Universidade de São Paulo. Faculdade de Odontologia
Abstract
Objetivo: O objetivo deste estudo clínico foi quantificar a concentração de DNA e detectar algumas espécies bacterianas de amostras de dentes tratados endodonticamente com periodontite apical após a remoção da guta-percha (S1), após o preparo químico-mecânico na primeira sessão (S2), 5 dias após o preenchimento do canal com solução fisiológica estéril (S3), após reinstrumentação na segunda sessão (S4), e 14 dias após a inserção da medicação intracanal na terceira sessão (S5). Métodos: Quinze dentes tratados endodonticamente foram selecionados. A remoção da guta-percha foi realizada por meio da técnica coroa-ápice. Utilizaram-se limas manuais associadas à clorexidina gel a 2% durante o preparo químico-mecânico. A medicação intracanal selecionada foi à base de hidróxido de cálcio. DNA foi isolado das amostras e foram investigadas 14 espécies bacterianas (primer espécie-específi co16S rDNA). A concentração de DNA foi quantifi cada utilizando o espectrofotômetro NanoDropTM 2000. Resultados: Em todos os casos foram detectadas bactérias, como revelado por meio do primer universal. DNA foi isolado de todas as amostras, com uma concentração média de 4,24 ± 2,9 ng/µL (S1), 3,39 ± 1,54 ng/ µL (S2), 4,0 ± 1,94 ng/µL (S3), 2,66 ± 0,98 ng/µL (S4) e 3,97 ± 2,32 ng/µL (S5). Parvimonas micra e Enterococcus faecalis (S1), P. micra (S2), Porphyromonas endodontalis e E. faecalis (S3), E. faecalis e Prevotella nigrescens (S4/S5) foram as espécies mais frequentemente detectadas. A concentração de DNA diminuiu entre S3 e S4 (p = 0,0256), ao passo que um aumento foi observado entre S4 e S5. Conclusão: Uma ampla variedade de espécies bacterianas foi detectada em canais radiculares de dentes tratados endodonticamente com periodontite apical. Além disso, o uso da medicação intracanal não potencializou a redução da concentração de DNA bacteriano.Aim: The aim of this clinical study was to quantify the concentration of DNA and to detect selected bacterial species from samples of infected root-fi lled teeth with post-treatment apical periodontitis after removal of gutta-percha (S1), after chemo-mechanical preparation at the fi rst appointment (S2), 5 days after the canal was fi lled with sterile physiological solution (S3), after reinstrumentation at the second appointment (S4), and 14 days after an intracanal dressing was placed at the third appointment (S5). Methods: Fifteen root-fi lled teeth were selected. Removal of gutta-percha was performed using the crown-down technique. Chemo-mechanical preparation was performed with hand fi les associated with 2% chlorhexidine gel. An intracanal dressing based on Ca(OH)2 was used. DNA was extracted from the samples and 14 endodontic 16S rDNA species-specifi c primers were tested. The concentration of DNA was quantifi ed using a NanoDropTM 2000 spectrophotometer. Results: Bacteria were present in all cases at all sampling times, as revealed by a universal primer. DNA was isolated from all samples, with an average concentration of 4.24 ± 2.9 ng/µL (S1), 3.39 ± 1.54 ng/µL (S2), 4.0 ± 1.94 ng/µL (S3), 2.66 ± 0.98 ng/µL (S4) and 3.97 ± 2.32 ng/µL (S5). Parvimonas micra and Enterococcus faecalis (S1), P. micra (S2), Porphyromonas endodontalis and E. faecalis (S3), E. faecalis and Prevotella nigrescens (S4/S5) were the species most frequently deteced. DNA concentration reductions were detected between S3 and S4 (p = 0.0256), whereas an increase was found between S4 and S5. Conclusion: A wide variety of bacterial species was detected in root-fi lled teeth with post-treatment apical periodontitis. Moreover, the use of an intracanal dressing was unable to further reduce the concentration of bacterial DNA
