антибиотики, гнилец, пчелы, бактериофаги, стрептомицин, тетрациклин, фоpмалин, щелочь, карболовая кислот

Хрипунов, Е. К.

Undetermined

Repository of Vitebsk State Academy of Veterinary Medicine

ВЛИЯНИЕ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ НА ЧУВСТВИТЕЛЬНЫЕ И УСТОЙЧИВЫЕ К АНТИБИОТИКАМ И БАКТЕРИОФАГУ ФОРМЫ ВОЗБУДИТЕЛЯ АМЕРИКАНСКОГО ГНИЛЬЦАЕ. К. ХРИПУНОВВопросу изучения биологических свойств лекарствен­ноустойчивых форм возбудителей инфекционных болез­ней посвящено значительное число работ. В них указы­вается, что у резистентных к лечебным препаратам микроорганизмов изменяются морфологические, культу­ральные и биохимические свойства, а также отношение к физико-химическим факторам (Лебедева, Воропаева, 1960; Филиппосьян, 1959; Шершевская, 1959).Измененные формы микробов часто вызывают реци­дивы болезни; повышенная устойчивость к химическим веществам снижает эффективность дезинфекции. Одна­ко отношение антибиотико- и фагоустойчивых вариантов бактерцй к дезинфицирующим веществам неодинаковое. По данным Э. Г. Набиева (1964) и Л. Н. Ульянищевой (1959), выживаемость резистентных к антибиотикам ди­зентерийных бактерий во внешней среде и под действием дезинфицирующих растворов выше, чем чувствительных. Вместе с тем А. С. Дгольдина (1961) сообщает, что антибиотикоустойчивые штаммы дезинтерийной и брюш­нотифозной палочки не обладают повышенной устойчи­востью к действию дезинфицирующих веществ.В опытах И. Е. Колуканова (1961) при нагревании и действии дезинфицирующих растворов на кишечноти­фозных микробов результаты получены разные, хотя в большинстве случаев антибиотикоустойчивые штаммы были менее жизнеспособны, чем исходные культуры.Противоречивость данных в литературе указывает на необходимость дальнейшего изучения биологических свойств лекарственнорезистентных форм микробов, в том числе и длительности их сохранения во внешней среде. В связи с этим мы решили установить влияниеУченые записки ВВИ. - 1968. - Т. 20.некоторых физико-химических факторов на лекарствен­норезистентные и чувствительные формы Вас. larvae в сравнительном аспекте.С этой целью в опытах in vitro и in vivo адаптиро­вали Вас. larvae к ряду антибиотиков: стрептомицину, мицерину, тетрациклину, эритромицину, сочетанию стреп­томицина с тетрациклином и эритромицина с мицери- ном. В результате 10 пассажей Вас. larvae на питатель­ных средах с нарастающими дозами указанных анти­биотиков устойчивость этого микроорганизма к стрепто­мицину увеличилась в 403 раза, к мицерину — в 16, тетрациклину — в 4, эритромицину — в 2, к сочетанию эритромицина с мицернном — в 4, стрептомицина с тет­рациклином — в 2 раза. Во всех случаях чувствитель­ность микроорганизмов к антибиотикам определяли методом серийных разведений.Фагоустойчивые формы Вас. larvae получили в про­цессе взаимодействия ларвейного бактериофага с чув­ствительным штаммом Вас. larvae после появления вто­ричного роста в пробирках с полным фаголизисом.В итоге адаптации Вас. larvae к антибиотикам in vivo на пчелиных семьях, пораженных американским гнильцом, в процессе лечения установили, что резистент­ность возбудителя к стрептомицину возросла в 4, к тет­рациклину, эритромицину и мицерину — в 2 раза. При использовании сочетаний антибиотиков и бактериофага образования антибиотико- и фагоустойчивых вариантов Вас. larvae не наблюдалось.У антибиотико- и фагорезистентных форм Вас. larvae отмечейа изменчивость некоторых морфологических (уве­личение палочек, отсутствие цепочек, ослабление по­движности), культуральных (диссоциация и образова­ние S-форм) биохимических свойств (не изменяют глю­козу и молоко).Электронномикроскопическое исследование позволи­ло установить некоторые изменения в морфологии ва­риантов Вас. larvae, устойчивых к стрептомицину и со­четанию стрептомицина с тетрациклином: снижение электроннооптической плотности цитоплазмы, бугристость оболочки (рис. 1, 2, 3, 4).После получения антибиотико- и фагоустойчивых ва­риантов Вас. larvae было изучено их отношение к на­греванию (при разной температуре) и действию химиче-Ученые записки ВВИ. - 1968. - Т. 20.Рис. 1. Чувствительный к антибиотикам вариант Вас. larvae под электронным микроскопом. X 25 000.Рис. 2. Снижение электронооптической плотности цитоплазмы у стрептомициноустойчивых вариантов Вас. larvae, х  25 000.Ученые записки ВВИ. - 1968. - Т. 20.Рис. 3. Изменение морфологии оболочки Вас. larvae, устойчи­вой к сочетанию стрептомицина с тетрациклином. X 25 000.Рис. 4. Изменение структуры Вас. laruae после адаптации к стрептомицину и тетрациклину:1 — снижение плотности цитоплазмы; 2 — участок оболочки с повышен­ной электронооптической плотностью. X 25 000.ских веществ: 5%-ному раствору карболовой кислоты, 3%-ному раствору едкого натра, 4%-ному раствору фор­малина и спирта. При этом обращали внимание на ха­Ученые записки ВВИ. - 1968. - Т. 20.рактер устойчивости вариантов Вас. larvae, полученных in vitro и in vivo.С этой целью двухсуточные агаровые культуры ис­ходных и лекарственноустойчивых вариантов Вас. larvae смывали физиологическим раствором, и после получе­ния достаточной концентрации (2 млрд /мл) микробную взвесь подвергали нагреванию или воздействию хими­ческих веществ. Нагревали культуры в пробирках, по­мещенных в водяную баню, при температуре 60, 80 и 90° в течение 5, 10, 60 и 90 минут.При изучении влияния дезинфицирующих веществ взвесь микробов смешивали с их растворами в соотно­шении 1 : 1 и оставляли при комнатной температуре на 5, 10, 20 минут и на 12, 24 и 48 часов.После окончания нагревания или воздействия хими­ческим веществом культуры высевали на сывороточный мясо-пептонный агар и наблюдали за посевами в тече­ние 7 суток. Появление роста на агаре указывало на жизнеспособность Вас. larvae.Исходный вариант Вас. larvae оставался жизнеспо­собным при нагревании до 60° в течение 90 минут, при 90°— в течение 5 минут; вариант, устойчивый к стрептомици­ну, погибал при 60° в течение 60 минут, а через 90 ми­нут теряли жизнеспособность все остальные устойчивые формы Вас. larvae. При нагревании до 90° все устойчи­вые варианты Вас. larvae погибали в течение 5 минут.При воздействии 5%-ным раствором карболовой кис­лоты, 3%-ным раствором едкого натра и 4%-ным раст­вором формалина гибель антибиотико- и фагоустойчивых форм Bac.Jarvae, полученных в опытах in vitro, наблю­далась в течение 5 минут. Исходные культуры сохра­няли жизнеспособность значительно дольше: в первых двух случаях они погибали через 20, в последнем — через 10 минут.В 96°-ном спирте стрептомициноустойчивые вариан­ты сохранялись 20 минут, мицериноустойчивые — 12 ча­сов, устойчивые к эритромицину, тетрациклину, сочета­нию стрептомицина с тетрациклином, эритромицина с мицерином и к бактериофагу — 24 часа; чувствительные варианты оставались жизнеспособными в течение 48 часов.Варианты Вас. larvae, адаптированные к отдельным антибиотикам в условиях in vivo, при нагревании до 80 иУченые записки ВВИ. - 1968. - Т. 20.90° погибали соответственно через 10 и 5 минут. Анти­биотикочувствительные варианты в течение этого време­ни оставались жизнеспособными.Под действием 5%-ного раствора карболовой кисло­ты, 3%-ного раствора едкого натра и 4%-ного раствора формалина устойчивые формы, полученные in vivo, по­гибали в течение 10 минут, тогда как чувствительные варианты полностью сохраняли жизнеспособность. В 96°-ном спирте гибель устойчивых вариантов наступала через 48 часов; исходные варианты в течение этого вре­мени не погибали.Сравнительная оценка полученных данных показы­вает, что устойчивые формы Вас. larvae, образовавшие­ся in vivo; более устойчивы к физико-химическим факто­рам, чем полученные in vitro.Анализируя результаты опытов, следует отметить, что при образовании антибиотико-и фагорезистентных штам­мов возбудителя американского гнильца не происходит одновременного увеличения их устойчивости к физико­химическим факторам. Это указывает на возможность использовать на пасеках общепринятые средства дезин­фекции (формалин, щелочь, карболовая кислота), не­смотря на выявление антибиотикорезистентных форм возбудителя, американского гнильца.В ы в о д ы1. В опытах in vitro получены антибиотико- и фаго­резистентные формы возбудителя американского гниль­ца пчел. Возрастание устойчивости возбудителя к от­дельным антибиотикам происходит в 2—100 раз быст­рее, чем к их сочетаниям.2. В результате адаптации in vivo . (в пчелиных семьях) повышение устойчивости возбудителя наблюда­лось только при раздельном применении антибиотиков. Использование бактериофага и сочетаний антибиотиков не привело к' образованию устойчивых форм Вас. larvae.3. Антибиотико- и фагорезистентные штаммы Вас. larvae менее устойчивы к физико-химическим факторам, чем их исходные, чувствительные варианты.Ученые записки ВВИ. - 1968. - Т. 20.Д г о л ь д н н а А. С. Чувствительность к дезинфекционным препаратам лекарственно-устойчивых форм возбудителей кишечной инфекции. Мат-лы научи, конференции Киевского научн.-исслед. ин-та эпидемиологии и микробиологии. Киев, 1961.К о  л у к а  н о в  И. Е. Устойчивость микробов кишечнотифозной группы, чувствительных и адаптированных к антибиотикам, к воз­действию физико-химических факторов. «Антибиотики», 1961, № 8.Л е б е д е в а  М. Н., В о р о п а е в а  С. Д. Лекарственная устойчивость микроорганизмов. М., Медгиз, 1960.Н а б и е в Э .  Г. О выживаемости синтомицинорезистентных ди­зентерийных бактерий во внешней среде. «ЖМЭИ», 1964, № 3.У л ь я н и щ е в а  Л. Н. Выживаемость антибиотикоустойчивых палочек дезинтерии в дезинфицирующих растворах, воде и при вы­сушивании. Уч. зап. Горьковского мед. ин-та, вып. 7. Горький, 1959.Ф и л и п п о с ь я н  С. Т. Наследственная изменчивость некото­рых микроорганизмов под действием антибиотиков. «Ж- общ. биол.», 1959, № 6.Ш е р ш е в с к а я  Р. С. Изменчивость дизентерийных бактерий в процессе адаптации их к антибиотикам. «ЖМЭИ», 1959, № 6.Ученые записки ВВИ. - 1968. - Т. 20.

Влияние физико-химических факторов на чувствительные и устойчивые к антибиотикам и бактериофагу формы возбудителя американского гнильца

https://repo.vsavm.by/bitstream/123456789/13020/1/z-1968-20-64-70.pdf

Влияние физико-химических факторов на чувствительные и устойчивые к антибиотикам и бактериофагу формы возбудителя американского гнильца

Abstract

Similar works

Full text

Available Versions

Repository of Vitebsk State Academy of Veterinary Medicine