C3G forma complejos con Bcr-Abl y p38αMAPK en las adhesiones focales en células de leucemia mieloide crónica. Implicaciones en la regulación de la adhesión de las células leucémicas

Abstract

Resumen del trabajo presentado al XXXVI Congreso de la Sociedad Española de Bioquímica y Biología Molecular, celebrado en Madrid (España) del 3 al 6 de septiembre de 2013.C3G y Bcr-Abl forman complejos con las proteínas de adhesión focal CrkL, p 130Cas, Cbl y Abi1 a través de interacciones SH3/SH3-b. La asociaci6n entre C3G y Bcr-Abl disminuye en células de leucemia mieloide crónica (LMC) K562 silenciadas para Abi1 Y p130Cas, lo que sugiere que Abil y pl30Cas son muy relevantes en esta interacción. Por otra parte, el silenciamiento de C3G, Abi1 o Cbl disminuye la adhesión a la fibronectina, mientras que eI silenciamiento de p 130Cas la aumenta. EI análisis mediante arrays de dominios SH3 indican que los dominios SH-b de C3G, Cbl y p130Cas interaccionan directamente con proteínas comunes relacionadas con la regulación de la adhesión y migración celular. Estudios de inmunoprecipitación e inmunofluorescencia revelan que C3G forma complejos con proteínas de las adhesiones focales como la paxilina y FAK y sus formas fosforiladas. Además, C3G, Abil, Cbl y p130Cas regulan la expresión y fosforilación de la paxilina y FAK. Asimismo, p38alfa MAPK también participa en la regulación de la adhesión las células de LMC, interaccionando con C3G, CrkL, FAK y paxilina y regulando la expresión de paxilina, CrkL e integrina alfa5, así como la fosforilación de paxilina. Por otra parte, el doble silenciamiento C3G/p38alfa disminuye la adhesión a fibronectina, de manera similar al silenciamiento individual de cada uno de estos genes. Estos datos sugieren que C3G y p38alfa MAPK actúan a través de una ruta común que regula la adhesión celular en células K562, tal Y como se describió anteriormente en la regulaci6n de la apoptosis. Nuestros resultados indican que la ruta C3G-p38alfaMAPK regula la adhesi6n celular en K562 a través de la interacción con proteínas de las adhesiones focales y Bcr-Abl, modulando la formación de diferentes complejos proteicos de las adhesiones focales.Peer Reviewe