A presente dissertação apresenta, no Capítulo 1, o trabalho desenvolvido na
componente de Investigação e, no Capítulo 2, os conhecimentos e competências
adquiridos durante o estágio em Farmácia Comunitária, realizado na Farmácia São
João, Covilhã, e pretende ser o trabalho final para obtenção do grau de Mestre em
Ciências Farmacêuticas.
Citomegalovírus é um vírus DNA de cadeia dupla, o maior e o mais complexo vírus da
família Herpesviridae sendo considerado um dos agentes infeciosos mais perigosos em
indivíduos imunocomprometidos, no recém-nascido e na mulher grávida. Constitui a
principal causa de infeção congénita provocando malformações no feto e recém-nascido
e constituindo um problema de saúde pública. Após a infeção primária o vírus tem a
capacidade de permanecer no organismo do hospedeiro de forma latente, reativando
depois sem razão aparente específica e podendo causar manifestações clínicas
sintomáticas e recorrentes.
O diagnóstico da infeção por CMV é feito por técnicas virológicas e moleculares para
deteção direta da presença do vírus, ou por metodologias serológicas que detetam uma
resposta imune específica do hospedeiro. No entanto, os métodos de diagnóstico
disponíveis são, muitas vezes, complexos, demorados e dispendiosos, dificultando a sua
utilização em larga escala e como métodos de rastreio. Torna-se, então, importante o
desenvolvimento de um método rápido e eficiente, de baixo custo e com a possibilidade
de adaptação a sistemas de “point-of-care”, que permita o diagnóstico da infeção por
CMV, e uma abordagem efetiva para a prevenção e tratamento das doenças associadas.
Nesse sentido, um grupo de investigação da UBI desenvolveu um imunossensor
eletroquímico descartável, cujo princípio de funcionamento é um imunoensaio do tipo
mpEIA “sandwich” utilizando anticorpos específicos contra a glicoproteína B de CMV.
No trabalho de investigação apresentado no capítulo 1, pretende-se iniciar a segunda
fase de validação do imunossensor, avaliando a sua aplicabilidade a amostras
biológicas. As amostras biológicas utilizadas foram previamente analisadas em
laboratório clínico para pesquisa de DNA de CMV por RT-PCR, sendo conhecido o
resultado relativamente à presença ou ausência de CMV. O ensaio experimental
realizado foi a metodologia mpEIA “sandwich”, que está na base de desenvolvimento
do imunossensor. Os resultados obtidos permitem esboçar valores de “cut-off”,
sensibilidade e especificidade para a técnica. A farmácia Comunitária, pela sua fácil acessibilidade à população em geral e pela
formação e qualificação dos seus colaboradores, é um local privilegiado para a
prestação de cuidados de saúde contribuindo, de uma forma ativa, para a melhoria da
qualidade de vida das populações que servem. O Farmacêutico Comunitário é um
profissional de saúde dotado de conhecimentos técnico-científicos que lhe permitem
estabelecer a ligação medicamento-utente de forma responsável e profissional,
intervindo ativamente na sensibilização para o uso correto e racional dos
medicamentos e outros produtos de saúde, assegurando a sua eficácia e segurança, e
garantindo a máxima qualidade em todos os serviços que presta.
Por forma a permitir que o farmacêutico comunitário desempenhe com rigor e
qualidade as suas funções, a farmácia deve possuir uma estrutura adequada tanto ao
nível das instalações e equipamentos como no que diz respeito aos recursos humanos e
científicos, sistema informático e fontes de informação. Disso se dará conta no Capítulo
2, bem como das atividades desenvolvidas e dos conhecimentos e competências
adquiridos no decurso do estágio em farmácia comunitária.This dissertation presents, in Chapter 1, the work developed at the research component
and, in Chapter 2, the knowledge and skills acquired during the internship in
Community Pharmacy held at Farmácia São João, Covilhã, and intends to be the final
work to obtain the Master's degree in Pharmaceutical Sciences.
Cytomegalovirus is a double-stranded DNA virus, being the largest and most complex
virus of the Herpesviridae family and is considered one of the most dangerous
infectious agents in immunocompromised individuals, newborns and pregnant women.
It is the main cause of congenital infection causing malformations in the fetus and
newborn constituting a public health problem. After primary infection, the virus has
the ability to remain in the host organism latently, reactivating afterwards for no
apparent specific reason and causing symptomatic and recurrent clinical
manifestations.
The diagnosis of CMV infection is made by virological and molecular techniques for the
direct detection of virus presence, or by serological methodologies that detect a specific
host immune response. However, the diagnostic methods available are often complex,
time-consuming and expensive, making it difficult to use on a large scale and as
screening methods. It is therefore important to develop a fast and efficient, low-cost
method with the possibility of adapting to point-of-care systems, which allows the
diagnosis of CMV infection, and an effective approach to the prevention and treatment
of diseases associated with CMV.
In this sense, a research group from UBI developed a disposable electrochemical
immunosensor, operating under the principle of a sandwich mpEIA immunoassay
using specific antibodies against CMV glycoprotein B.
In the present research work, it is intended to proceed to the second phase of validation
of the immunosensor, evaluating its applicability to biological samples. The biological
samples used were previously analyzed in a clinical laboratory to search for CMV DNA
by RT-PCR, the result being known regarding the presence or absence of CMV. The
experimental test carried out was the sandwich mpEIA methodology, which is the basis
for the development of the immunosensor. The results obtained allow to determine cutoff values, sensitivity and specificity for the technique. The Community Pharmacy, due to its easy accessibility to the general population and
the training and qualification of its employees, is a privileged place for the provision of
health care, actively contributing to the improvement of populations quality of life. The
Community Pharmacist is an health professional with technical-scientific knowledge
that allows him to establish the drug-user connection in a responsible and professional
manner, actively intervening in raising awareness of the correct and rational use of
medicines and other health products, ensuring their efficiency and safety, and
guaranteeing maximum quality in all provided services.
In order to allow the community pharmacists to perform their functions with rigor and
quality, the pharmacy must have an adequate structure both in terms of facilities and
equipment and regarding to human and scientific resources, computer system and
information sources. This will be explained in Chapter 2, as well as the activities
developed, and the knowledge and skills acquired during the internship in community
pharmacy
