CSIC - Museo Nacional de Ciencias Naturales (MNCN)
Abstract
Tesis Doctoral inédita leída en la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Ciencias, Departamento de Biología. Esta tesis tiene embargado el acceso al texto completo hasta el 04-08-2023. https://repositorio.uam.es/handle/10486/702468Las biotecnologías reproductivas en las estrategias para la conservación de especies amenazadas facilitan el flujo génico entre poblaciones fragmentadas y contribuyen a mantener la variabilidad genética necesaria para asegurar la viabilidad de las especies. Además, complementan la acción de bancos de recursos genéticos que sirven para ampliar el marco temporal y espacial de la conservación de germoplasma y tejidos somáticos. El desarrollo de biotecnologías reproductivas requiere un conocimiento profundo de la biología reproductiva de cada especie. En particular, conocer las características espermáticas y los factores que afectan a la calidad seminal es esencial para comprender los determinantes de la fertilidad masculina y desarrollar técnicas de reproducción asistida exitosas. En primer lugar, se analizaron los parámetros seminales de gacela Cuvier, gacela dama, gacela dorcas y lince ibérico. Se caracterizaron la morfometría y cinética espermáticas y se examinaron las relaciones entre ellas. Los resultados mostraron que, en las tres especies de gacelas, los espermatozoides con cabezas más pequeñas y elípticas se mueven más rápido y en trayectorias más lineales y progresivas. No encontramos relaciones entre la morfología de los espermatozoides del lince ibérico con parámetros de cinética espermática. La heterogeneidad del eyaculado según la morfometría del espermatozoide de las tres especies de gacela y lince ibérico mostró tres subpoblaciones comunes diferenciadas en tamaño y elipticidad de la cabeza de la célula, longitud de la pieza media del flagelo y longitud de las piezas principal y terminal. La heterogeneidad del eyaculado según las características de natación se evidenció por la presencia de cuatro subpoblaciones espermáticas en el eyaculado de gacela dama, gacela dorcas y lince ibérico, diferenciadas tanto por descriptores de velocidad como de trayectoria. Por otro lado, se examinó la relación entre factores internos, como la variabilidad genética, en las características seminales de las cuatro especies. Asimismo, se examinó el efecto de factores externos, como enfermedades, en el lince ibérico. El análisis interespecífico de las tres especies de gacelas mostró que los espermatozoides de a especie con mayor grado de consanguinidad, la gacela de Cuvier, tenían peor motilidad y mayor porcentaje de morfoanomalías y acrosomas dañados. En el análisis intraespecífico, únicamente en la gacela de Cuvier se apreció una relación significativa e inversa entre consanguinidad y motilidad, lo que sugiere que la calidad seminal se vería afectada a partir de determinado umbral de consanguinidad. La consanguinidad se asoció a espermatozoides con cabezas grandes y redondeadas y flagelos más cortos, además de espermatozoides lentos y menos progresivos. En el lince ibérico, la calidad seminal de machos híbridos, con mayor variabilidad genética, es mejor que la de sus poblaciones parentales endogámicas. La heterocigosidad se relacionó significativa y positivamente con la concentración y número total de espermatozoides, su motilidad y el porcentaje de células morfológicamente normales, así como con un mayor éxito reproductivo. El efecto de la enfermedad renal crónica provocada por hipervitaminosis D afectó a la calidad seminal de los machos en la fase más grave de la enfermedad. Por último, se realizó un ensayo para desarrollar métodos que permitan conservar espermatozoides de lince ibérico en refrigeración para su uso en transporte e inseminación artificial. Se evaluaron varios tratamientos en tres tempera turas (22ºC, 15ºC y 5ºC) y tres medios de incubación (Ham’s F10, TEST con y sin glicerol). Los resultados mostraron que es posible mantener la motilidad de los espermatozoides durante 24 horas de manera sencilla y con mejores valores a lo largo del tiempo en los tratamientos a 22ºC en medios Ham’s F10 y TEST sin glicerol y a 15ºC en los medios TEST con y sin glicerol.Peer reviewe