOF	 MS	 –	 short	 communication.	 Vet.	arhiv	86,	581-590.•	 FRANZ,	 C.	M.A.P.,	W.H.	 HOLZAPFEL,	M.E.	 STILES	(1999):	 Enterococci	 at	 the	 crossroads	 of	 food	safety?	Int.	J.	Food	Microbiol.	47,	1-24.•	 FULLER,	R.	(1989):	Probiotics	in	man	and	animals.	J.	Appl.	Bacteriol.	66,	365-378.•	 GELSOMINO,	R.,	M.	VANCANNEYT,	S.	CONDON,	 J.	SWINGS,	T.M.	COGAN	(2001):	Enterococcal	diver-sity	 in	 the	 environment	 of	 an	 Irish	 Cheddar-type	cheesemaking	 factory.	 Int.	 J.	 Food	Microbiol.	 71,	177-188.•	 GIRAFFA,	G.,	D.	CARMINATI,	E.	NEVIANI	(1997):	En-terococci	isolated	from	dairy-products,	A	rewiew	of	 risks	 and	 potencial	 technological	 use.	 J.	 Food	Protect.	60,	732-737.•	 KLEIN,	 G.,	 A.	 PACK,	 C.	 BONAPARTE,	 G.	 REUTER	(1998):	Taxonomy	and	physiology	of	probiotic	lac-tic	acid	bacteria.	Int.	J.	Food	Microbiol.	41,	103-125.•	 KOS,	 B.	 (2001):	 Probiotički	 koncept:	 in	 vitro	istraživanja	 s	 odabranim	 bakterijama	 mliječne	kiseline.	 Disertacija,	 Prehrambeno-biotehnološki	fakultet,	Sveučilište	u	Zagrebu,	Zagreb.•	 LAUKOVA,	A.	(2012):	Potential	applications	of	pro-biotic,	bacteriocin-	producing	enterococci	and	their	bacteriocins.	U:	Lactic	Acid	Bacteria:	Microbiologi-cal	and	Functional	Aspects,	4th	edition;	CRC	Press.	Boca	Raton,	Florida	(39-42).•	 LEBOŠ	 PAVUNC,	 A.,	 B.	 KOS,	 J.	 BEGANOVIĆ,	 K.	UROIĆ,	 D.	 BUČAN,	 J.	 ŠUŠKOVIĆ	 (2013):	 Antibiotic	suspectibility	and	antimicrobial	activity	of	autoch-thonous	starter	cultures	as	safety	parametars	for	fresch	 cheese	 production.	 Mljekarstvo	 63,	 185-194.•	 LÜCKE,	 F.-K.	 (2000): Utilization	 of	 microbes	 to	process	and	preserve	meat.	Meat	Sci.	56,	105-115.•	 PAVLOVIC,	 M.,	 I.	 HUBER,	 R.	 KONRAD,	 U.	 BUSCH	(2013.):	Application	of	MALDI-TOF	MS	for	the	iden-tification	of	food	borne	bacteria.	Open	Microbiol.	J.	7,	135-141.•	 ŠUŠKOVIĆ,	J.	(1996):	Bacterial	growth	and	probiot-ic	activity	of	selected	lactic	acid	bacteria,	PhD	The-sis,	Prehrambeno-	tehnološki	fakultet,	Sveučilište	u	Zagrebu,	Zagreb.•	 YILDIRIM,	 Z.,	 N.	 ÖNCÜL,	 M.	 YILDIRIM,	 Ş.	 KARA-BIYIKLI	 (2016):	Application	of	 lactococcin	BZ	and	enterocin	 KP	 against	 Listeria monocytogenes in	milk	as	biopreservation	agents.	Acta	Alimentaria	45,	486-492.•	 ZDOLEC,	N.	(2007):	Utjecaj	zaštitnih	kultura	i	bak-teriocina	na	sigurnost	i	kakvoću	fermentiranih	ko-basica.	Disertacija.	Veterinarski	fakultet	Zagreb.	•	 ZDOLEC,	 N.	 (2009):	 Dobre	 bakterije	 u	mliječnim	proizvodima.	Mljekarski	list	45,	40-42.•	 ZDOLEC,	N.,	V.	DOBRANIĆ,	I.	BUTKOVIĆ,	A.	KOTURIĆ,	I.	FILIPOVIĆ,	V.	MEDVID	(2016):	Antimicrobial	sus-ceptibility	of	milk	bacteria	from	healthy	and	drug-treated	cow	udder.	Vet.	arhiv	86,	163-172.•	 ZDOLEC,	N.,	M.	ČOP,	V.	DOBRANIĆ	(2017):	Primjena	Enterococcus faecalis iz	mlijeka	u	proizvodnji	tra-jnih	kobasica.	Hrvatski	veterinarski	vjesnik	25,	56-62.	ZNANSTVENI I STRUČ NI RADOVIZnanstveni rad

Antimikrobni potencijal enterokoka izdvojenih iz sirovog mlijeka

Abstract

Similar works

Full text

Available Versions

HRČAK - Portal of Croatian Scientific and Professional Journals