Studies of furunculosis in zebrafish by "Aeromonas salmonicida" subsp. "salmonicida" labeled with the green fluorescent protein (GFP) and with a fluorescent probe of the siderophore amonabactin
[Resumen]: El pez cebra (Danio rerio) es un potencial organismo modelo en el estudio de las
enfermedades que afectan a los peces en la acuicultura, así como en su tratamiento
posterior. Este trabajo se centra en el estudio de la forunculosis en el pez cebra, patología
provocada por Aeromonas salmonicida subsp. salmonicida, que genera grandes pérdidas
económicas en la industria acuícola. Se evaluó la mortalidad y las propiedades
fluorescentes de A. salmonicida marcada con dos sondas fluorescentes en larvas de pez
cebra. Las sondas empleadas son la proteína verde fluorescente (GFP) y un conjugado
sideróforo amonabactina - sulforodamina B (AMB-SRB), cuyas propiedades se
analizaron mediante microscopia de fluorescencia convencional y de barrido láser
confocal. Se obtuvieron imágenes de la distribución de ambas sondas en las larvas de pez
cebra y, en consecuencia, de A. salmonicida. Se demostró que la bacteria provoca un
efecto nocivo sobre el pez cebra, llegando a provocar la muerte al exponerse a la mayor
concentración ensayada. En cuanto a la fluorescencia de las sondas, la señal de ambas se
observa en el tracto digestivo, mostrándose mayor intensidad con la bacteria marcada con
GFP. Estos resultados son útiles para profundizar en el estudio de la forunculosis en peces
de acuicultura.[Resumo]: O peixe cebra (Danio rerio) é un potencial organismo modelo no estudio das
enfermidades que afectan aos peixes na acuicultura, así como no seu tratamento posterior.
Este traballo céntrase no estudo da furunculose no peixe cebra, patoloxía provocada por
Aeromonas salmonicida subsp. salmonicida, que xera grandes pérdidas económicas na
industria acuícola. Avaliouse a mortalidade e as propiedades fluorescentes de A.
salmonicida marcada con dúas sondas fluorescentes en larvas de peixe cebra. As sondas
empregadas son a proteína verde fluorescente (GFP) e un conxugado sideróforo
amonabactina - sulforodamina B (AMB-SRB), cuxas propiedades foron analizadas
mediante microscopia de fluorescencia convencional e de varrido láser confocal.
Obtivéronse imaxes da distribución de ambas sondas nas larvas de peixe cebra e, en
consecuencia, de A. salmonicida. Demostrouse que a bacteria provoca un efecto nocivo
sobre o peixe cebra, chegando a provocar a morte ao exponerse á maior concentración
probada. En canto á fluorescencia das sondas, o sinal de ambas obsérvase no tracto
dixestivo, mostrándose maior intensidade coa bacteria marcada con GFP. Estes resultados
son útiles para profundizar no estudo da furunculose en peixes de acuicultura.[Abstract]: The zebrafish (Danio rerio) is a potential model organism in the study of diseases that
affect fish in aquaculture, as well as in their subsequent treatment. This work focuses on
the study of furunculosis in zebrafish, a pathology caused by Aeromonas salmonicida
subps. salmonicida, which generates large economic losses in the aquaculture industry.
Mortality and fluorescent properties of A. salmonicida labeled with two fluorescent
probes were evaluated in zebrafish larvae. The probes used are the green fluorescent
protein (GFP) and the siderophore amonabactin - sulforhodamine B conjugate (AMBSRB),
whose properties were analyzed by convencional and confocal laser scanning
fluorescence microscopy. Images of the distribution of both probes in zebrafish larvae
and, consequently, of A. salmonicida was obtained. The bacteria was shown to cause a
harmful effect on zebrafish, leading to death upon exposure to the highest concentration
tested. As for the fluorescence of the probes, the signal of both is observed in the digestive
tract, showing great intensity with the bacteria labeled with GFP. These results are useful
to deepen the study of furunculosis in aquaculture fish.Traballo fin de grao (UDC.CIE). Bioloxía. Curso 2021/202
