Este protocolo puede utilizarse para la detección específica de ADN de Corynebacterium bovis obtenido de cultivos puros o de muestras.Estación Experimental Agropecuaria BarilocheFil: Abdala, Alejandra Mariana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Bariloche. Grupo de Sanidad Animal; Argentin

Abdala, Alejandra Mariana

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 Series: Producción Animal  Comunicaciones Técnicas  ISSN: 1667-4006    Ediciones  Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria Centro  Regional Patagonia Norte  Estación Experimental Agropecuaria Bariloche. “Dr. Grenville Morris”     COMUNICACION TECNICA Nº773 AREA PRODUCCIÓN ANIMAL   Protocolo de PCR para la detección de Corynebacterium bovis      Dra. Alejandra Abdala    2022   Protocolo de PCR para la detección de Corynebacterium bovis  Dra. Alejandra Abdala  Grupo de Salud Animal – INTA  CC: 277 (8400) Bariloche e-mail: abdala.alejandra@inta.gob.ar     Adaptado de Duga S, Gobbi A, Asselta R, Crippa L, Tenchini ML, Simonic T, Scanziani E. Analysis of the 16S rRNA gene sequence of the coryneform bacterium associated with hyperkeratotic dermatitis of athymic nude mice and development of a PCR-based detection assay. Mol Cell Probes. 1998;12:191-199.   Este protocolo puede utilizarse para la detección específica de ADN de Corynebacterium bovis obtenido de cultivos puros o de muestras.  Primers utilizados correspondientes al gen 16S ARNr, específicos de Corynebacterium bovis, con un producto de 224 pb.:   CB16SF = 5’ GGT GTG GGG ATC TTC CAC GAT 3’  CB16SR = 5’ TGG GCT TGT TCA CAG GTG GT 3’.  La mezcla de reacción contiene 200 µM de cada dNTP, 0.2 µM de cada primer, 1.2 mM de Mg2+, 1.25 U de Taq ADN polimerasa y 100 ng de AND en un volumen final de 25 µL.                         µL/tubo Primer F (25mM)      0.2    Primer R (25mM)     0.2    dNTPs (10mM)        0.5   Buffer (10X)   2.5   Mg++ (50mM)         0.6   H20    19.75   Taq pol (5U/ml)  0.25  Total por tubo =      24 µL  MIX =   24 µl ADN =  1 µl   Ciclo     95°C 3 min   95°C 30 seg   62°C 30 seg      X 5 72°C 30 seg    95°C 15 seg   62°C   15 seg    X 30  72°C 15 seg   72°C 10min     Nota: Si Ud. usa este protocolo, no olvide citarlo en la bibliografía de la siguiente manera:  Abdala, A. M., Protocolo de PCR para la detección de Corynebacterium bovis  Comunicación Técnica. Área Producción Animal. N°773. INTA Bariloche. ISSN: 1667-4006 

Protocolo de PCR para la detección de Corynebacterium bovis

http://repositorio.inta.gob.ar:80/bitstream/20.500.12123/12651/1/INTA_CRPatagoniaNorte_EEABariloche_Abdala_AM_Protocolo_PCR_Para_Deteccion_Corynebacterium_Bovis.pdf

Protocolo de PCR para la detección de Corynebacterium bovis

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